專利名稱：一種可體內(nèi)注射的藥物緩釋栓劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，本發(fā)明涉及含氰基丙烯酸酯和油酸的注射緩釋制劑輔料。另外，本發(fā)明還涉及包含上述注射緩釋制劑輔料和活性藥物(包括小分子藥物和蛋白質(zhì)，如紫杉醇、人生長(zhǎng)激素等)的注射緩釋制劑。
背景技術(shù)：
氰基丙烯酸酯(cyanoacrylate，CA)包括氰基丙烯酸甲酯(methyl 2_cyanoacrylate，MCA)，氰基丙烯酸乙酯(ethyl-2-cyanoacrylate，ECA)，氰基丙烯酸正丁酉旨(n_butyl cyanoacrylate, BCA),氛基丙；！；希酸異丁酉旨(isobutyl cyanoacrylate, IBCA), 氰基丙烯酸正辛酯0-octyl cyanoacrylate,OCA)等，都為無色透明流動(dòng)性良好的液體，遇水即聚合固化。這是由于氰基丙烯酸酯分子上的-CN和-C00R基團(tuán)的吸電子性，使得弱堿性的水或醇就能引發(fā)它發(fā)生陰離子聚合反應(yīng)，從而起到粘接物質(zhì)的作用，因此在膠粘劑中被廣泛應(yīng)用，如為大眾所知的502膠水其主要成分就是氰基丙烯酸乙酯，另外部分504 (主膠為氰基丙烯酸正丁酯)、508(主膠為氰基丙烯酸正辛酯)等已經(jīng)被用作為手術(shù)的粘合劑。除了作為醫(yī)用膠粘劑使用外，也有將其用于藥物緩釋輔料。其中研究最多的是用氰基丙烯酸正丁酯(BCA)制備納米微粒。但是結(jié)果表明，環(huán)孢素A、阿柔比星、阿奇霉素等藥物的BCA納米微粒一般在72小時(shí)內(nèi)就釋藥完畢，其突釋效應(yīng)甚至達(dá)到60%，還遠(yuǎn)不能達(dá)到理想的藥物緩釋要求。而且，這些緩釋制劑多為口服制劑，但口服緩釋制劑一般存在藥物的釋藥曲線不穩(wěn)定、緩釋時(shí)間短等問題。另外，由于氰基丙烯酸酯為液態(tài)，注射到體內(nèi)與水反應(yīng)后可迅速轉(zhuǎn)變?yōu)楣虘B(tài)，有人用它作為血管的栓塞劑用于血管瘤和其它腫瘤的治療。臨床結(jié)果表明其對(duì)血管的栓塞具有良好的效果。但由于其遇水即固化的特點(diǎn)，使得臨床使用過程中有可能堵住針頭，對(duì)操作要求高，另外還有在血管中血流的沖擊下彌散出的大量微粒聚集在肺部造成致死病例。氰基丙烯酸酯在體內(nèi)的生物降解時(shí)間也有不確定性。如作為醫(yī)用膠粘劑，30天內(nèi)可完全降解，但也有半年后還未降解完全的報(bào)道；而作為栓塞可存在于體內(nèi)2年以上。這令臨床醫(yī)生頗為頭疼。為此，本發(fā)明人通過艱苦的摸索，通過大量的研究，在各種CA單體和碘化油、油酸、亞油酸、亞麻酸、檸檬酸的及其各種酯(如，油酸乙酯、、亞油酸乙酯、亞麻酸乙酯、檸檬酸三丁酯等)和其他市售藥用級(jí)植物油(橄欖油、罌粟籽油、芝麻油)等大量試劑進(jìn)行各種比例的藥劑學(xué)實(shí)驗(yàn)，最終發(fā)現(xiàn)特定比例條件下，油酸和油酸乙酯的流動(dòng)性好，而且與BCA互溶后，混合物穩(wěn)定，粘性或顆粒小，注射時(shí)不易堵塞針頭，也無需借助容易給病人帶來較大創(chuàng)傷的大孔徑注射針頭；凝固性質(zhì)穩(wěn)定，不會(huì)彌散出大量微粒，對(duì)小分子藥物和蛋白質(zhì)都具有很好的緩釋作用，并可以杜絕突釋現(xiàn)象的發(fā)生。