專利名稱：青蒿素及其衍生物在抑制血小板衍生生長(zhǎng)因子受體a中的作用及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體地，本發(fā)明涉及青蒿素及其衍生物在抑制血小板衍生生長(zhǎng)因子受體A中的作用及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
青蒿又名黃花蒿(Artemisia anaua L),屬菊科,是一年生草本植物。青蒿素是我國(guó)藥學(xué)工作者于20世紀(jì)70年代初從中藥青蒿中提取的倍半萜內(nèi)酯類抗瘧藥物。鑒于傳統(tǒng)的奎寧類藥物普遍遇到抗藥性問(wèn)題，青蒿素和它的衍生物目前已取代它們，成為世界上抗瘧疾的主流藥物。青蒿素的大環(huán)上有一個(gè)內(nèi)過(guò)氧化物橋，在亞鐵離子或亞鐵血紅素的催化下，會(huì)放出以碳為中心的自由基。細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)和核酸被這些自由基烷化后死亡。瘧原蟲(chóng)寄生在紅血球內(nèi)，含有大量來(lái)自血紅蛋白的亞鐵血紅素，因而青蒿素很易被活化，進(jìn)而將瘧原蟲(chóng)殺死。青蒿素和它的衍生物，如二氫青蒿素，蒿甲醚，蒿乙醚及青蒿琥酯等已廣泛應(yīng)用于瘧疾治療，更多的青蒿素衍生物正在研制中。青蒿素及其衍生物的抗瘧活性已得到世界公認(rèn)，具有起效快、藥效高、毒副作用低等優(yōu)點(diǎn)。除廣泛應(yīng)用于抗瘧治療外，青蒿素類藥物還具有其它多種藥理作用，如抗血吸蟲(chóng)作用、抗心律失常、平喘、抗內(nèi)毒素、抗變態(tài)反應(yīng)、抗紅斑狼瘡、免疫抑制等作用。隨著對(duì)青蒿素及其衍生物活性研究的不斷深入，人們發(fā)現(xiàn)，該類化合物對(duì)多種腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)具有抑制作用和良好的治療效果，然而，其具體作用靶點(diǎn)及相關(guān)信號(hào)通路及作用機(jī)制還不明確。因此本領(lǐng)域迫切需要了解青蒿素及其衍生物在一直腫瘤中的作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供青蒿素及其衍生物在抑制血小板衍生生長(zhǎng)因子受體A中的作用。本發(fā)明的另一目的是提供青蒿素及其衍生物作為血小板衍生生長(zhǎng)因子受體A抑制劑/拮抗劑的應(yīng)用。本發(fā)明的另一目的是提供體外治療腫瘤的方法。在本發(fā)明的第一方面，提供了一種青蒿素及其衍生物用于制備抑制選自下組疾病的藥物或藥物增敏劑的用途=I3DGFRa陽(yáng)性腫瘤、血管性疾病、或纖維性病變。在另一優(yōu)選例中，所述的I3DGFRa陽(yáng)性腫瘤細(xì)胞為T(mén)OGFRa陽(yáng)性卵巢癌細(xì)胞或PDGFRa陽(yáng)性肝癌細(xì)胞。在本發(fā)明的第二部分，提供了一種青蒿素及其衍生物的用途，用于制備血小板衍生生長(zhǎng)因子受體A (H)GFR a )的抑制劑或拮抗劑。在另一優(yōu)選例中，所述的血小板衍生生長(zhǎng)因子受體A (H)GFR a)來(lái)自于人。在另一優(yōu)選例中，所述的抑制劑或拮抗劑還用于:⑴抑制TOGFR a酪氨酸激酶的活化；和/或
