專利名稱：重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥物制劑領(lǐng)域，具體涉及一種重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
重組人抗血栓蛋白(RecombinantHuman Anti thrombus Protein)系經(jīng)大腸桿菌發(fā)酵表達(dá)的重組DNA制品類抗血栓藥物。它是一種以活化血小板為靶點，將分子聚集在血栓部位，并通過其分子中各主要結(jié)構(gòu)域行使但發(fā)揮比之更高效的抗血栓功能，達(dá)到全面、高效抗血栓作用的重組蛋白質(zhì)藥物，同時其靶向性也賦予了該藥物較高的安全性。中國專利文獻(xiàn)CN1286262A公開的人胎盤抗凝蛋白介導(dǎo)的抗凝蛋白即為重組人抗血栓蛋白。重組人抗血栓蛋白的水溶液穩(wěn)定性較差，將其按2 8°C保存，純度和生物學(xué)活性下降較快，保存時間太短。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的之一是克服上述問題，提供一種穩(wěn)定性較好的重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑。本發(fā)明的另一目的是提供上述重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑的制備方法。實現(xiàn)本發(fā)明目的之一的技術(shù)方案是一種重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑，它是由重組人抗血栓蛋白、賦形劑、緩沖液以及注射用水制成；所述賦形劑為甘露醇和/或甘氨酸；所述緩沖液由緩沖劑與PH調(diào)節(jié)劑組成。相對于重組人抗血栓蛋白100重量份計，甘露醇為50 19000重量份，甘氨酸為0 16000重量份，緩沖劑為10 3000重量份。優(yōu)選的是，相對于重組人抗血栓蛋白100重量份計，甘露醇為200 4000重量份，甘氨酸為0 2000重量份，緩沖劑為200 1200重量份。所述的緩沖劑為組氨酸、精氨酸、TRIS (三羥甲基氨基甲烷)、磷酸鹽中的一種或者兩種。所述pH調(diào)節(jié)劑為堿溶液或者酸溶液，優(yōu)選氫氧化鈉溶液或者鹽酸溶液。pH調(diào)節(jié)劑的量為使冷凍干燥前的溶液的PH值調(diào)節(jié)至6. 0 9. O。注射用水的重量低于凍干粉針劑總重量的3%。實現(xiàn)本發(fā)明另一目的的技術(shù)方案是一種重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑的制備方法，具有以下步驟①將賦形劑和緩沖劑加入到注射用水中溶解；所述賦形劑為甘露醇和/或甘氨酸；②向步驟①得到的溶液中加入重組人抗血栓蛋白，混合均勻，用PH調(diào)節(jié)劑將溶液的PH值調(diào)至6. 0 9. 0 ;然后加足注射用水；③用微孔濾膜對步驟②得到的溶液進(jìn)行過濾除菌，得到濾液；④將步驟③得到的濾液按重組人抗血栓蛋白每瓶0. 5 IOmg計，分裝于管制瓶中，置于冷凍干燥機(jī)中凍干即可。上述步驟①和步驟②中，相對于重組人抗血栓蛋白100重量份計，甘露醇為50 、19000重量份，甘氨酸為0 16000重量份，緩沖劑為10 3000重量份。上述步驟①和步驟②中，優(yōu)選的是，相對于重組人抗血栓蛋白100重量份計，甘露醇為200 4000重量份，甘氨酸為0 2000重量份，緩沖劑為200 1200重量份。上述步驟①中所述的緩沖劑為組氨酸、精氨酸、TRIS (三羥甲基氨基甲烷)、磷酸鹽中的一種或者兩種。上述步驟③中，微孔濾膜孔徑為0. 22 u m。上述步驟④中的凍干過程為先預(yù)凍至_40°C，保持60 120min ;然后抽真空，在600min內(nèi)升溫至(TC，保溫240min ;接著在150min內(nèi)升溫至25°C，保溫240min ;最后至水分重量低于凍干粉針劑總重量的3%結(jié)束凍干。本發(fā)明具有的積極效果本發(fā)明制得的凍干粉針劑呈多孔狀，克服了常溫下水溶液不穩(wěn)定的問題，在2 8°C可長期穩(wěn)定存放，而且重新復(fù)水可迅速恢復(fù)活性，既有效保證了產(chǎn)品在生產(chǎn)和存放過程的穩(wěn)定性，又方便臨床使用。
具體實施例方式(實施例I)
本實施例的重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑每瓶含有0. 5mg的重組人抗血栓蛋白、20mg的甘露醇、I. 2mg的磷酸二氫鈉。另外，還含有極少量的pH調(diào)節(jié)劑以及低于凍干粉針劑總重量的3%的注射用水。本實施例的重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑的制備方法具有以下步驟
①準(zhǔn)確稱取20g的甘露醇、I. 2g的磷酸二氫鈉，并加入到400g的注射用水中溶解。②向步驟①得到的溶液中加入0. 5g的重組人抗血栓蛋白，混合均勻，用lmol/L的鹽酸溶液將溶液的PH值調(diào)至7. 0±0. 2 ;然后加足注射用水至溶液總重量為500g。③用孔徑為0. 22 y m的微孔濾膜對步驟②得到的溶液進(jìn)行過濾除菌，得到濾液。④將步驟③得到的濾液分裝于1000支管制瓶中，半加塞后置于冷凍干燥機(jī)中凍干。具體過程為先預(yù)凍至_40°C，保持120min。然后抽真空，在600min內(nèi)升溫至(TC，保溫240min。接著在150min內(nèi)升溫至25°C，保溫240min。最后至水分重量低于凍干粉針劑總重量的3%結(jié)束凍干。凍干后依次進(jìn)行真空壓塞、軋蓋、貼標(biāo)簽，即得凍干粉針劑，并保存在2 8°C。(實施例2 實施例5)