因此，該混合配方可以作為局部注射用緩釋制劑的輔料，通過局部注射途徑給藥，可以直接向所希望產(chǎn)生緩釋釋給藥的部位進(jìn)行注射，在特定的部位產(chǎn)生活性，不會(huì)對(duì)全身系統(tǒng)產(chǎn)生顯著影響(如，只需要局部麻藥或者局部止痛藥)，增加治療效果，并產(chǎn)生緩釋作用，減少給藥次數(shù)，提高病人的順應(yīng)性。另外，醫(yī)藥級(jí)可注射的油酸乙酯價(jià)格相對(duì)不貴，使得藥物成本能得以降低。本發(fā)明人尤其具體建立了該輔料配方與紫杉醇和hGH的藥物組合，制備成可注射液態(tài)膠制劑，通過常規(guī)口徑(如，32G、 26G)注射針頭即可實(shí)施注射，注射到人體內(nèi)后迅速固化，無顯著彌散微粒產(chǎn)生，并逐步釋放出紫杉醇，在用藥安全性和療效上都取得了顯著的進(jìn)步。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是對(duì)藥物制劑(尤其是注射用藥物制劑)中的輔料加以優(yōu)化，使得其在流動(dòng)性、凝固時(shí)間、彌散性微粒和/或緩釋效果等方面取得優(yōu)異的效果。具體而言，在第一方面，本發(fā)明提供了注射用緩釋藥物制劑的輔料，所述輔料包括體積比為18 85 15 72的氰基丙烯酸酯和溶劑，所述溶劑選自油酸或油酸乙酯，而且所述輔料不含水。優(yōu)選本發(fā)明第一方面的輔料，其由氰基丙烯酸酯和油酸組成，其中氰基丙烯酸酯和溶劑的體積比為18 85 15 72，優(yōu)選為20 80 10 80。在本發(fā)明的具體實(shí)施方式
中，氰基丙烯酸酯和溶劑的體積比優(yōu)選如20 80,40 60,60 40、或80 20，又如 50 50。在本文中，如無相反指示，體積比指的是在室溫(20 )下的體積的比例。優(yōu)選本發(fā)明第一方面的輔料，其中氰基丙烯酸酯是氰基丙烯酸正丁酯。經(jīng)過本發(fā)明人的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，氰基丙烯酸正丁酯較之氰基丙烯酸甲酯或氰基丙烯酸乙酯凝結(jié)更緩和， 不易堵塞針頭，產(chǎn)生的彌散性微粒量也較少，因此最優(yōu)選采用氰基丙烯酸正丁酯。在第二方面，本發(fā)明提供了注射用緩釋藥物制劑，其包含藥物活性成分和本發(fā)明第一方面的輔料，優(yōu)選其由藥物活性成分和本發(fā)明第一方面的輔料組成。本發(fā)明人研究發(fā)現(xiàn)，由于本發(fā)明第一方面的輔料在生理環(huán)境下具有與氰基丙烯酸酯濃度正相關(guān)的緩釋效果，無明顯的藥物擴(kuò)散效應(yīng)，因此藥物活性成分可以按照緩釋所持續(xù)的時(shí)間內(nèi)給藥總量添加，如，藥物活性成分和本發(fā)明第一方面的輔料的重量體積比(mg/ml)可以是0.01 50 0. 2，優(yōu)選為0. 1 10 0. 2，在本發(fā)明的具體實(shí)施方式
中，為0. 5 2 0.2。優(yōu)選本發(fā)明第二方面的制劑，其中藥物活性成分是小分子藥物化合物或蛋白質(zhì)。 在本發(fā)明的具體實(shí)施方式
