專利名稱：S－烷基－dl－高半胱氨酸－s,r－亞磺酰亞胺藥物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及腫瘤增敏藥物S-烷基-DL-高半胱氨酸-S，R-亞磺酰亞胺藥物組合物。
鑒于惡性腫瘤的發(fā)病率與死亡率逐年上升，作為臨床上常用的放射治療和化學(xué)藥物治療均存在著某些不足，例如某些類型的腫瘤對于放療或化療療效極差；放療與化療引起對正常組織的損傷和毒副反應(yīng)等等，都嚴(yán)重影響著治愈率，而腫瘤組織中的乏氧細(xì)胞，由于其抗射線的作用，更成為復(fù)發(fā)率增加的主要原因之一。
本發(fā)明提供的S-烷基-DL-高半胱氨酸-S，R-亞磺酰亞胺藥物組合物以S-烷基-DL-高半胱氨酸-S，R-亞磺酰亞胺為活性組份，其具有下列通式
其中R1代表具有不同碳原子的烷基、脂肪族、芳香族或雜環(huán)芳基；R2代表氮原子、氨基、酰氨基及其任意取代的烷基；R3代表氫原子或其任意取代的烷基；n代表不同的-CH2-數(shù)目在以上述通式為活性組份的藥物組合物中以R1為烷基，R2為氨基，R3為氫原子，n數(shù)為2的藥物組合物為首選，尤以其中R1為丁基為最優(yōu)藥物選作腫瘤放射和(或)化學(xué)增敏藥物。
本發(fā)明的活性組份通式可以通過中國專利CN1151397A中描述的方法制備。
腫瘤增敏藥可通過對于內(nèi)源性物質(zhì)的化學(xué)修飾，抑制其對射線具有抗拒性的物質(zhì)或引起耐藥性的物質(zhì)。本發(fā)明S-烷基-DL-高半胱氨酸-S，R-亞磺酰亞胺藥物是通過抑制腫瘤細(xì)胞中內(nèi)源性谷胱甘肽的生成合成，以降低其對射線具有的保護(hù)作用、同時能引起某些化療藥物(特別是烷化劑類化療藥物)耐藥性的谷胱甘肽含量，促使敏感性增加。
本發(fā)明中所采用的細(xì)胞和組織中谷胱甘肽含量的測定為改進(jìn)的Tietze酶學(xué)方法，所測定的腫瘤細(xì)胞可以是原代培養(yǎng)的細(xì)胞和已培養(yǎng)的細(xì)胞株，腫瘤組織可以是動物模型的腫瘤組織和人體腫瘤組織，組織可以是新鮮的標(biāo)本或經(jīng)過液氮保存的樣品。
本發(fā)明提供的藥物組合物具有放射和化學(xué)增敏作用，能有效地提高腫瘤細(xì)胞或組織對射線和化療藥物的敏感性，特別是那些對射線敏感性差或?qū)熕幬锞哂心退幮缘哪[瘤細(xì)胞或組織，使其臨床療效增加，同時，其毒性很小，可用于臨床腫瘤病人的治療。
本發(fā)明用急性毒性實驗(小鼠)和慢性毒性實驗(犬、大鼠)表示該藥無論是口服或靜脈注射其毒性很低。
用Ames試驗方法對TA79、TA78、TA100、TA102菌株經(jīng)S9代謝系統(tǒng)作用后的誘變試驗和不經(jīng)代謝活化的直接作用，均顯示該藥無致突變作用。
用微核試驗和染色體畸變試驗結(jié)果也同樣表明該藥無致畸變作用。
本發(fā)明所提供的藥物組合物可用作多種惡性腫瘤的治療，包括各種實體腫瘤、肉瘤、淋巴瘤、白血病等，特別優(yōu)選為惡性人腦膠質(zhì)瘤、非小細(xì)胞肺癌、卵巢癌、肝癌等。
用藥劑量最終由醫(yī)師自行掌握，但應(yīng)考慮各種因素包括腫瘤的類型、種類、患者狀況(年齡、體重、性別、體質(zhì))、給藥方式等因素而定，適宜的有效劑量為大約0.01～1700mg/m2，例如0.1～1600mg/m2，最好為大約0.1～1000mg/m2，可以單次或多次給予(如每日2～6次)，或以靜脈注入方式給予。
本發(fā)明提供的藥物組合物可以單獨給予，但最好是與放射治療或與其他抗癌藥物合并給予為佳?？稍诜派浠蚩拱┧幬锸褂们啊⑼瑫r或使用后給予，但最好在前0.5～48小時為優(yōu)。給藥途徑可以口服、注射、局部、吸入等，優(yōu)選口服和注射。
本發(fā)明中，適用口服的劑型，例如膠囊、扁膠囊、片或錠，其均含有預(yù)先規(guī)定量的上述藥物。配制的形式還可是粉裝或粒裝，或水及非水溶液，如糖漿、乳劑、口服液等。
除上述主藥外，本發(fā)明的配制藥可包括一種或多種由下列物質(zhì)中選取的輔助成分稀釋劑、緩沖劑、食用香料、粘結(jié)劑、表面活性劑、增稠劑、防腐劑(包括抗氧化劑)及其類似物。
本發(fā)明中提供的藥物或其藥學(xué)上可接受的鹽及其具有活性的其它衍生物可用作惡性腫瘤的治療。