(ii)抑制TOGFRa的蛋白穩(wěn)定性；和/或(iii)促進(jìn)TOGFRa泛素依賴的蛋白酶體介導(dǎo)的降解；和/或(vi)抑制TOGFR a陽(yáng)性腫瘤細(xì)胞信號(hào)通路PI3K/AKT和MAPK/EPK的活化。在另一優(yōu)選例中，所述的青蒿素衍生物選自下組:蒿甲醚、二氫青蒿素、青蒿琥酯、雙氫蒿甲醚、蒿乙醚等。在另一優(yōu)選例中，所述的青蒿素衍生物為二氫青蒿素。在本發(fā)明的第三方面，提供了一種體外非治療性地抑制血小板衍生生長(zhǎng)因子受體A(PDGFRa)活性的方法，包括步驟:將青蒿素和/或青蒿素衍生物與細(xì)胞接觸，從而抑制或拮抗細(xì)胞中血小板衍生生長(zhǎng)因子受體AQ3DGFRa )。在另一優(yōu)選例中，所述的接觸是在青蒿素和/或青蒿素衍生物存在下，培養(yǎng)所述細(xì)胞。在另一優(yōu)選例中，所述的細(xì)胞包括腫瘤細(xì)胞,較佳地包括F1DGFRa陽(yáng)性腫瘤細(xì)胞，更佳地包括I3DGFR a陽(yáng)性卵巢癌細(xì)胞或肝癌細(xì)胞，如卵巢癌細(xì)胞A2780、卵巢癌細(xì)胞0VCAR3、肝癌細(xì)胞H印3B。在另一優(yōu)選例中，所述方法還用于至少以下一種應(yīng)用:體外非治療性地抑制I3DGFR a酪氨酸激酶的活化；體外非治療性地抑 制I3DGFRa的蛋白穩(wěn)定性；體外非治療性地促進(jìn)I3DGFR a泛素依賴的蛋白酶體介導(dǎo)的降解；體外非治療性地抑制信號(hào)通路PI3K/AKT和MAPK/EPK的活化；和體外非治療性抑制I3DGFRa陽(yáng)性腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。在本發(fā)明的第四方面，提供了一種制劑組合的用途，所述制劑組合包括:(I)含青蒿素和/或青蒿素衍生物的制劑；和(II)含吉西他賓或卡鉬的制劑，所述制劑組合用于制備:(a)抑制血小板衍生生長(zhǎng)因子受體A的藥物組合物或藥盒；或(b)預(yù)防和/或治療腫瘤的藥物組合物或藥盒。在另一優(yōu)選例中，所述制劑包括:片劑、膠囊、栓劑、注射劑。在另一優(yōu)選例中，所述腫瘤為I3DGFRa陽(yáng)性腫瘤。在本發(fā)明的第五方面，提供了一種預(yù)防和/或治療TOGFRa相關(guān)疾病的方法，其中所述疾病與TOGFRa的過(guò)表達(dá)或活性過(guò)高有關(guān)，所述方法包括步驟:給需要的對(duì)象施用青蒿素和/或青蒿素衍生物，或施用含青蒿素和/或青蒿素衍生物的藥物組合物。在另一優(yōu)選例中，所述的TOGFRa相關(guān)疾病包括腫瘤(H)GFRa陽(yáng)性腫瘤)，如卵巢癌或肝癌。在另一優(yōu)選例中，PDGFRa陽(yáng)性腫瘤為T(mén)OGFRa陽(yáng)性卵巢癌或TOGFRa陽(yáng)性肝癌。在另一優(yōu)選例中，所述的施用包括:瘤內(nèi)、靜脈注射、口服片劑、腹腔注射等。在另一優(yōu)選例中，所述的對(duì)象為哺乳動(dòng)物。 在本發(fā)明的第六方面，提供了一種方法，所述方法用于體內(nèi)或體外抑制I3DGFR a酪氨酸激酶的活化、抑制I3DGFRa的蛋白穩(wěn)定性、促進(jìn)TOGFRa泛素依賴的蛋白酶體介導(dǎo)的降解、抑制信號(hào)通路PI3K/AKT和MAPK/EPK的活化、和/或抑制I3DGFR a陽(yáng)性腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、遷移和侵襲，所述方法包括步驟:給需要的對(duì)象施用青蒿素和/或青蒿素衍生物。在本發(fā)明的第七方面，提供了一種用于卵巢癌病理分級(jí)的試劑盒，所述試劑盒包含檢測(cè)離體組織I3DGFRa表達(dá)量的試劑。應(yīng)理解，在本發(fā)明范圍內(nèi)中，本發(fā)明的上述各技術(shù)特征和在下文(如實(shí)施例)中具體描述的各技術(shù)特征之間都可以互相組合，從而構(gòu)成新的或優(yōu)選的技術(shù)方案。限于篇幅，在
此不再一一累述。