中，藥物活性成分是紫杉醇或人生長(zhǎng)激素。在第三方面，本發(fā)明提供了本發(fā)明第一方面的輔料在制備注射用緩釋藥物制劑中的應(yīng)用。優(yōu)選本發(fā)明第三方面的應(yīng)用，其中緩釋藥物制劑是給藥頻率不大于4次/月(優(yōu)選不大于1次/月)的緩釋藥物制劑。經(jīng)過本發(fā)明人的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在一定濃度下，緩釋所持續(xù)的時(shí)間能夠長(zhǎng)達(dá)一個(gè)月以上，而且緩釋期間藥物濃度穩(wěn)定，因此本發(fā)明第一方面的輔料可以制備緩釋時(shí)間長(zhǎng)的緩釋藥物制劑。優(yōu)選本發(fā)明第三方面的應(yīng)用，其中緩釋藥物制劑是本發(fā)明第二方面的制劑。在第四方面，本發(fā)明提供了本發(fā)明第二方面的制劑的制備方法，其包括，(1)均勻混合氰基丙烯酸酯和溶劑，所述溶劑選自油酸或油酸乙酯，從而獲得本發(fā)明第一方面的輔料；和(2)將藥物活性成分加入本發(fā)明第一方面的輔料中，混合均勻。上述方法適合于小分子藥物，如紫杉醇。由于蛋白質(zhì)具有折疊結(jié)構(gòu)，為了防止變性而不溶解，本發(fā)明提供了可替代的制劑的制備方法。在又一個(gè)方面，本發(fā)明提供了本發(fā)明第二方面的制劑的制備方法，其包括，(1)均勻混合溶劑和藥物活性成分，所述溶劑選自油酸或油酸乙酯，所述藥物活性成分是蛋白質(zhì)，從而獲得混合物；和(2)將氰基丙烯酸酯加入上述混合物中，混合均勻。在第五方面，本發(fā)明提供了控制注射用緩釋藥物制劑體內(nèi)降解速度的方法，該方法包括改變本發(fā)明第一方面的輔料中氰基丙烯酸酯相對(duì)于溶劑的體積比，而且該方法不包括體內(nèi)實(shí)施的步驟。該方法本質(zhì)上是體外實(shí)施的藥物制備的方法，盡管其最終產(chǎn)物可以改變體內(nèi)降解速度。本發(fā)明人研究發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明第一方面的輔料在生理環(huán)境下，氰基丙烯酸酯濃度越大，緩釋效果越好，藥物制劑體內(nèi)降解速度越慢。因此，本發(fā)明提供了增加注射用緩釋藥物制劑體內(nèi)降解速度的方法，該方法包括降低本發(fā)明第一方面的輔料中氰基丙烯酸酯相對(duì)于溶劑的體積比，而且該方法不包括體內(nèi)實(shí)施的步驟。另外，本發(fā)明還提供了減少注射用緩釋藥物制劑體內(nèi)降解速度的方法，該方法包括增加本發(fā)明第一方面的輔料中氰基丙烯酸酯相對(duì)于溶劑的體積比，而且該方法不包括體內(nèi)實(shí)施的步驟。本發(fā)明相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)，在流動(dòng)性、凝固時(shí)間、彌散性微粒和/或緩釋效果等方面取得了有益效果。為了便于理解，以下將通過具體的附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)地描述。需要特別指出的是，具體實(shí)例和附圖僅是為了說明，并不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明范圍的限制。顯然本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員可以根據(jù)本文說明，在本發(fā)明的范圍內(nèi)對(duì)本發(fā)明做出各種各樣的修正和改變，這些修正和改變也納入本發(fā)明的范圍內(nèi)。