本發(fā)明提供的藥物組合物不論在口服或腹腔及靜脈給藥時，均可提高人惡性腦膠質(zhì)瘤、肺癌、肝癌、子宮癌、卵巢癌、乳腺癌等常見惡性腫瘤對多種化療藥物例如PAM(苯丙氨酸氮芥)、CTX(環(huán)磷酰胺)、DDP(順鉑)、ADR(阿霉素)、5-Fu(5-氟尿嘧啶)、VP16(鬼臼)等的敏感性或克服耐藥性。
本發(fā)明經(jīng)試驗證明，可明顯提高人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤、人腺樣囊性癌細(xì)胞，以及U14宮頸癌、S37肉瘤、Lewis肺癌、S180肉瘤等惡性腫瘤的放射增敏作用；可明顯提高化療藥物尤其是烷化劑類抗癌藥物的作用，如增加5-Fu、DDP、CTX、PAM等對離體人紅白血病、K562細(xì)胞、SGC-7901人胃癌細(xì)胞、3-A0人卵巢癌細(xì)胞、SGH-44人惡性腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞等的作用。
實施例1取對數(shù)生長期的細(xì)胞，胰酶消化后計數(shù)并離心收集，加蒸餾水及12％硫代水楊酸后再離心，收集上清液定量，加測定體系液后于波長412nm處的分光光度測定，通過計算，得出每一細(xì)胞內(nèi)谷胱甘肽的含量。
取新鮮或液氮保存的組織，稱重后制成勻漿，加適當(dāng)EDTA-Na2后于冰浴中制成組織勻漿，加蒸餾水及三氯乙胺后震蕩，離心取上清液定量，加測定體系液后于波長412nm處的分光光度測定，計算得出每毫克組織(或毫克蛋白)內(nèi)谷胱甘肽的含量。
用上述方法測定人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞及組織、人惡性腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞及組織的內(nèi)源性谷胱甘肽分別為2.7126±1.3272×10-12mmol/細(xì)胞，1.2991±0.3328μmol/g15.5400±0.1700×10-12mmol/細(xì)胞，0.3860±0.1940μmol/g實施例2本發(fā)明所提供的藥物能有效地降低上述兩種人體惡性腫瘤細(xì)胞和組織中內(nèi)源性谷胱甘肽的含量。
人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞在用本發(fā)明的藥物后，細(xì)胞內(nèi)的內(nèi)源性谷胱甘肽含量立即下降，2小時時降低了44.96％，24小時時降低了83.65％。瘤組織在用藥后內(nèi)源性谷胱甘肽含量也立即下降，6小時時降低了55.82％，24小時時降低了70.35％。
人惡性腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞在用本發(fā)明的藥物后，細(xì)胞內(nèi)的內(nèi)源性谷胱甘肽含量立即下降，2小時時降低了36.89％，24小時時降低了88.48％。瘤組織在用藥后內(nèi)源性谷胱甘肽含量也立即下降，6小時時降低了64.25％，24小時時降低了93.26％。
實施例3對中國倉鼠V79-379A細(xì)胞的放射增敏活性用離體單細(xì)胞集落形成法研究在有氧與乏氧條件下，V79-379A細(xì)胞在不同濃度的藥物作用下，經(jīng)60Coγ-射線照射后的放射增敏活性。試驗用藥溶解于三重蒸餾水中，過濾滅菌，細(xì)胞用Eargle培養(yǎng)液加小牛血清，于5％二氧化碳恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，一周后觀察細(xì)胞集落形成數(shù)，從細(xì)胞存活率中計算出基本參數(shù)(Do，Dg，OER和SER)結(jié)果表明在用藥濃度為0.5～1.0mmol/L時均顯示出較好的放射增敏活性。
實施例4對人紅白血病細(xì)胞及胃癌細(xì)胞的化學(xué)增敏活性。
用離體培養(yǎng)的人紅白血病細(xì)胞K562和人胃癌細(xì)胞SGC-7901，采用活細(xì)胞計數(shù)方法，在該藥與化療藥物順鉑和5-氟尿嘧啶分別合用后，都能顯示其化學(xué)增敏活性，例如在與5-氟尿嘧啶合用時，可使SGC-7901細(xì)胞的抑制率增加(達(dá)66.67％)。
