專利名稱：：β-氨基醇用于治療炎性病癥和疼痛的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及P-氨基醇用于治療炎性病癥和疼痛的用途。
背景技術(shù)：
：免疫驅(qū)動(dòng)的炎性事件是許多慢性炎性疾病的重要原因，在這些慢性炎性病癥中，長期的炎癥引起組織破壞并導(dǎo)致廣泛的損傷，最終導(dǎo)致被影響器官的衰竭。這些疾病的原因還不清楚，因?yàn)槠渌坪鮼碓从趥€(gè)體免疫系統(tǒng)的自身啟動(dòng)，故常將其稱為自身免疫病。病癥包括涉及多個(gè)器官的那些病癥，比如系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)和硬皮病。其它類型的自身免疫疾病可涉及特定組織或器官比如肌肉骨骼組織(類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、強(qiáng)直性脊推炎)、胃腸道(克羅恩病和潰瘍性結(jié)腸炎)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)(阿爾茨海默病、多發(fā)性硬化、運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元病、帕金森病和慢性疲勞綜合征)、胰腺P-細(xì)胞(胰島素依賴型糖尿病)、腎上腺(艾迪生病)、腎臟(古德帕斯丘綜合征、IgA腎病、間質(zhì)性腎炎)、外分泌腺(干燥綜合征(Sjogren'ssyndrome)和自身免疫性胰腺炎)以及皮膚(銀屑病和特應(yīng)性皮炎)。此外，有些慢性炎性疾病其病因或多或少是已知的，但其炎癥仍是慢性且持續(xù)的。這些疾病也表現(xiàn)出大塊組織/器官的破壞，包括以下病癥如骨關(guān)節(jié)炎、牙周病、糖尿病腎病、慢性阻塞性肺疾病、動(dòng)脈粥樣硬化(artherosclerosis)、移植物抗宿主病、慢性盆腔炎、子宮內(nèi)膜異位癥、慢性肝炎和結(jié)核病。在這些疾病中，組織破壞常損傷器官功能，導(dǎo)致生命質(zhì)量的進(jìn)行性降低和器官衰竭。這些病癥是發(fā)展中世界的主要發(fā)病原因，并且當(dāng)前的治療對其療效很差。皮膚結(jié)構(gòu)的炎癥(皮炎)是一組常見的病癥，其包括光化性角化病、酒渣鼻、尋常痤瘡、變應(yīng)性接觸性皮炎、血管性水腫、特應(yīng)性皮炎、大皰性類天皰疾(bullouspemiphigoid)、皮膚藥物反應(yīng)、多形紅斑、紅斑狼瘡(lupuserythrametosus)、日光性皮炎、《艮屑病、4艮屑病關(guān)節(jié)炎、硬皮病和蕁麻滲。這些疾病通過各種療法來治療，其中許多療法具有非常嚴(yán)重的副作用。4當(dāng)前免疫驅(qū)動(dòng)病癥的疾病緩解性治療(如果有的話)包括中和抗體、細(xì)胞毒素、皮質(zhì)類固醇、免疫抑制劑、抗組胺劑和抗毒萆堿劑。這些治療常與不方便的施用途徑和嚴(yán)重的副作用相關(guān)，導(dǎo)致順應(yīng)性問題。此夕卜，某些藥物種類僅對某些類型的炎性疾病有效，例如抗組胺劑僅對鼻炎有效。已知的j3-氨基醇是利米特羅。已知(3-氨基醇通過在a和p腎上腺素受體上的激動(dòng)作用和拮抗作用而具有抗高血壓活性、血管舒張活性、擬交感神經(jīng)活性、支氣管擴(kuò)張活性或心臟興奮活性。