圖1顯示了油酸中氰基丙烯酸正丁酯濃度對(duì)緩釋劑凝固性能的影響，其中，各編號(hào)的照片所對(duì)應(yīng)的濃度關(guān)系如下1、100%油酸；2、5%氰基丙烯酸正丁酯；3、10%氰基丙烯酸正丁酯；4、20%氰基丙烯酸正丁酯；5、40%氰基丙烯酸正丁酯。圖2顯示了氰基丙烯酸正丁酯對(duì)甲基綠釋放的影響，其中左圖不含氰基丙烯酸正丁酯的油酸；右圖含20% (體積)氰基丙烯酸正丁酯的油酸。圖3顯示了油酸乙酯中氰基丙烯酸正丁酯濃度對(duì)緩釋劑凝固性能的影響，其中， 從左至右的照片所對(duì)應(yīng)的濃度關(guān)系如下100%油酸；5%氰基丙烯酸正丁酯；10%氰基丙烯酸正丁酯；20%氰基丙烯酸正丁酯；40%氰基丙烯酸正丁酯。圖4顯示了氰基丙烯酸正丁酯對(duì)甲基綠釋放的影響，其中左圖不含氰基丙烯酸正丁酯的油酸乙酯；右圖含20% (體積)氰基丙烯酸正丁酯的油酸乙酯。
具體實(shí)施例方式以下本文將通過具體的實(shí)施例來描述發(fā)明。如未特別指明之處，可根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟悉的《制劑技術(shù)百科全書(第2版》(科學(xué)出版社，2009)、《藥物制劑技術(shù)與設(shè)備 (第二版)》(化學(xué)工業(yè)出版社，2010)等手冊(cè)所列的方法來實(shí)施。另外，實(shí)施例中所使用的材料除有特別說明外，均可通過商業(yè)途徑從市場(chǎng)上購買的醫(yī)藥級(jí)產(chǎn)品。
實(shí)施例1油酸和氰基丙烯酸正丁酯比例關(guān)系的摸索實(shí)驗(yàn)在油酸中，分別加入α-氰基丙烯酸正丁酯，使氰基丙烯酸正丁酯的終濃度(V/V) 分別為0 (即，未加入氰基丙烯酸正丁酯),5%,10%,20%,40%,60%,80%,混勻后24°C靜置48小時(shí)，各比例混合物均未發(fā)現(xiàn)分層，流動(dòng)性相對(duì)于同期實(shí)驗(yàn)的亞油酸乙酯、亞麻酸乙酯、碘化油、檸檬酸三丁酯、橄欖油、罌粟籽油、芝麻油更佳。取上述各比例混合物300ul，然后加入50ul的20mmol/L pH 7. 4的PBS緩沖液，混勻后靜置10分鐘。結(jié)果如圖1所示，純油酸管性狀不變，下層為PBS溶液，氰基丙烯酸正丁酯濃度為5%和10%管濁度明顯增加， 呈凝膠狀，流動(dòng)性變差。而10%濃度的流動(dòng)性比5%濃度管流動(dòng)性要差，但是未完全凝結(jié)。 20%及以上濃度管中的緩釋劑全部凝結(jié)成固體，即使反應(yīng)管倒置也不流動(dòng)，無明顯的彌散顆粒產(chǎn)生，相對(duì)于同期實(shí)驗(yàn)的亞油酸乙酯、亞麻酸乙酯、碘化油、檸檬酸三丁酯、橄欖油、罌粟籽油、芝麻油、亞油酸、亞麻酸的穩(wěn)定性更好。另外，用氰基丙烯酸甲酯或氰基丙烯酸乙酯替代α-氰基丙烯酸正丁酯進(jìn)行上述實(shí)驗(yàn)，遇水凝結(jié)速度過快，在實(shí)踐中容易阻塞針頭，并且容易產(chǎn)生彌散顆粒；另外在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，似乎對(duì)小鼠有一定刺激性(小鼠反抗明顯加劇)，故棄用。