含有一種副干酪乳桿菌的用于治療脂肪肝的保健食品的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及含有一種副干酪乳桿菌的用于治療脂肪肝的保健食品，其特征在于，采用保藏編號為CGMCC No.10059的副干酪乳桿菌ZPY01與中藥材提取物組成的復合配方，該配方中含副干酪乳桿菌ZPY01的重量百分比為20％～50％，其余為中藥提取物；所述中藥材提取物為下列重量配比的中藥材：蒲公英15份、馬齒筧25份、白術6份、白芍8份、茉莉花6份、桃仁8份、藏紅花1份，加水煎煮所得的提取物。可應用于預防和治療非酒精性脂肪肝。
10059
20141126
【專利說明】含有一種副干酪乳桿菌的用于治療脂肪肝的保健食品

【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及含有一種副干酪乳桿菌的用于治療脂肪肝的保健食品。

【背景技術】
[0002] 脂肪肝，是指由于各種原因引起的肝細胞內(nèi)脂肪堆積過多的病變。脂肪性肝病正 嚴重威脅國人的健康，成為僅次于病毒性肝炎的第二大肝病，已被公認為隱蔽性肝硬化的 常見原因。脂肪肝是一種常見的臨床現(xiàn)象，而非一種獨立的疾病。其臨床表現(xiàn)輕者無癥狀， 重者病情兇猛。一般而言，脂肪肝屬可逆性疾病，早期診斷并及時治療?？苫謴驼！?br> [0003] 脂肪肝包括酒精性脂肪肝和非酒精性脂肪肝兩大類。酒精性脂肪肝一般不需特殊 治療，大多在戒酒和治療1個月左右，肝內(nèi)脂肪減少，輕者數(shù)月后消失，重者一到兩年消失。 非酒精性脂肪肝的診斷需符合以下3項條件：①無飲酒史或飲酒折合乙醇量小于140g / 周（女性<70g /周）；②除外病毒性肝炎、藥物性肝病、全胃腸外營養(yǎng)、肝豆狀核變性、自 身免疫性肝病等可導致脂肪肝的特定疾??；③肝活檢組織學改變符合脂肪性肝病的病理學 診斷標準。在中醫(yī)學中并無此病名，但根據(jù)其臨床表現(xiàn)，眾多學者認為其當歸屬于中醫(yī)學的 "脅痛"、"肥氣"、"肝著"、"痰濁"、"積聚"等范疇。
[0004] 目前本病治療的目標是延緩疾病進展及并發(fā)癥的發(fā)生。主要方法包括基礎治療和 藥物治療，極少數(shù)患者需肝移植。基礎治療方法如控制飲食、增加有氧運動、減肥等。西藥 尚無防治脂肪肝的有效藥物，如維生素 B、C、E，卵磷脂、熊去氧膽酸、水飛薊素、肌苷、輔酶 A、還原型谷胱甘肽、牛磺酸、肉毒堿乳清酸鹽、肝泰樂，以及某些降脂藥物等。中醫(yī)藥治療本 病多是針對濕痰瘀阻互結(jié)，痹阻肝絡的基本病機，采用疏肝理氣、活血化瘀、健脾祛痰、清熱 利濕和補益肝腎等治法，臨床上確有療效。
[0005] 由于任何藥物進入體內(nèi)都要經(jīng)過肝臟解毒，在選用藥物時更要慎重，謹防藥物的 毒副作用，特別對肝臟有損害的藥物絕對不能用，避免進一步加重肝臟的損害。
[0006] 本發(fā)明所涉及的中藥材均可見記載于《中華本草》。
[0007] 現(xiàn)代的人體及動物實驗證明活的乳酸菌具有確切的降膽固醇作用。但是由于人體 腸道內(nèi)是含有膽鹽的酸性環(huán)境，所以常見的乳酸菌在人體消化道內(nèi)難以存活，以至于應用 乳酸菌實現(xiàn)降低膽固醇的發(fā)現(xiàn)難以在臨床有效實施。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明的目的在于提供一種含有一種副干酪乳桿菌與中藥材提取物復合配方的 保健食品。
[0009] 本發(fā)明是通過如下技術方案實現(xiàn)的： 含有一種副干酪乳桿菌的用于治療脂肪肝的保健食品，其特征在于，采用保藏編號為 CGMCC No. 10059的副干酪乳桿菌ZPYOl與中藥材提取物組成的復合配方，該配方中含副干 酪乳桿菌ZPYOl凍干粉的重量百分比為20%?50%，其余為中藥提取物； 所述中藥材提取物為下列重量配比的中藥材：蒲公英15份、馬齒筧25份、白術6份、白 芍8份、茉莉花6份、桃仁8份、藏紅花1份，加水煎煮所得的提取物。