發(fā)明內(nèi)容出乎意料地，發(fā)現(xiàn)某些P-氨基醇是細(xì)胞因子的抑制劑并且具有抗炎性質(zhì)。根據(jù)本發(fā)明，利用通式(I)化合物或其鹽治療例如上述的疼痛或炎性其中Rl、R2和R3獨(dú)立地是H、烷基、CF3、CONH2、CN、卣素、NH2、N02、NHCHO、NHCONH2、NHS02烷基、SOMe、S02NH2、S烷基或CH2S02烷基，但不都是H;和Rt是H或烷基。具體實(shí)施例方式可用于本發(fā)明的式(I)化合物包括(但不限于)(3，5-二氯-4-氨基-苯基)-哌啶-2-基甲醇(3-氯-苯基)-哌啶-2-基曱醇(3,5-二羥基-苯基)-哌啶-2-基曱醇(3，4-二羥基-苯基)-哌啶-2-基甲醇(2,3-二羥基-苯基)-哌啶-2-基甲醇(2，3，4-三羥基-苯基)-哌啶-2-基甲醇(4-氨基-苯基)-哌啶-2-基甲醇(3,5-二甲基氨基甲酰基氧基-苯基)-哌啶-2-基甲醇(5,6，7，8-四氫-2-萘基)-哌啶-2-基甲醇(2，5-二甲氧基-苯基)-哌啶-2-基甲醇(4-氨基-3-氰基-苯基)-哌啶-2-基曱醇(2-氯-苯基)-哌啶-2-基曱醇(4-羥基-苯基)-哌啶-2-基甲醇(3，4-二乙?；?苯基)-哌啶-2-基甲醇(3,4-二氯-苯基)-哌啶-2-基甲醇(2，5-二甲氧基-苯基)-哌啶-2-基甲醇(4-羥基-3-甲氧基-苯基)-哌啶-2-基甲醇(3-羥基-苯基)-哌啶-2-基曱醇(4-硝基-苯基)-哌啶-2-基甲醇(2-羥基喹啉-5-基)-哌啶-2-基甲醇(4-羥基-3-甲磺酰胺-苯基)-哌啶-2-基甲醇(4-苯基甲氧基-3-甲磺酰胺-苯基)-哌啶-2-基甲醇(3，4-二苯基甲氧基-苯基)-哌啶-2-基甲醇(4-曱磺酰胺-苯基)-哌啶-2-基曱醇(4-羥基-磺酰胺-苯基)-哌啶-2-基甲醇(2-氯-4-羥基-苯基)-哌啶-2-基曱醇(2-氟-苯基)-哌啶-2-基甲醇(4-氟-苯基)-哌啶-2-基曱醇(4-溴-苯基)-哌啶-2-基甲醇(4-羥基-3-甲磺酰基-苯基)-哌啶-2-基甲醇(3,5-二叔丁基羰基氧基-苯基)-哌啶-2-基甲醇(3,5-二異丙基羰基氧基-苯基)-哌啶-2-基甲醇苯基-哌啶-2-基甲醇(3-氯-4-氨基-5-三氟甲基-苯基)-哌啶-2-基曱醇(萘-2-基)-哌啶-2-基曱醇(3,4,5-三羥基-苯基)-哌啶-2-基甲醇(4-羥基-3-羥基甲基-苯基)-哌咬-2-基甲醇(4-鞋基-3-甲氧基-苯基)-哌啶-2-基甲醇(2，5-二曱氧基-苯基)-哌啶-2-基曱醇(4-千氧基-苯基)-哌啶-2-基甲醇(3,4-二節(jié)氧基-苯基)-哌啶-2-基甲醇(4-甲氧基-苯基)-哌啶-2-基甲醇(3-甲氧基-苯基)-哌啶-2-基甲醇(3-甲基-苯基)-哌啶-2-基曱醇(4-甲基-苯基)-哌啶-2-基甲醇(4-乙酰胺-3-氯-苯基)-哌啶-2-基甲醇(4-乙氧基-苯基)-哌啶-2-基甲醇以及(4-硝基-苯基)-哌啶-2-基甲醇應(yīng)當(dāng)理解，用于本發(fā)明的化合物包括其鹽(例如鹽酸鹽)、代謝物和前藥。用于本發(fā)明的化合物是手性的，應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明包括(I)的任何非對映異構(gòu)體和對映異構(gòu)體。(I)的優(yōu)選的非對映異構(gòu)體或?qū)τ钞悩?gòu)體對a或p腎上腺素受體的活性很小或無活性?？衫煤线m的體外方法測定該活性。特別優(yōu)選的化合物包括赤式-(5>4-氨基-3，5-二氯苯基-(及)-哌啶-2-基-甲醇、蘇式-(5)-4-氨基-3,5-二氯苯基-(5)-哌啶-2-基-曱醇和赤式-(5>4-氨基-3,5-二氯苯基-(及)-哌啶-2-基甲醇。