下列附圖用于說(shuō)明本發(fā)明的具體實(shí)施方案，而不用于限定由權(quán)利要求書(shū)所界定的本發(fā)明范圍。圖1顯示TOGFRa可以作為青蒿素及其衍生物的直接作用靶標(biāo)；其中，圖1a為體外激酶實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示，青蒿素及其衍生物青蒿素(ART)、二氫青蒿素(DHA)、青蒿琥酯(ARM)、蒿甲醚(ARS)可以抑制TOGFRa胞內(nèi)端(aa550_末端)酪氨酸激酶的活性；圖1b為表面等離子共振(SPR)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示，雙氫青蒿素(DHA)可以與TOGFRa包外端(aa24_524)蛋白相互結(jié)合，索拉菲尼(Sorafenib)為陽(yáng)性對(duì)照，已知其可以結(jié)合抑制PDGFRa的活性；圖1c為生物素-親和素親和純化實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示，標(biāo)記生物素的DHA可以與A2780細(xì)胞內(nèi)TOGFRa相互結(jié)合，從而被親和純化出來(lái)；圖1d為計(jì)算機(jī)輔助同型模建及反向?qū)訉?shí)驗(yàn)(Computer Assisted Homology modeling and docking),結(jié)果顯不，雙氫青蒿素(DHA)可以嵌合到TOGFRa包外端TOGF結(jié)合位點(diǎn)，同時(shí)也可嵌合到其包內(nèi)端ATP結(jié)合位點(diǎn)，阻斷其激酶激活；圖1e-圖1f顯示雙氫青蒿素能夠有效抑制TOGFR a陽(yáng)性細(xì)胞A2780和0VCAR3中TOGFRa的活性和蛋白表達(dá)，而對(duì)TOGFRi^的磷酸化和蛋白水平影響不大；圖1g-圖1i顯示雙氫青蒿素可以加速TOGFR a的蛋白降解，這一過(guò)程是泛素依賴的蛋白酶體介導(dǎo)的。 圖2顯示了青蒿素及其衍生物具有抑制TOGFRa陽(yáng)性的卵巢癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和遷移能力；其中，圖2a顯示，給予藥物刺激48h后，青蒿素及其衍生物對(duì)人正常卵巢上皮細(xì)胞10SE144無(wú)明顯的生長(zhǎng)抑制能力，對(duì)于SK-0V3細(xì)胞毒性較小，但對(duì)于I3DGFRa陽(yáng)性的A2780和0VCAR3具有較強(qiáng)抑制能力，其中青蒿素和二氫青蒿素的作用最為顯著；圖2b為細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示，低濃度短時(shí)間處理(12h)卵巢癌細(xì)胞，青蒿素及其衍生物能夠有效地抑制PDGFRa陽(yáng)性細(xì)胞A2780的遷移能力，而對(duì)于TOGFRa陰性的細(xì)胞SK-0V3無(wú)明顯抑制能力；圖2c顯示了不同濃度的雙氫青蒿素對(duì)5種細(xì)胞系(10SE144、A2780、0VCAR3、0VCAR5、SK-0V3)的細(xì)胞抑制作用；圖2d顯示了不同濃度的雙氫青蒿素對(duì)3種細(xì)胞系(A2780、0VCAR3、SK-0V3)的細(xì)胞遷移的影響；圖2e顯示了不同濃度的雙氫青蒿素對(duì)2種細(xì)胞系(A2780、0VCAR3)的細(xì)胞侵襲的影響。圖3顯示青蒿素及其衍生物具有抑制TOGFRa陽(yáng)性的肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和遷移能力；其中，圖3a顯示，在人正常的肝細(xì)胞系(7702和L02)和肝癌細(xì)胞系0fep3B、HepG2,772U7404、LM3、97L、97M、Huh-7)中，只有H印3B高表達(dá)PDGFRa ;圖3b顯示，低濃度雙氫青蒿素(3μΜ)短時(shí)(12h)處理H印3B細(xì)胞，能夠顯著抑制其遷移和侵襲能力；圖3c為細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示，PDGFRa陽(yáng)性的Hep3B細(xì)胞對(duì)于雙氫青蒿素更敏感，而其他細(xì)胞對(duì)于雙氫青蒿素敏感程度較低。