實施例5汪××，男56歲，92年10月底因頭痛伴噴射性嘔吐，失語10余天，經(jīng)頭顱CT檢查發(fā)現(xiàn)“左側(cè)顱內(nèi)占位”，右側(cè)肢體癱瘓，于92-11-19行腫瘤次全切除術(shù)，病理為星型細(xì)胞膠質(zhì)瘤IV級。入院體檢，神志清醒，行動遲鈍，運動性失語，右上肢上抬受限，上舉不超過肩，右手握力弱于左側(cè)，方療前CT示左顳葉不規(guī)則片狀水腫區(qū)及積氣影，左側(cè)腦室輕度受壓，腦膜、組織有膨出現(xiàn)象。從92-12-23起作60Coγ-射線照射和本發(fā)明藥物合并治療在治療過程中未發(fā)現(xiàn)藥物不良反應(yīng)，血象及肝腎功能均無異常改變，治療結(jié)束時一般情況良好，神清，行動自如，答題正確，四肢張力均已恢復(fù)正常，CT檢查左顳區(qū)銀標(biāo)記后方見2.1×2.2cm高密度影，其周圍見腦組織水腫。評價有效。
實施例6韓××，男，54歲，痰中帶血半月余，經(jīng)X線胸片發(fā)現(xiàn)右上肺塊影，支氣管鏡檢查為“右上肺鱗癌”，胸部CT示右上肺葉中心型肺癌，伴右鎖骨上淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。于92-12-4住院，進(jìn)行60Coγ-射線照射和本發(fā)明藥物合并治療，療程結(jié)束時一般情況尚好，右鎖骨上淋巴結(jié)消失，攝胸片示在右上肺后段殘留直徑為4cm較淡之結(jié)節(jié)陰影。療效評價臨床緩解。
權(quán)利要求
1.一種藥物組合物，其含有通式
其中R1代表具有不同碳原子的烷基、脂肪族、芳香族或雜環(huán)芳基；R2代表氮原子、氨基、酰氨基及其任意取代的烷基；R3代表氫原子或其任意取代的烷基；n代表不同的-CH2-數(shù)目S-烷基-DL-高半胱氨酸-S，R-亞磺酰亞胺作為其活性成分和藥用載體。
2.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，可作腫瘤放射治療增敏藥物的用途。
3.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，可作腫瘤化學(xué)藥物治療增敏藥物的用途
4.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，可用于治療各種實體瘤、肉瘤、淋巴瘤、白血病的藥物用途，特別優(yōu)選的是用于治療惡性人腦膜瘤、非小細(xì)胞肺癌、卵巢癌、肝癌的用途。
5.如權(quán)利要求1至3所述的藥物組合物，可在放療和/或化療前、后、同時應(yīng)用，尤以治療前0.5～48小時或連續(xù)應(yīng)用為佳。
6.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，可以口服，靜脈、腹膜內(nèi)、皮下、皮內(nèi)、肌肉、局部、瘤內(nèi)注射和介入治療法使用。
7.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其制劑可用膠囊劑、包覆/未包覆片劑、口服液、注射劑、懸浮液、凍干劑、噴霧劑、氣溶膠和糖衣等。
8.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其活性成分占藥物組合物重量的約0.1～99.9％，最好占藥物組合物重量的約20～80％。
全文摘要
本發(fā)明涉及腫瘤增敏藥物S－烷基－DL高半胱氨酸－S,R－亞磺酰亞胺藥物組合物。該類藥物組合物具有的生物學(xué)效應(yīng)適用于提高腫瘤的放射治療與化學(xué)治療的療效。通過對腫瘤細(xì)胞或組織的化學(xué)修飾作用而增強(qiáng)其對射線和化學(xué)藥物的敏感性,進(jìn)而提高腫瘤患者的治愈率,減少治療的復(fù)發(fā)率。
文檔編號A61K31/21GK1175410SQ9710653
公開日1998年3月11日 申請日期1997年7月24日 優(yōu)先權(quán)日1997年7月24日
發(fā)明者金一尊 申請人:上海醫(yī)科大學(xué)