根據(jù)本發(fā)明的式(I)化合物用于治療炎性疾病，包括但不限于涉及多個(gè)器官的自身免疫疾病，比如系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)和硬皮病，涉及特定組織或器官比如肌肉骨骼組織(類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、強(qiáng)直性脊推炎)、胃腸道(克羅恩病和潰瘍性結(jié)腸炎)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)(阿爾茨海默病、多發(fā)性硬化、運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元病、帕金森病和慢性疲勞綜合征)、胰腺|(zhì)3-細(xì)胞(胰島素依賴型糖尿病)、腎上腺(艾迪生病)、腎臟(古德帕斯丘綜合征、IgA腎病、間質(zhì)性腎炎)、外分泌腺(干燥綜合征和自身免疫性胰腺炎)以及皮膚(銀屑病和特應(yīng)性皮炎)的自身免疫疾病，慢性炎性疾病比如骨關(guān)節(jié)炎、牙周病、糖尿病腎病、慢性阻塞性肺病、動(dòng)脈粥樣硬化、移植物抗宿主病、慢性盆腔炎、子宮內(nèi)膜異位癥、慢性肝炎和結(jié)核病，IgE介導(dǎo)的(I型)超敏性比如鼻炎、哮喘、過敏性反應(yīng)和皮炎。皮炎病癥包括光化性角化病、酒渣鼻、尋常痤瘡、變應(yīng)性接觸性皮炎、血管性水腫、特應(yīng)性皮炎、大皰性類天皰瘡、皮膚藥物反應(yīng)、多形紅斑、紅斑狼瘡、日光性皮炎、銀屑病、銀屑病關(guān)節(jié)炎、硬皮病和蕁麻滲。還可治療眼睛的病癥，比如糖尿病視網(wǎng)膜病變、黃斑變性、脈絡(luò)膜新生血管膜、黃斑嚢樣水肺、視網(wǎng)膜前膜(epi-tetinalmembrane)、黃斑裂孔(macularhole)、干眼、葡萄膜炎和結(jié)膜炎。根據(jù)本發(fā)明，這些化合物可在患者還施用或聯(lián)合施用選自以下的另一種治療劑時(shí)使用，所述治療劑為皮質(zhì)類固醇(實(shí)例包括皮質(zhì)醇、可的松、氫化可的松、雙氫可的松、氟氫可的松、強(qiáng)的松、強(qiáng)的松龍、去氟可特、氟尼縮松、氯地米松、甲基強(qiáng)的松龍、去炎松、倍他米松和地塞米松)、緩解病情的抗風(fēng)濕藥(DMARD)(實(shí)例包括柳氮磺胺吡啶、金硫蘋果酸鹽(aurothiomalate)、布西拉明、苯丁酸氮芥、環(huán)磷酰胺、來氟米特、甲氨喋呤、咪唑立賓、青霉胺和水楊酸偶氮磺胺吡啶)、免疫抑制劑(實(shí)例包括硫唑嘌呤、環(huán)孢菌素、霉酚酸酯(mycophenolate))、COX抑制劑(實(shí)例包括醋氯芬酸、阿西美辛、阿氯酚酸(alcofenac)、阿明洛芬、阿洛普令(aloxipirin)、氨芬酸、氨基比林、安特非寧(antraphenine)、阿司匹林、阿扎丙宗、貝諾酯、苯嚅洛芬、千達(dá)明、布替布芬、塞來昔布、氯乙漆(chlorthenoxacine)、水楊酸膽堿、氯美辛(chlometacin)、右旋酮洛芬、雙氯芬酸、二氟尼柳、依莫法宗、依匹唑、依托度酸、氯苯泰松、聯(lián)苯乙酸、芬布芬、芬氯酸、氟比洛芬、格拉非寧、水楊酸羥乙酯、布洛芬、吲咮美辛、吲哚洛芬、酮基布洛芬、酮咯酸、乳?；被揭裔h(lactylphenetidin)、氯索洛芬、甲滅酸、安乃近、莫非保松、莫非唑酸、萘丁美酮、萘普生、尼芬那宗、奧沙美辛、非那西丁、派布宗(pipebuzone)、普拉洛芬、異丙安替比林、丙喹酮、洛芬昔布、水楊酰胺、雙水楊酯、舒林酸、舒洛芬、噢拉米特、替諾立定、托芬那酸、佐美酸)、中和抗體(實(shí)例包括依那西普(etanercept)和英夫單抗)、抗生素(實(shí)例包括多西環(huán)素和米諾環(huán)素)。式(I)化合物在動(dòng)物模型中表現(xiàn)出止痛活性?？衫煤线m的體內(nèi)方法測定這些化合物的活性。本發(fā)明還涉及治療患有慢性、急性或神經(jīng)病理性疼痛的患者(包括人和/或乳業(yè)、肉業(yè)或毛皮業(yè)中飼養(yǎng)的或作為寵物的哺乳動(dòng)物)的方法，更具體而言，涉及包括將式(I)止痛劑作為活性成分進(jìn)行施用的治療方法。