各實施例與實施例I基本相同，不同之處見表I。表I權(quán)利要求
1.一種重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑，其特征在于由重組人抗血栓蛋白、賦形劑、緩沖液以及注射用水制成；所述賦形劑為甘露醇和/或甘氨酸；所述緩沖液由緩沖劑與PH調(diào)節(jié)劑組成。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑，其特征在于相對于重組人抗血栓蛋白100重量份計，甘露醇為50 19000重量份，甘氨酸為O 16000重量份，緩沖劑為10 3000重量份。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑，其特征在于相對于重組人抗血栓蛋白100重量份計，甘露醇為200 4000重量份，甘氨酸為O 2000重量份，緩沖劑為200 1200重量份。
4.根據(jù)權(quán)利要求I至3之一所述的重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑，其特征在于所述的緩沖劑為組氨酸、精氨酸、TRIS、磷酸鹽中的一種或者兩種。
5.權(quán)利要求I所述的重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑的制備方法，其特征在于具有以下步驟 ①將賦形劑和緩沖劑加入到注射用水中溶解；所述賦形劑為甘露醇和/或甘氨酸； ②向步驟①得到的溶液中加入重組人抗血栓蛋白，混合均勻，用PH調(diào)節(jié)劑將溶液的pH值調(diào)至6. O 9. O ;然后加足注射用水； ③用微孔濾膜對步驟②得到的溶液進(jìn)行過濾除菌，得到濾液； ④將步驟③得到的濾液按重組人抗血栓蛋白每瓶O.5 IOmg計，分裝于管制瓶中，置于冷凍干燥機(jī)中凍干即可。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑的制備方法，其特征在于步驟①和步驟②中，相對于重組人抗血栓蛋白100重量份計，甘露醇為50 19000重量份，甘氨酸為O 16000重量份，緩沖劑為10 3000重量份。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑的制備方法，其特征在于步驟①和步驟②中，相對于重組人抗血栓蛋白100重量份計，甘露醇為200 4000重量份，甘氨酸為O 2000重量份，緩沖劑為200 1200重量份。
8.根據(jù)權(quán)利要求5至7之一所述的重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑的制備方法，其特征在于步驟①中所述的緩沖劑為組氨酸、精氨酸、TRIS、磷酸鹽中的一種或者兩種。
9.根據(jù)權(quán)利要求5至7之一所述的重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑的制備方法，其特征在于步驟④中的凍干過程為先預(yù)凍至_40°C，保持60 120min ;然后抽真空，在600min內(nèi)升溫至(TC，保溫240min ;接著在150min內(nèi)升溫至25°C，保溫240min ;最后至水分重量低于凍干粉針劑總重量的3%結(jié)束凍干。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑的制備方法，其特征在于步驟④中的凍干過程為先預(yù)凍至_40°C，保持60 120min ;然后抽真空，在600min內(nèi)升溫至(TC，保溫240min ;接著在150min內(nèi)升溫至25°C，保溫240min ;最后至水分重量低于凍干粉針劑總重量的3%結(jié)束凍干。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑及其制備方法。該重組人抗血栓蛋白凍干粉針劑由重組人抗血栓蛋白、賦形劑、緩沖液以及注射用水制成。具體方法是將賦形劑和緩沖劑先加入到注射用水中溶解，然后加入重組人抗血栓蛋白，混合均勻，調(diào)節(jié)溶液pH值為6.0～9.0，接著加足注射用水，用微孔濾膜過濾除菌，將得到濾液按重組人抗血栓蛋白每瓶0.5～10mg計，分裝于管制瓶中，最后置于冷凍干燥機(jī)中凍干即可。本發(fā)明制得的凍干粉針劑呈多孔狀，克服了常溫下水溶液不穩(wěn)定的問題，在2～8℃可長期穩(wěn)定存放，而且重新復(fù)水可迅速恢復(fù)活性，既有效保證了產(chǎn)品在生產(chǎn)和存放過程的穩(wěn)定性，又方便臨床使用。
文檔編號A61K38/17GK102631328SQ20121013571
公開日2012年8月15日 申請日期2012年5月4日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月4日
發(fā)明者吳海燕, 徐小曉, 杭長標(biāo), 袁建雷 申請人:常州千紅生化制藥股份有限公司