[0010] 所述的副干酪乳桿菌ZPYOl按照以下步驟進行發(fā)酵培養(yǎng)：（1)制備脫脂乳培養(yǎng)基： IOOOml蒸餾水中加入IOOg脫脂奶粉，溶解后分裝到試管中，121°C條件下滅菌15min，備用； (2)菌種的活化：將菌種接種至脫脂乳培養(yǎng)基中，37°C恒溫培養(yǎng)；反復接種培養(yǎng)，直至活化 到凝乳時間為4~5h，得發(fā)酵液； 所述副干酪乳桿菌ZPYOl凍干粉的制備方法：將上述發(fā)酵液離心分離菌體得到菌泥， 向菌泥中加入1倍重量的海藻糖，乳化凍干，即得到所述的副干酪乳桿菌ZPYOl凍干粉。
[0011] 所述中藥材提取物的提取方法為：稱取所述重量配比的藥材，加8倍量水，煎煮 1. 5小時，過濾；濾渣加6倍量水，煎煮1小時，過濾；合并濾液，濃縮，干燥。
[0012] 所述的含有一種副干酪乳桿菌的用于治療脂肪肝的保健食品，應用于預防和治療 非酒精性脂肪肝。
[0013] 發(fā)明人認為，肝臟是脂質(zhì)代謝的中心，參與脂蛋白的合成和分解。非酒精性脂肪肝 以彌漫性肝細胞大泡性脂肪變?yōu)橹饕卣鳎愿渭毎咀冃院椭举A積為病理特征。因 此，降血脂和護肝是治療本病的根本。
[0014] 本發(fā)明所采用的保藏編號為CGMCC No. 10059的副干酪乳桿菌ZPYOl為發(fā)明人新 近提純的新菌種，該菌種具有較強的耐酸性，在PH2. 5的酸性條件下可以保持4h活性；對膽 鹽的抗性也比較明顯，能耐受0. 40%牛膽酸鈉。能夠?qū)崿F(xiàn)在人體消化道長時間存活并發(fā)揮 降低膽固醇的功效。
[0015] 非酒精性脂肪肝的病機主要為肝失疏泄，脾失健運，濕熱內(nèi)蘊、痰濕內(nèi)生、瘀血阻 滯，而最終形成痰瘀互結(jié)。本發(fā)明方中重用馬齒筧、蒲公英入肝經(jīng)，清熱解毒，利濕化濁；茉 莉花行氣化痰；白術健脾益氣；白芍養(yǎng)血柔肝；桃仁以及少量藏紅花活血化淤；諸藥合用， 共奏清熱解毒、利濕化濁、健脾柔肝、活血化瘀之功效。
[0016] 本發(fā)明采用副干酪乳桿菌ZPYOl與傳統(tǒng)中藥結(jié)合，從而實現(xiàn)從根本調(diào)理病根的同 時迅速降低膽固醇的功效，標本兼治。
[0017] 本發(fā)明所選用的原料藥食兩用，安全性高，適于長期服用。
[0018] 下面結(jié)合實驗數(shù)據(jù)說明副干酪乳桿菌ZPYOl的特性： 一、實驗材料與方法 (一)、材料 1、菌種 實驗菌種來自臧牧民自制牦牛酸奶中，對其進行篩選分離后，參照伯杰氏細菌鑒定手 冊(第八版）和《乳酸菌一生物學基礎及應用》，對其進行生理生化鑒定。形態(tài)觀察和生 理生化鑒定結(jié)果表明：分離菌為副干酪乳桿菌，命名為副干酪乳桿菌ZPY01，實驗編號為： Lp一ZPYOl ;對照菌株Lactobacillus paracasei為公知常見菌株，來自魯東大學生命科學 學院發(fā)酵室，實驗編號為：Lp - CK。
[0019] 2、培養(yǎng)基 MRS培養(yǎng)基；膽固醇培養(yǎng)基：在MRS培養(yǎng)基中添加0. 3mg/ml的膽固醇；脫脂乳培養(yǎng)基： 新西蘭恒天然脫脂奶粉，121°C滅菌lOmin。
[0020] 3、試劑 牛膽酸鈉；膽固醇。
[0021] 4、儀器與設備 722光柵分光光度計，恒溫水浴鍋、電熱蒸汽滅菌鍋、生化培養(yǎng)箱、pH計、超凈工作臺 等。