因此，式(I)化合物可尤其用于治療疼痛病癥，比如急性和慢性疼痛(以及但不限于與癌癥、手術(shù)、關(guān)節(jié)炎、牙科手術(shù)、創(chuàng)傷、肌肉骨骼損傷或疾病、內(nèi)臟疾病相關(guān)的疼痛)以及偏頭痛。另外，疼痛病癥可以是神經(jīng)病理性的，這些病癥的實(shí)例是皰滲后神經(jīng)痛、糖尿病神經(jīng)病變、藥物引起的神經(jīng)病、HIV介導(dǎo)的神經(jīng)病、反射性交感神經(jīng)營養(yǎng)不良或灼痛、纖維肌痛、肌筋膜痛、嵌壓性神經(jīng)病、幻肢痛和三叉神經(jīng)痛。神經(jīng)病理性病癥包括與中風(fēng)、多發(fā)性硬化、脊髓損傷、蛛網(wǎng)膜炎、腫瘤、脊髓空洞癥、帕金森病和癲癇相關(guān)的中樞性疼痛。聯(lián)合使用式(I)化合物與用于疼痛治療的其它藥物常常是有利的。這樣的其它藥物可以是阿片類或非阿片類比如巴氯芬。尤其是對于治療神經(jīng)性疼痛而言，與加巴噴丁共施用是優(yōu)選的?？墒褂玫钠渌衔锇▽σ阴０被?、非甾體抗炎藥、麻醉性止痛藥、局部麻醉劑、NMDA拮抗劑、神經(jīng)抑制劑、抗驚厥劑、止痙劑、抗抑郁劑或肌肉松弛劑?？刹捎萌魏魏线m的施用途徑。例如，口服、局部、胃腸外、眼睛、直腸、陰道、吸入、口腔、舌下和鼻內(nèi)遞送途徑中任何途徑都可以是合適的。活性劑的劑量將取決于所述病癥的性質(zhì)和程度、患者的年齡和狀況、以及本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的其它因素。典型的劑量是0.1mg(例如10mg)至100mg，每日l至3次給予?？赏ㄟ^下述方案中所示的多步合成方法制備用于本發(fā)明的化合物。<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>通過以下步驟進(jìn)行合成利用合適的試劑還原被取代芳環(huán)的羧酸基，之后將其氧化成相應(yīng)的醛，然后可使醛與卣代吡啶部分進(jìn)行反應(yīng)。利用合適的催化劑通過氳化方法促使該環(huán)飽和以得到作為外消旋混合物的靶分子。本領(lǐng)域一般技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可根據(jù)需要對存在于分子中的官能團(tuán)進(jìn)行保護(hù)和脫保護(hù)?？芍苯油ㄟ^純化技術(shù)(比如研磨)或間接地例如通過初始轉(zhuǎn)化成中間體酯(然后其可通過研磨/相似方法純化，然后被水解成母體化合物)而實(shí)現(xiàn)單個(gè)的非對映異構(gòu)體對的分離。然后可利用手性HPLC將每個(gè)非對映異構(gòu)體對進(jìn)一步分離成為其純的異構(gòu)體成分。下述合成舉例說明用于本發(fā)明化合物的制備。3，5-二氯-4-二芐基氨基苯甲酸(2)在氮?dú)鈿夥障?，?-氨基-3，5-二氯苯甲酸(1)(25.0g，0.121mol)溶解在THF(250mL)和DMF(50mL)的混合物中。0X:下加入溴千(62.3g，0.364mol)并攪拌，10分鐘內(nèi)分批加入氫化鈉(60%w/w在礦物油中，19.4g,0.485mol)。有氫氣快速放出并排放到大氣中。完成NaH添加后，將混懸液溫?zé)嶂潦覝夭⒗^續(xù)攪拌16小時(shí)。此后，將混懸液冷卻至0。C并加入H20(100mL)。然后進(jìn)一步用1MHC1水溶液(250mL)稀釋混合物。將水層萃取到乙酸乙酯中、干燥(MgS04)、過濾并在真空下部分地濃縮。加入甲苯(100mL)，將溶液共沸而得到淺黃色固體。用庚烷研磨，然后抽濾得到3，5-二氯-4-二爺基氨基苯甲酸(2X41.3g，88%)。