實(shí)施例2油酸和氰基丙烯酸正丁酯混合物的藥物擴(kuò)散效應(yīng)在200ul的不含氰基丙烯酸正丁酯的油酸中和200ul的含20% (體積)氰基丙烯酸正丁酯的油酸中，各加入直徑50微米的甲基綠粉末ang，混勻后將兩者分別放入透析袋中，在PBS中透析。結(jié)果如圖2所示，純油酸中的甲基綠很快釋放出來，使得PBS變綠，但含20%氰基丙烯酸正丁酯的油酸很快凝固，30分鐘后也基本沒有甲基綠擴(kuò)散到PBS中(即 PBS溶液仍舊清澈)。兩者持續(xù)透析，3天后油酸中的甲基綠被基本透析完全，而含20%氰基丙烯酸正丁酯的油酸中甲基綠在30天后還是保持原來的量(即PBS溶液仍舊清澈)。這表明，含氰基丙烯酸正丁酯的油酸遇水凝固后，使得甲基綠分子被固定，在沒有降解的情況下，該凝固物可以消除藥物擴(kuò)散效應(yīng)，即該凝固物釋放小分子的速度依賴于生物體能被降解的速度，因此可以避免突釋效應(yīng)的產(chǎn)生；而同期采用亞麻酸乙酯、碘化油、檸檬酸三丁酯、 橄欖油、罌粟籽油、芝麻油的對(duì)照，則仍舊有一定的藥物擴(kuò)散效應(yīng)。結(jié)果表明，在同樣濃度下，油酸和氰基丙烯酸正丁酯的組合對(duì)藥物的固定作用最明顯。實(shí)施例3油酸和氰基丙烯酸正丁酯的小分子藥物的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)在油酸中，分別加入α-氰基丙烯酸正丁酯，使氰基丙烯酸正丁酯的終濃度(V/V) 分別為0 ( S卩，未加入氰基丙烯酸正丁酯)，5 %，10 %，20 %，40 %，60 %，80 %，混勻后各取 200ul，并各自加入2毫克的直徑為IOOnm的紫杉醇納米粉末(購自杭州美亞生物技術(shù)公司)，混勻后用32G注射針頭注射器分別注射到小鼠皮下。30天斷頸后處死小鼠，切下注射部位組織，分離出凝固的藥栓(即凝固物，前兩個(gè)濃度的已經(jīng)完全降解)，60°C干燥后研磨成粉末，用氯仿抽提其中剩余的紫杉醇藥物，用紫杉醇標(biāo)準(zhǔn)品作對(duì)照，以HPLC檢測(cè)濃度并計(jì)算剩余藥物的總量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，注射到小鼠體內(nèi)30天后，剩余紫杉醇藥物的量分別為初始量的0，0，15%，34%，52%，76%。這說明，本發(fā)明的藥物能夠在生理?xiàng)l件下降解并釋放出其中的小分子藥物，殘留其中小分子藥物得到了有效保護(hù)(即使歷經(jīng)30天，性質(zhì)與標(biāo)準(zhǔn)品也無異)，而且隨著其中氰基丙烯酸正丁酯濃度的增加，對(duì)藥物的緩釋作用呈現(xiàn)明顯的正相關(guān)的增加，在同樣的時(shí)間內(nèi)擴(kuò)散到組織細(xì)胞中的藥物量更少。在上述實(shí)驗(yàn)中，沒有出現(xiàn)堵住針孔的現(xiàn)象，不影響其注射過程；而在同期采用亞油酸乙酯、亞麻酸乙酯、碘化油和檸檬酸三丁酯的實(shí)驗(yàn)中，在超過50%濃度的情況下會(huì)出現(xiàn)堵塞針頭的情況，而且與實(shí)施例2的結(jié)果一致，它們對(duì)藥物的緩釋作用也沒有油酸和氰基丙烯酸正丁酯的組合優(yōu)越。實(shí)施例4油酸和氰基丙烯酸正丁酯的大分子藥物的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)將冷凍干燥的重組人生長(zhǎng)激素(rhGH)(購自長(zhǎng)春金賽藥業(yè)股份有限公司)用行星式球磨儀研磨后，得到直徑約1微米的粉末。