圖4顯示雙氫青蒿素能抑制小鼠原位卵巢癌模型的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移；其中，圖4a顯示雙氫青蒿素給予治療小鼠，能有有效地抑制卵巢癌的惡性進(jìn)展；圖4b顯示，與對(duì)照組相比，雙氫青蒿素治療組小鼠的肺癌轉(zhuǎn)移的情況大大降低，且隨著藥量的增加，治療情況越好；圖4c顯示不同濃度的雙青青蒿素給予治療小鼠，腫瘤腹腔播散的情況(肺臟、肝臟、腸)得到明顯的抑制；圖4d為免疫組化實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示，雙氫青蒿素處理的細(xì)胞其形態(tài)轉(zhuǎn)換過(guò)程(EMT)得到抑制；圖4e為免疫印跡實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示，雙氫青蒿素能夠有效抑制TOGFRa的表達(dá)和磷酸化，下游信號(hào)通路PI3K/AKT和MAPK-ERK得以抑制。圖5顯示了青蒿素及其衍生物與一線化療藥的增敏作用；其中，圖1a為H印G2和Hep3B細(xì)胞用青蒿素或雙氫青蒿素單獨(dú)處理或聯(lián)合吉西他賓處理實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示，吉西他賓單獨(dú)作用于H印G2和Hep3B細(xì)胞，具有一定的凋亡促進(jìn)作用，青蒿素聯(lián)合吉西他賓對(duì)HepG2和Hep3B細(xì)胞都具有顯著凋亡促進(jìn)作用作用，兩藥聯(lián)合表現(xiàn)出協(xié)同作用；圖5b顯示，DHA和CBP聯(lián)合用藥24小時(shí)后對(duì)0VCAR-3細(xì)胞凋亡有增效促進(jìn)作用，用I μ M的DHA聯(lián)合500 μ M CBP(1155% )作用后的細(xì)胞凋亡率顯著高于單獨(dú)用ΙμΜ DHA (266 %)或500 μ MCBP(528% )的細(xì)胞凋亡率，而且超過(guò)了兩種化合物的凋亡累加效應(yīng)，是一種增效作用，Α2780細(xì)胞對(duì)聯(lián)合治療顯示了累加效應(yīng)；圖5c顯示，當(dāng)與DHA聯(lián)用時(shí)，CBP顯著抑制了卵巢癌細(xì)胞的活力，當(dāng)細(xì)胞暴露于I μ M CBP和ΙμΜ DHA時(shí)，Α2780細(xì)胞的存活率就降低了 69%，而0VCAR-3細(xì)胞存活則減少了 72%，相比之下，10SE144細(xì)胞則顯得對(duì)治療較不敏感，兩種藥物均以I μ M合用時(shí)存活率只降低了約28% ;圖5d為肝癌細(xì)胞Hep3B和H印G2裸鼠移植瘤實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示，青蒿素和雙氫青蒿素單藥體內(nèi)均具有抗腫瘤作用，雙氫青蒿素的抑癌作用強(qiáng)于青蒿素，青蒿素及雙氫青蒿素均能增加吉西他賓的抑癌作用，聯(lián)合吉西他賓治療效果優(yōu)于單藥，尤其是雙氫青蒿素表現(xiàn)出顯著的化療致敏作用；圖5e為在卵巢癌細(xì)胞A2780和0VCAR3裸鼠移植瘤實(shí)驗(yàn)中，結(jié)果顯示，DHA(劑量為10和25mg/kg)分別導(dǎo)致A2780異體移植腫瘤24%和41%的生長(zhǎng)抑制(與給生理鹽水的對(duì)照組相比)(P < 0.05)，0VCAR-3模型14%和37%腫瘤生長(zhǎng)抑制(P < 0.05);只給單一 CBP的治療組腫瘤生長(zhǎng)被抑制了 56%(A2780)和 46% (0VCAR-3)，聯(lián)合用藥(25mg/kgDHA)組則在 A2780 和 0VCAR-3 動(dòng)物腫瘤中均產(chǎn)生70%腫瘤生長(zhǎng)抑制(P < 0.05)。