5H(DMSO-d6;250MHz)4.31(4H,s，Ch^Ph),7.33-7.25(10H，m,Arhi)，7.81(2H,s，Arfcl)，失去COOJd.(3,5-二氯-4-二節(jié)基氨基苯基)曱醇(3)將3，5-二氯-4-二節(jié)基氨基苯甲酸(2)(40.57g,0.105mol)溶解在THF(3卯mL)中，然后先冷卻至0匸，再在20分鐘內(nèi)滴加硼烷四氫呋喃絡(luò)合物(1M在THF中，210mL，0.21mol)。完成添加后，將溶液溫?zé)嶂潦覝夭⒗^續(xù)攪拌5小時(shí)或直到通過TLC分析確定反應(yīng)完成。通過滴液漏斗緩慢加入MeOH(100mL),—旦氣體放出停止，即在真空下濃縮溶液而得到無色油。可在硅膠(洗脫液4:1庚烷:乙酸乙酯)上進(jìn)一步純化粗油或?qū)⒋钟陀米飨旅娣磻?yīng)中的原料(37.3g)。SH(CDCI3;250MHz)4.26(4H,s，CJjgPh)，4.59(2H,s,C]jgOH)，7.19-7.37(12H，m，Arji),失去Ohi.3,5-二氯-4-二節(jié)基氨基苯甲醛(4)將如上制備的粗的(3,5-二氯-4-二節(jié)基氨基苯基)甲醇(3)(37.3g，0.105mol)溶解在二氯甲烷(400mL)中并在氮?dú)庀录訜嶂粱亓?。以一份加入活化的二氧化錳(Mn02)(23.9g，0.275mol)并繼續(xù)加熱3小時(shí)。此后，加入另外的Mn02(23.9g，0.275mol)并加熱混合物過夜。TLC分析顯示反應(yīng)不完全，因此加入另外部分的Mn02(3x23.0g)直到認(rèn)為反應(yīng)完全。抽吸下通過硅藻土過濾混懸液，然后用THF(500mL)清洗濾餅直到無色。真空下濃縮橙色濾液溶液，然后在冷庚烷中研磨而得到兩批淺黃色固體形式的3，5-二氯-4-二千基氨基苯甲醛(4)(26.4g，78%)。8h(CDCI3;250MHz)4.32(4H,s,CfcUPh)，7.2小7.40(10H,m，ArH)，7.77(2H,s,ArH),9,84(1H，s,C跳3，5-二氯-4-二節(jié)基氨基苯基)哌啶-2-基甲醇(5)在氮?dú)庀潞?。C下將2-碘代吡咬(13.53g，0.066mol)溶解在無水THF(200mL)中。1小時(shí)內(nèi)通過滴液漏斗滴加乙基溴化鎂溶液(0.79M在THF中，100mL,0.079mol)，然后將混合物溫?zé)嶂潦覝?。?5分鐘內(nèi)滴加在THF(118mL)中的3，5-二氯-4-二節(jié)基氨基苯甲醛(4)(26.4g，0.071mol)，其中觀察到輕微的放熱。再過2小時(shí)后，通過TLC確定反應(yīng)完成。滴加2MHCl(100mL)猝滅反應(yīng)，萃取到乙酸乙酯中。分離有機(jī)層，用2MNaOH(水溶液)清洗，干燥(MgS04)并過濾。蒸發(fā)有機(jī)溶液而得到黃色油，通過在硅膠(4:1庚烷:EtOAc,然后1:1庚烷:EtOAc)上色鐠純化所述油而得到無色油，發(fā)現(xiàn)其為3，5-二氯-4-二千基氨基苯基)吡啶-2-基-甲醇(5)(19.56g,66%)。SH(CDCI3;250MHz)4.23(4H,s，CtbPh)，5.66(1H,s，CHOH)，7.13(1H，d，J7,7,Pyrhl)，7.15-7,34(13H，m,Arhl)'7.71(1H，dd，兒7,7.7,Pyrhl),8,59(1H，d，J4.8,Pyrhl)，失去^式-(3，5-二氯-4-氨基-苯基)哌啶-2-基-甲醇(6)向2L的Parr氫化器中加入溶解在EtOH(200mL)中的(3，5-二氯_4-二千基氨基-苯基)吡啶-2-基-甲醇(5)(19.37g,0.043mol)。加入HC1在MeOH中的溶液(1.25M,76mL,0.095mol)，最后加入Pt02(3.1g，0.013mol)。