先在IOOul油酸中加入0. 5mg的上述rhGH粉末，再加入α-氰基丙烯酸正丁酯lOOul，使氰基丙烯酸正丁酯的終濃度(V/V)為50%，混勻后用26G注射針頭注射器注射到小鼠皮下。另設(shè)不加rhGH粉末的含50%氰基丙烯酸正丁酯的油酸作為對(duì)照組1，直接注射rhGH的作為對(duì)照組2。每周眼眶靜脈取血一次，用rhGH ELISA試劑盒(購自R&D公司)進(jìn)行檢測(cè)，持續(xù)檢測(cè)1個(gè)月。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，用藥組的血液中hGH 的濃度始終比兩個(gè)對(duì)照組高9. 5倍(表明蛋白藥物在動(dòng)物體內(nèi)一周內(nèi)就降解到本底)，并且隨著時(shí)間的推移，濃度并沒有減少。這說明緩釋劑對(duì)rhGH具有緩釋作用。在上述實(shí)驗(yàn)中， 沒有出現(xiàn)堵住針孔的現(xiàn)象，不影響其注射過程；而在同期采用亞油酸乙酯、亞麻酸乙酯、碘化油和檸檬酸三丁酯的實(shí)驗(yàn)中，在超過50%濃度的情況下會(huì)出現(xiàn)堵塞針頭的情況，而且它們對(duì)藥物的緩釋作用也沒有油酸和氰基丙烯酸正丁酯的組合優(yōu)越。實(shí)施例5油酸乙酯和氰基丙烯酸正丁酯比例關(guān)系的摸索實(shí)驗(yàn)在油酸乙酯中，分別加入α-氰基丙烯酸正丁酯，使氰基丙烯酸正丁酯的終濃度 (V/V)分別為0( S卩，未加入氰基丙烯酸正丁酯)，5%，10%，20%，40%，60%，80%，混勻后
靜置48小時(shí)，各比例混合物均未發(fā)現(xiàn)分層，流動(dòng)性相對(duì)于同期實(shí)驗(yàn)的亞油酸乙酯、亞麻酸乙酯、碘化油、檸檬酸三丁酯、橄欖油、罌粟籽油、芝麻油更佳，而且其流動(dòng)性甚至比油酸更好，這更有利于順利的將藥物注射到體內(nèi)。取上述各比例混合物300ul，然后加入50ul 的20mmol/L pH 7. 4的PBS緩沖液，混勻后靜置10分鐘。結(jié)果如圖3所示，純油酸乙酯管性狀不變，下層為PBS溶液，氰基丙烯酸正丁酯濃度為5%和10%管濁度明顯增加，呈凝膠狀， 流動(dòng)性變差。而10%濃度的流動(dòng)性比5%濃度管流動(dòng)性要差，但是未完全凝結(jié)。20%及以上濃度管中的緩釋劑全部凝結(jié)成固體，即使反應(yīng)管倒置也不流動(dòng)，無明顯的彌散顆粒產(chǎn)生， 相對(duì)于同期實(shí)驗(yàn)的亞油酸和亞麻酸穩(wěn)定性更好。實(shí)施例6油酸乙酯和氰基丙烯酸正丁酯混合物的藥物擴(kuò)散效應(yīng)在200ul的不含氰基丙烯酸正丁酯的油酸乙酯中和200ul的含20% (體積)氰基丙烯酸正丁酯的油酸乙酯中，各加入直徑50微米的甲基綠粉末ang，混勻后將兩者分別放入透析袋中，在PBS中透析。結(jié)果如圖2所示，純油酸乙酯中的甲基綠很快釋放出來，使得 PBS變綠，但含20%氰基丙烯酸正丁酯的油酸乙酯很快凝固，30分鐘后也基本沒有甲基綠擴(kuò)散到PBS中(即PBS溶液仍舊清澈)。兩者持續(xù)透析，3天后油酸中的甲基綠被基本透析完全，而含20%氰基丙烯酸正丁酯的油酸乙酯中甲基綠在30天后約保持原來的量的95%。 