圖6顯示I3DGF Ra的表達(dá)與卵巢癌病理級(jí)別和轉(zhuǎn)移狀態(tài)的關(guān)系；其中，圖6a顯示，與低級(jí)別卵巢癌相比，高級(jí)別卵巢癌病例中，腫瘤細(xì)胞及周?chē)拈g質(zhì)細(xì)胞I3DGFR α的表達(dá)量顯著增加；圖6b為T(mén)OGFRa染色結(jié)果，結(jié)果顯示，在高級(jí)別卵巢癌病例中，TOGFRa的表達(dá)顯著增加。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明人經(jīng)過(guò)廣泛而深入的研究，發(fā)現(xiàn)青蒿素及其衍生物的用途，用于制備血小板衍生生長(zhǎng)因子受體A(H)GFRa )的抑制劑或拮抗劑，此外，青蒿素及其衍生物還可以抑制PDGFRa酪氨酸激酶的活化、抑制TOGFRa的蛋白穩(wěn)定性、促進(jìn)TOGFRa泛素依賴的蛋白酶體介導(dǎo)的降解、抑制信號(hào)通路PI3K/AKT和MAPK/EPK的活化、抑制I3DGFRa陽(yáng)性腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、遷移和侵襲、還可以用于TOGFRa陽(yáng)性腫瘤治療的增敏劑。在此基礎(chǔ)上完成了本發(fā)明。術(shù)語(yǔ)
卵巢癌卵巢癌是全世界的婦女健康的巨大威脅。在美國(guó)，卵巢癌已成為第四位致死性的女性癌癥。雖然被診斷于病發(fā)早期的卵巢癌患者的5年存活率可以達(dá)到80% -90%，但是被診斷為晚期的卵巢癌患者存活率卻只有不到25%，此外，大多數(shù)卵巢癌患者在診斷出是卵巢癌是已至晚期。目前卵巢癌患者的死亡率在過(guò)去的數(shù)十年沒(méi)有發(fā)生太大的改變，因此在腫瘤治療和預(yù)后中，尋找有效的治療方案，增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性，和克服腫瘤的耐藥性是研究人員和臨床實(shí)踐人員長(zhǎng)期以來(lái)的目標(biāo)。肝癌肝癌是最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，我國(guó)是肝癌的高發(fā)區(qū)，其發(fā)病率已上升到惡性腫瘤的第二位。由于肝癌早期癥狀不明顯，因此確診的大多數(shù)病人已處于中、晚期。原發(fā)性肝癌的首選治療是手術(shù)切除，隨著治療技術(shù)的提高，目前術(shù)后5年生存率已提高至50%-60%，但由于手術(shù)切除只適用直徑不超過(guò)5cm、癌灶數(shù)目不超過(guò)3個(gè)的小肝癌。此外，是否適合直接手術(shù)切除還取決于癌灶部位的血管富集程度及病人個(gè)體差異，這些限制導(dǎo)致90%左右的肝癌不適合手術(shù)治療。即使是可切除肝癌，術(shù)后實(shí)施以介入化療為主的綜合性治療也是必要的。然而目前，鮮有藥物能夠有效抑制肝癌的生長(zhǎng)和進(jìn)一步惡化，肝癌對(duì)傳統(tǒng)化療藥物的反應(yīng)率低，毒副作用非常顯著，因此化療的緩慢發(fā)展是制約抗腫瘤藥物臨床應(yīng)用的主要原因。因此對(duì)于腫瘤化療來(lái)說(shuō)，迫切需要尋求更好的化療增效劑和更好的治療方案，從而提高腫瘤對(duì)化療的敏感度，降低其對(duì)化療的耐藥性。