室溫下，用氫氣將混懸紗壓至50p.s丄。發(fā)現(xiàn)氳氣被快速吸收，再加入一次氫氣之后，通過iH-NMR表明反應(yīng)已完成。將系統(tǒng)減壓，在抽吸下通過硅藻土過濾乙醇混懸液。在真空下濃縮濾液，然后在^^(CH2Cl2,然后95:5:1CH2Cl2:MeOH:Et3N,然后95:7:1CH2Cl2:MeOH:Et3N)上純化，以得至i(3,5-二氯-4-氨基-苯基)哌啶-2-基-甲醇，為非對映異構(gòu)體的不可拆分的混合物(6)(10.6g，89%)。將混合物在冰冷的丙酮(25mL)中研磨，產(chǎn)生白色固體結(jié)晶。通過過濾分離該白色固體，通過111-~]\111證實(shí)為純的赤式-(3，5-二氯-4-氨基-苯基)哌啶-2-基-甲醇(1.65g，14%)。真空下濃縮濾液溶液，發(fā)現(xiàn)含有非對映異構(gòu)體的混合物(6)(6.73g)。赤式8h(CDCI3;250MHz)1.10-1.47(4H，m)，1.47，1.68(2H，m)，2.00-2.30(2H，m),2.55-2.78(2H，m)，3.10(1H，約d，J11.8)，4.42(2H，s)，4.49(1H，d,J4.9，CJdOH)，7.19(2H，s，ArM).利用制備型手性HPLC分離赤式非對映異構(gòu)體對，其中利用260x50mmCHIRALPAKAD20nm柱，流動(dòng)相80正庚烷/20乙醇/0.1二乙胺(v/v/v)，流速120ml/分許，UV檢測波長300nm，環(huán)境溫度。赤式-(3，5-二氯-4-氨基-苯基)哌啶-2-基-甲醇(7)該化合物以600mg的第一個(gè)洗脫異構(gòu)體形式得到，作為油而分離到。保留時(shí)間6.5分鐘HPLC分析(230nm下的面積。/。)>99.5對映體過量(％)>99.5(赤4)-(3，5-二氯-4-氨基-苯基)哌啶-2-基-甲醇(8)該化合物以600mg的第二個(gè)洗脫異構(gòu)體形式得到，作為油而分離到。保留時(shí)間9.2分鐘HPLC分析(230nm下的面積Y。)>99.0對映體過量(％)>99.0^t^t-2-(3，5-二氯-4-氨基苯基)羥基甲基)哌啶-l-羧酸叔丁酯將(3,5-二氯-4-氨基苯基)哌啶-2-基甲醇的非對映異構(gòu)體混合物(6.73g，0.024mol)溶解在二氯甲烷(44mL)中，然后加入三乙胺(6.8mL,0.049mol)。氮?dú)鈿夥障聦⑷芤豪鋮s至0。C,然后分批加入二碳酸二叔丁酯(5.81g,0.027mol)。攪拌所得混合物6小時(shí)，直到TLC顯示原料已耗盡。用1MNaOH水溶液猝滅反應(yīng)，萃取到二氯甲烷(2x50mL)中。將有機(jī)萃取物干燥(MgS04)、過濾、真空下濃縮而得到粘稠的無色油，發(fā)現(xiàn)其為2-[(3，5-二氯-4-氨基-苯基)-羥基-甲基)哌啶-l-羧酸叔丁酯的非對映異構(gòu)體混合物(9.24g，99%)。將混合物在冰冷的庚烷(25mL)中進(jìn)行研磨，結(jié)晶出白色固體。過濾分離形成的白色固體，通過^-NMR發(fā)現(xiàn)其為純的^"式-2-(3，5-二氯-4-氨基-苯基)-羥基-甲基)哌啶-l-羧酸叔丁酯(2.46g，27%)。蘇式8H(CDCI3;250MHz)1.30(9H，s，C(Chbi3)，1.35-1.80(6H，m)，2.03(1H，d,J11.5),2.74(1H,約t,J12.3),3.85-3.95(1H,m)，4.13-4.25(1H，m)，4.41(2H，S)'4.79(1H'd，J8.1,C]dOH)'7.20(2H,s，ArH).多4]-(3，5-二氯-4-氨基-苯基)哌啶-2-基-甲醇(9)在On和氮?dú)鈿夥障?