這表明，含氰基丙烯酸正丁酯的油酸乙酯遇水凝固后，使得甲基綠分子被固定，在沒有降解的情況下，該凝固物可以基本消除藥物擴(kuò)散效應(yīng)，即該凝固物釋放小分子的速度依賴于生物體能被降解的速度，因此可以避免突釋效應(yīng)的產(chǎn)生；而同期采用亞麻酸乙酯、碘化油、檸檬酸三丁酯、橄欖油、罌粟籽油、芝麻油的對(duì)照，則仍舊有一定的藥物擴(kuò)散效應(yīng)，在同樣的氰基丙烯酸正丁酯濃度下，對(duì)藥物的保留作用要比油酸乙酯差。實(shí)施例7油酸乙酯和氰基丙烯酸正丁酯的小分子藥物的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)在油酸乙酯中，分別加入α-氰基丙烯酸正丁酯，使氰基丙烯酸正丁酯的終濃度(V/V)分別為0( S卩，未加入氰基丙烯酸正丁酯)，5%，10%，20%，40%，60%，80%，混勻后各取200ul，并各自加入2毫克的直徑為IOOnm的紫杉醇納米粉末，混勻后用32G注射針頭注射器分別注射到小鼠皮下。30天斷頸后處死小鼠，切下注射部位組織，分離出凝固的藥栓 (即凝固物，前兩個(gè)濃度的已經(jīng)完全降解)，60°C干燥后研磨成粉末，用氯仿抽提其中剩余的紫杉醇藥物，用紫杉醇標(biāo)準(zhǔn)品作對(duì)照，以HPLC檢測(cè)濃度并計(jì)算剩余藥物的總量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，注射到小鼠體內(nèi)30天后，剩余紫杉醇藥物的量分別為初始量的0,0,10^,^^,48%, 70%。這說明，本發(fā)明的藥物能夠在生理?xiàng)l件下降解并釋放出其中的小分子藥物，殘留其中小分子藥物得到了有效保護(hù)(即使歷經(jīng)30天，性質(zhì)與標(biāo)準(zhǔn)品也無異)，而且隨著其中氰基丙烯酸正丁酯濃度的增加，對(duì)藥物的緩釋作用呈現(xiàn)明顯的正相關(guān)的增加，在同樣的時(shí)間內(nèi)擴(kuò)散到組織細(xì)胞中的藥物量更少。在上述實(shí)驗(yàn)中，沒有出現(xiàn)堵住針孔的現(xiàn)象，不影響其注射過程；而在同期采用亞油酸乙酯、亞麻酸乙酯、碘化油和檸檬酸三丁酯的實(shí)驗(yàn)中，在超過50% 濃度的情況下會(huì)出現(xiàn)堵塞針頭的情況。在同樣濃度下，除了油酸和氰基丙烯酸正丁酯組合， 此組合對(duì)對(duì)藥物的固定作用在所試驗(yàn)的其它組合中最明顯。實(shí)施例8油酸乙酯和氰基丙烯酸正丁酯的大分子藥物的將冷凍干燥的重組人生長(zhǎng)激素(rhGH)(購自長(zhǎng)春金賽藥業(yè)股份有限公司)用行星式球磨儀研磨后，得到直徑約1微米的粉末。先在IOOul油酸乙酯中加入0. 5mg的上述 rhGH粉末，再加入α-氰基丙烯酸正丁酯lOOul，使氰基丙烯酸正丁酯的終濃度(V/V)為 50%，混勻后用26G注射針頭注射器注射到小鼠皮下。另設(shè)不加rhGH粉末的含50%氰基丙烯酸正丁酯的油酸作為對(duì)照組1，直接注射rhGH的作為對(duì)照組2。每周眼眶靜脈取血一次，用rhGH ELISA試劑盒(購自R&D公司)進(jìn)行檢測(cè)，持續(xù)檢測(cè)1個(gè)月。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，用藥組的血液中hGH的濃度始終比兩個(gè)對(duì)照組高11. 5倍(表明蛋白藥物在動(dòng)物體內(nèi)一周內(nèi)就降解到本底)，并且隨著時(shí)間的推移，濃度并沒有減少。