血小板衍生生長(zhǎng)因子及其受體血小板衍生生長(zhǎng)因子(Platelet derived growth factor, F1DGF)是一類能夠合成并分泌到細(xì)胞外基質(zhì)中的生長(zhǎng)因子，具有促進(jìn)纖維細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞等多重組織的細(xì)胞分裂、增殖、遷移、增加細(xì)胞的黏附能力，在人胚胎發(fā)育和正常生理活動(dòng)中發(fā)揮著重要作用。TOGF以自分泌和旁分泌形式激活血 小板衍生生長(zhǎng)因子受體(TOGFR)而發(fā)揮作用。PDGFR包含兩種結(jié)構(gòu)類似的酪氨酸激酶受體I3DGFR α和TOGFR β，其中I3DGFR α的異常激活與多重疾病密切相關(guān)，具體地，I3DGFR相關(guān)疾病可以分為三類:1.腫瘤由于H)GFR(特別是TOGFRa )存在于多種腫瘤中，它可能作為一個(gè)新的治療靶點(diǎn)。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，多種腫瘤的發(fā)生與H)GFR(特別是TOGFRa )的過(guò)度激活相關(guān)，如卵巢癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、前列腺癌；此外，在一些腫瘤中存在I3DGFR的突變激活，如隆突性皮膚纖維肉瘤、胃腸道間質(zhì)瘤、Bcr-Abl陰性的慢性髓樣白血病、嗜酸細(xì)胞增多綜合征等等。2.血管性疾病研究發(fā)現(xiàn)，PDGF及TOGFR等在多種血管性疾病中存在過(guò)量表達(dá)和過(guò)度激活現(xiàn)象，如動(dòng)脈粥樣硬化和再狹窄、肺動(dòng)脈高壓、視網(wǎng)膜血管病變等，抑制TOGFR信號(hào)通路的激活可以有效緩解上述疾病的癥狀，增加其治療效果。3.纖維性病變PDGF-PDGFR信號(hào)通路在多種纖維性病變過(guò)程中發(fā)揮重要的作用，如肺纖維化、肝纖維化和肝硬化、皮膚纖維增生(硬皮病)、腎纖維化、心肌纖維化等等，其中TOGF-PDGFR信號(hào)通路介導(dǎo)的間質(zhì)細(xì)胞的增殖是該慢性炎癥的共同特征。上述三類疾病中，H)GF-PDGFR信號(hào)通路發(fā)揮重要的作用，其中TOGFRP主要介導(dǎo)了血管系統(tǒng)病變，而I3DGFRa主要介導(dǎo)了間質(zhì)細(xì)胞和成纖維細(xì)胞驅(qū)動(dòng)的病變。(JohannaAndrae, et al.Role of platelet-derived growth factors in physiology andmedicine, Genes Dev.2008 ；22:1276-1312 ;張秀華等，血小板源生長(zhǎng)因子受體與腫瘤.生命科學(xué)，Vol.18，N0.3 Jun.，2006)青蒿素及其衍生物青篙素是從中藥青篙中提取的有過(guò)氧基團(tuán)的倍半萜內(nèi)酯藥物，由于青蒿素是復(fù)雜的大分子，化學(xué)全人工很難合成，因此目前主要是生物合成和人工提取。青蒿素等倍半萜類的生物合成在細(xì)胞質(zhì)中進(jìn)行，途徑屬于植物類異戊二烯代謝途徑，可分為三大步:由乙酸形成FPP，合成倍半萜，再內(nèi)酯化形成青蒿素，具體為:FPP — 4，
11-二烯倍半萜一青蒿酸一二氫青蒿酸一二氧青蒿酸過(guò)氧化物一青蒿素。青蒿素和本領(lǐng)域幾種常見(jiàn)的青蒿素衍生物的化學(xué)式見(jiàn)下:
權(quán)利要求
1.青蒿素及其衍生物用于制備抑制選自下組疾病的藥物或藥物增敏劑的用途PDGFRa陽(yáng)性腫瘤、血管性疾病、或纖維性病變。