，將^^-2-(3，5-二氯-4-氨基苯基)羥基甲基)哌啶-l-羧酸叔丁酯(1.50g,0.004mol)混懸在二氯甲烷(25mL)中，滴加三氟乙酸(0.68mL，0.009mol)使得混懸液溶解。3小時(shí)后，再加入三氟乙酸(0.25mL，0.0032mol)，在室溫下攪拌溶液過夜。用1MNaOH水溶液猝滅反應(yīng)，萃取到二氯甲烷(2x25mL)中。將有機(jī)萃取物干燥(MgSOj、過濾、真空下濃縮而得到近白色固體。用冰冷的庚烷(IOmL)進(jìn)行研磨得到白色固體，通過^-NMR發(fā)現(xiàn)其為純的^>￡-(3,5-14二氯-4-氨基-苯基)-哌啶-2-基-甲醇(0.893g，79%)。蘇式SH(CDCl3;250MHz)1.10-1.80(7H,m)，1.94(1H,約d，J8.3)，2.83(1H，約t，J11.6),3.29-3.47(1H，m)，3.91(1H，dd，J1.2，11.6)，4.30-4.70(2H，寬單峰，,，4.83(1H'd,線CHOH)，7.19(2H，s，Artl).利用制備型手性HPLC分離蘇式非對映異構(gòu)體對，其中利用250x20mmCHIRALPAKAS畫H5pm柱，流動(dòng)相80CO2/20甲醇+1%二乙胺(v/v),流速60ml/分鐘，UV檢測波長250nm，溫度30t:，出口壓力150巴。^^C-(3，5-二氯-4-氨基-苯基)哌啶-2-基-甲醇(10)該化合物以259mg的第一個(gè)洗脫異構(gòu)體形式得到，作為油而分離到。保留時(shí)間16.8分鐘HPLC分沖斤(250nm下的面積0/。)97.2對映體過量(％)99.9^"4'-(3,5-二氯-4-氨基-苯基)-哌啶-2-基-甲醇(11)該化合物以282mg的第二個(gè)洗脫異構(gòu)體形式得到，作為油而分離到。保留時(shí)間14.6分鐘HPLC分析(250nm下的面積％)94.7對映體過量(％)98.8下述試驗(yàn)舉例說明本發(fā)明。P2-激動(dòng)功能試驗(yàn)將豚鼠的氣管環(huán)制備物懸浮在含有吲咮美辛的克氏液(Kreb，ssolution)中。穩(wěn)定15分鐘后，利用卡巴膽堿反復(fù)收縮所述制備物，同時(shí)用累積劑量不斷增加的測試化合物(0.1nM至0.1jiM)處理。通過每種測試化合物對卡巴膽堿刺激的氣管肌顛搐的劑量依賴性抑制作用來測定其P2-激動(dòng)作用?；衔?7)、(8)、(10)和(11)是弱的|32-激動(dòng)劑。所有4種化合物的IC50值均WnM，其中所述4種化合物中有3種的值>20jaM。LPS小鼠試驗(yàn)通過腹膜內(nèi)(i.p.)(5ml/kg)或口月艮(10ml/kg)施用方式給7周齡的BalbCByJ小鼠(24-28g)施用載體或測試物。30分鐘后通過腹膜內(nèi)注射1mg/kgLPS而剌激這些動(dòng)物。LPS刺激2小時(shí)后，在異氟醚淺麻醉下通過眼眶后穿刺將血液樣品采集到普通管(normaltube)內(nèi)。使樣品在室溫下凝固，然后在6000g和4X:下旋轉(zhuǎn)3分鐘。血清儲(chǔ)存在-20\:直到使用。利用ELISA技術(shù)一式雙份地分析血清TNFa和IL-10水平?；衔?7)、(8)、(10)和(11)均對LPS誘導(dǎo)的小鼠中TNFa和ILip細(xì)胞因子的產(chǎn)生具有影響。兩種化合物在所有劑量下均有效地抑制所有的細(xì)胞因子。權(quán)利要求1.化合物用于治療或預(yù)防炎性病癥或疼痛的用途，其中所述化合物是式(I)化合物或其鹽其中，R1、R2和R3獨(dú)立地是H、烷基、CF3、CONH2、CN、鹵素、NH2、NO2、NHCHO、NHCONH2、NHSO2烷基、SOMe、SO2NH2、S烷基或CH2SO2烷基，但不都是H；和R4是H或烷基。2.