這說明緩釋劑對(duì)rhGH具有緩釋作用。 這一組的動(dòng)物血液中藥物濃度比用油酸的組合物要高，說明其緩釋效果比油酸略差。但用油酸乙酯的該組合物的流動(dòng)性在所有試驗(yàn)類型緩釋劑中最好，這有利于用更細(xì)的針頭進(jìn)行注射和增加載藥量。在上述實(shí)驗(yàn)中，沒有出現(xiàn)堵住針孔的現(xiàn)象，不影響其注射過程；而在同期采用亞油酸乙酯、亞麻酸乙酯、碘化油和檸檬酸三丁酯的實(shí)驗(yàn)中，在超過50%濃度的情況下會(huì)出現(xiàn)堵塞針頭的情況，而且它們對(duì)藥物的緩釋作用也沒有油酸乙酯和氰基丙烯酸正丁酯的組合優(yōu)越。
權(quán)利要求
1.注射用緩釋藥物制劑的輔料，所述輔料包括體積比為18 85 15 72的氰基丙烯酸酯和溶劑，所述溶劑選自油酸或油酸乙酯，而且所述輔料不含水。
2.權(quán)利要求1所述的輔料，其由氰基丙烯酸酯和油酸組成，其中氰基丙烯酸酯和溶劑的體積比為18 85 15 72，優(yōu)選為20 80 10 80，如20 80,40 60,60 40、 或 80 20，又如 50 50。
3.權(quán)利要求1或2所述的輔料，其中氰基丙烯酸酯是氰基丙烯酸正丁酯。
4.注射用緩釋藥物制劑，其包含藥物活性成分和權(quán)利要求1 3之任一的輔料，或由藥物活性成分和權(quán)利要求1 3之任一的輔料組成。
5.權(quán)利要求4所述的制劑，其中藥物活性成分是小分子藥物化合物或蛋白質(zhì)，優(yōu)選是紫杉醇或人生長(zhǎng)激素。
6.權(quán)利要求1 3之任一的輔料在制備注射用緩釋藥物制劑中的應(yīng)用。
7.權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其中緩釋藥物制劑是給藥頻率不大于4次/月(優(yōu)選不大于1次/月)的緩釋藥物制劑。
8.權(quán)利要求6或7所述的應(yīng)用，其中緩釋藥物制劑是權(quán)利要求4或5所述的制劑。
9.權(quán)利要求4所述的制劑的制備方法，其包括，(1)均勻混合氰基丙烯酸酯和油酸，從而獲得權(quán)利要求1 3之任一的輔料；和(2)將藥物活性成分加入權(quán)利要求1 3之任一的輔料中，混合均勻；或者，(1)均勻混合溶劑和藥物活性成分，所述溶劑選自油酸或油酸乙酯，所述藥物活性成分是蛋白質(zhì)，從而獲得混合物；和(2)將氰基丙烯酸酯加入上述混合物中，混合均勻。
10.控制、增加或減少注射用緩釋藥物制劑體內(nèi)降解速度的方法，該方法包括改變、降低或增加權(quán)利要求1 3之任一的輔料中氰基丙烯酸酯相對(duì)于溶劑的體積比，所述溶劑選自油酸或油酸乙酯，而且該方法不包括體內(nèi)實(shí)施的步驟。
全文摘要
本發(fā)明提供了含氰基丙烯酸酯和油酸的注射緩釋制劑輔料。另外，本發(fā)明還提供了包含上述注射緩釋制劑輔料和活性藥物(包括小分子藥物和蛋白質(zhì)，如紫杉醇、人生長(zhǎng)激素等)的注射緩釋制劑。
文檔編號(hào)A61K38/27GK102389571SQ201110372530
公開日2012年3月28日 申請(qǐng)日期2011年11月22日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月22日
發(fā)明者朱成鋼 申請(qǐng)人:朱成鋼