[0022] (二)、方法 1、脫脂乳培養(yǎng)基 10%脫脂乳培養(yǎng)基：IOOOml蒸餾水中加入IOOg脫脂奶粉，溶解后分裝到試管中，每支分 裝10ml，121°C、15min滅菌后備用。
[0023] 2、菌種的活化 將菌種接種至IOml已滅菌的脫脂牛奶中，37°C恒溫培養(yǎng)。反復接種培養(yǎng)，直至活化到 凝乳時間為4~5h。
[0024] 3、菌株抗酸性測定 用I. Omol/L的HCl將MRS培養(yǎng)基調(diào)至ρΗ3· 5、ρΗ2· 5。將活化好的菌液以L 0%的接種 量分別接種于MRS液體培養(yǎng)基中，37°C恒溫培養(yǎng)4. Oh后，重新接入新鮮培養(yǎng)基中（接種量 1. 〇%)，每隔7h取樣測定在波長600nm處的吸光度。繪制菌株的生長曲線，檢測菌株對酸的 耐受性，實驗重復3次，取其平均值。
[0025] 4、菌株抗膽鹽測定 在MRS培養(yǎng)基中分別加入牛膽酸鈉，使膽鹽濃度分別為0. 3%和0. 4%。將活化好的菌以 1. 〇%的接種量分別接種于MRS液體培養(yǎng)基中，每隔7h取樣測定在波長600nm處的吸光度。 繪制菌株的生長曲線，比較菌株生長與膽鹽含量的關系，實驗重復3次，取其平均值。
[0026] 5、膽固醇測定方法的建立 將活化好的菌液以1. 〇%的接種量分別接種于膽固醇培養(yǎng)基中，37°c恒溫培養(yǎng)72h，以 未接菌的培養(yǎng)基為空白對照。膽固醇含量的測定參照GB/T15206-1994食品中膽固醇的測 定方法：直接離心鐵礬比色法。用可見分光光度計在波長560nm處測定其光密度。膽固醇 清除率按下式計算：

【權(quán)利要求】
1. 含有一種副干酪乳桿菌的用于治療脂肪肝的保健食品，其特征在于，采用保藏編號 為CGMCC No. 10059的副干酪乳桿菌ZPY01與中藥材提取物組成的復合配方，該配方中含副 干酪乳桿菌ZPY01凍干粉的重量百分比為20%?50%，其余為中藥提取物； 所述中藥材提取物為下列重量配比的中藥材：蒲公英15份、馬齒筧25份、白術6份、白 芍8份、茉莉花6份、桃仁8份、藏紅花1份，加水煎煮所得的提取物。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的含有一種副干酪乳桿菌的用于治療脂肪肝的保健食品，其 特征在于，所述的副干酪乳桿菌ZPY01按照以下步驟進行發(fā)酵培養(yǎng)：（1)制備脫脂乳培養(yǎng) 基：1000ml蒸餾水中加入100g脫脂奶粉，溶解后分裝到試管中，121°C條件下滅菌15min，備 用；（2)菌種的活化：將菌種接種至脫脂乳培養(yǎng)基中，37°C恒溫培養(yǎng)；反復接種培養(yǎng)，直至活 化到凝乳時間為4~5h，得發(fā)酵液； 所述副干酪乳桿菌ZPY01凍干粉的制備方法：將上述發(fā)酵液離心分離菌體得到菌泥， 向菌泥中加入1倍重量的海藻糖，乳化凍干，即得到所述的副干酪乳桿菌ZPY01凍干粉。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的含有一種副干酪乳桿菌的用于治療脂肪肝的保健食品，其 特征在于，所述中藥材提取物的提取方法為：稱取所述重量配比的藥材，加8倍量水，煎煮 1. 5小時，過濾；濾渣加6倍量水，煎煮1小時，過濾；合并濾液，濃縮，干燥。
4. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的含有一種副干酪乳桿菌的用于治療脂肪肝的保健食品，其特 征在于，應用于預防和治療非酒精性脂肪肝。
【文檔編號】A61K36/88GK104489687SQ201510008565
【公開日】2015年4月8日 申請日期:2015年1月8日 優(yōu)先權(quán)日:2015年1月8日
【發(fā)明者】張鵬宴, 衣華鵬 申請人:張鵬宴