權(quán)利要求l的用途，其中所述病癥是慢性退行性疾病，比如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎或骨質(zhì)疏松。3.權(quán)利要求l的用途，其中所述病癥是慢性脫髓鞘疾病，比如多發(fā)性硬化。4.權(quán)利要求l的用途，其中所述病癥是呼吸疾病，比如哮喘或慢性阻塞性肺病。5.權(quán)利要求l的用途，其中所述病癥是炎性腸病，比如潰瘍性結(jié)腸炎或克羅恩病。6.權(quán)利要求l的用途，其中所述病癥是皮膚病癥，比如銀屑病、硬皮病或特應(yīng)性皮炎。7.權(quán)利要求l的用途，其中所述病癥是牙科疾病，比如牙周病或齒齦炎。8.權(quán)利要求l的用途，其中所述病癥是糖尿病腎病、狼瘡腎炎、IgA腎病或腎小球腎炎。9.權(quán)利要求l的用途，其中所述病癥是系統(tǒng)性紅斑狼瘡。10.權(quán)利要求l的用途，其中所述病癥是移植物抗宿主病。11.權(quán)利要求l的用途，其中所述病癥是疼痛病癥。12.權(quán)利要求ll的用途，其中所述疼痛病癥是慢性疼痛，比如慢性背痛、惡性疼痛、包括偏頭痛和叢集性頭痛的慢性頭痛、或關(guān)節(jié)炎疼痛。13.權(quán)利要求ll的用途，其中所述疼痛病癥是急性疼痛，比如手術(shù)后疼痛、外傷后疼痛或急性疾病引起的疼痛。14.權(quán)利要求ll的用途，其中所述疼痛病癥是神經(jīng)病理性疼痛。15.權(quán)利要求l的用途，其中所述病癥是眼科病癥。16.權(quán)利要求15的用途，其中所述眼科病癥是與年齡相關(guān)的黃斑變性。17.權(quán)利要求15的用途，其中所述眼科病癥是糖尿病視網(wǎng)膜病變。18.權(quán)利要求15的用途，其中所述眼科病癥是脈絡(luò)膜新生血管膜、黃斑嚢樣水腫、視網(wǎng)膜前膜或黃斑裂孔。19.權(quán)利要求15的用途，其中所述眼科病癥是千眼。20.權(quán)利要求15的用途，其中所述眼科病癥是葡萄膜炎。21.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的用途，其中R1、R2和R3獨(dú)立地是CF3、CONH2、CN、卣素或NH2。22.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的用途，其中所述化合物是赤^-(5>4-氨基-3，5-二氯苯基-(及)-哌啶-2-基-甲醇、多式-(5>4-氨基-3，5-二氯苯基畫(5)國哌啶畫2畫基-甲醇或赤式畫(5)畫4國氨基-3,5-二氯苯基畫(及)-哌啶畫2-基國甲醇。23.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的用途，其中對治療患者還施用選自以下的另一種治療劑皮質(zhì)類固醇、細(xì)胞毒素、抗生素、免疫抑制劑、非甾體抗炎藥、麻醉性止痛藥、局部麻醉劑、NMDA拮抗劑、神經(jīng)抑制劑、抗驚厥劑、止痙劑、抗抑郁劑和肌肉木>弛劑。24.權(quán)利要求23的用途，其中以組合形式提供所述化合物(I)和所述的另一種藥劑。全文摘要式(I)化合物或其鹽是可用于治療或預(yù)防與T-細(xì)胞增殖相關(guān)的病癥或由促炎細(xì)胞因子調(diào)節(jié)的病癥的化合物其中R1、R2或R3中至少一個(gè)不是H，并且各自獨(dú)立地是H、烷基、CF₃、CONH₂、CN、鹵素、NH₂、NO₂、NHCHO、NHCONH₂、NHSO₂烷基、SOMe、SO₂NH₂、S烷基或CH₂SO₂烷基；R₄是H或烷基。文檔編號(hào)A61P11/00GK101426501SQ200780008386公開日2009年5月6日申請日期2007年3月9日優(yōu)先權(quán)日2006年3月9日發(fā)明者安德魯·道格拉斯·巴克斯特申請人:索塞R&D有限公司