2.一種青蒿素及其衍生物的用途，其特征在于，用于制備血小板衍生生長(zhǎng)因子受體A(PDGFRa)的抑制劑或拮抗劑。
3.如權(quán)利要求2所述的用途，其特征在于，所述的抑制劑或拮抗劑還用于 (i)抑制TOGFRa酪氨酸激酶的活化；和/或 ( )抑制I3DGFRa的蛋白穩(wěn)定性；和/或 (iii)促進(jìn)I3DGFRa泛素依賴的蛋白酶體介導(dǎo)的降解；和/或 (vi)抑制TOGFRa陽(yáng)性腫瘤細(xì)胞信號(hào)通路PI3K/AKT和MAPK/EPK的活化。
4.如權(quán)利要求1-2任一所述的用途，其特征在于，所述的青蒿素衍生物選自下組蒿甲醚、二氫青蒿素、青蒿琥酯、雙氫蒿甲醚、蒿乙醚等。
5.一種體外非治療性地抑制血小板衍生生長(zhǎng)因子受體A(TOGFRa)活性的方法，其特征在于，包括步驟將青蒿素和/或青蒿素衍生物與細(xì)胞接觸，從而抑制或拮抗細(xì)胞中血小板衍生生長(zhǎng)因子受體A (PDGFR a )。
6.一種制劑組合的用途，所述制劑組合包括 (I)含青蒿素和/或青蒿素衍生物的制劑；和 (II)含吉西他賓或卡鉬的制劑， 其特征在于，所述制劑組合用于制備 (a)抑制血小板衍生生長(zhǎng)因子受體A的藥物組合物或藥盒；或 (b)預(yù)防和/或治療腫瘤的藥物組合物或藥盒。
7.如權(quán)利要求6所述的用途，其特征在于，所述腫瘤為T(mén)OGFRa陽(yáng)性腫瘤。
8.一種預(yù)防和/或治療I3DGFRa相關(guān)疾病的方法，其中所述疾病與TOGFR a的過(guò)表達(dá)或活性過(guò)高有關(guān)，其特征在于，包括步驟給需要的對(duì)象施用青蒿素和/或青蒿素衍生物，或施用含青蒿素和/或青蒿素衍生物的藥物組合物。
9.一種方法，所述方法用于體內(nèi)或體外抑制I3DGFRa酪氨酸激酶的活化、抑制TOGFRa的蛋白穩(wěn)定性、促進(jìn)I3DGFRa泛素依賴的蛋白酶體介導(dǎo)的降解、抑制信號(hào)通路PI3K/AKT和MAPK/EPK的活化、和/或抑制TOGFR a陽(yáng)性腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、遷移和侵襲，其特征在于，所述方法包括步驟給需要的對(duì)象施用青蒿素和/或青蒿素衍生物。
10.一種用于卵巢癌病理分級(jí)的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包含檢測(cè)離體組織PDGFR a表達(dá)量的試劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及青蒿素及其衍生物在抑制血小板衍生生長(zhǎng)因子受體A中的作用及其應(yīng)用，具體地，青蒿素及其衍生物直接作用于腫瘤的分子靶標(biāo)血小板衍生生長(zhǎng)因子受體A(PDGFRα)，與細(xì)胞膜上的PDGFRα結(jié)合，抑制PDGFRRα胞內(nèi)段的酪氨酸激酶的活化，抑制PDGFRα的蛋白穩(wěn)定性，促進(jìn)泛素依賴的蛋白酶體介導(dǎo)的降解過(guò)程，對(duì)于高表達(dá)PDGFRα的腫瘤細(xì)胞具有劑量依賴的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制和遷移侵襲抑制作用，也可以抑制信號(hào)通路PI3K/AKT和MAPK/ERK的活化。
文檔編號(hào)A61P17/00GK103251585SQ201210034078
公開(kāi)日2013年8月21日 申請(qǐng)日期2012年2月15日 優(yōu)先權(quán)日2012年2月15日
發(fā)明者王慧, 李曉光, 陳培戰(zhàn) 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院