專利名稱：注射用丹參川芎嗪凍干粉針制劑的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種注射用藥物的制備方法，尤其涉及一種治療心腦血管疾病用凍干粉針劑的制備方法。
背景技術(shù)：
目前，心腦血管疾病已經(jīng)成了嚴(yán)重危害中老年人生命健康的常見病之一；近幾年患心腦血管疾病人群日趨增多，且趨于年輕化；據(jù)統(tǒng)計，我國心腦血管疾病患者已經(jīng)達(dá)到2. 7億。臨床研究證明，“丹參川芎嗪注射液”、“復(fù)方丹參片”、“樂麥膠囊”等以丹參為主要原料的單方或中西復(fù)方制劑對心腦血管疾病均有確切療效。目前，由于注射劑的療效明顯好于口服制劑，因此“丹參川芎嗪注射液”、“丹參川芎嗪葡萄糖注射液”在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用。然而，由于注射液的穩(wěn)定性較差，易隨時間的延長而發(fā)生分解，從而影響藥品質(zhì)量及療效；為此，公告號為“CN100361672C”的專利文獻(xiàn)公開了一種名稱為“丹參川芎嗪凍干粉針劑及制備方法”的發(fā)明專利。該專利雖然克服了傳統(tǒng)丹參川芎嗪注射液的缺陷，但該專利在丹參提取物的制備過程中只進(jìn)行水煮、濃縮、 醇沉等工序，雜質(zhì)去除不完全，制得的丹參提取物有效成分純度低；而且在制備過程中未對丹參素和鹽酸)11芎嗪含量進(jìn)行量化指標(biāo)控制。

發(fā)明內(nèi)容
為了克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺陷，本發(fā)明旨在提供一種丹參提取物有效成分單一、并嚴(yán)格控制丹參素和鹽酸川芎嗪含量比例的注射用丹參川芎嗪凍干粉針制劑的制備方法。為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案由丹參提取物、鹽酸川芎嗪、填充劑按 1:10:0.5的重量比按以下方法制成
1)丹參提取物制備取丹參藥材用米醋浸潤24小時，取出后炒制成丹參炭；加入12倍丹參藥材重量的水煎煮2小時，濾過；再加入10倍丹參藥材重量的水煎煮1. 5小時，濾過； 合并兩次濾液，靜置12小時，取上清液離心機(jī)分離，收集離心液并減壓濃縮至相對密度為 1. 25的一次浸膏；該一次浸膏冷卻后加入95%乙醇至溶液含醇量達(dá)55%，靜置24小時，取上清液過濾，濾液回收乙醇并濃縮至相對密度為1. 25的二次浸膏；該二次浸膏冷卻后加入 95%乙醇至溶液含醇量達(dá)75%，靜置24小時取上清液濾過，濾液回收乙醇并濃縮至相對密度為1. 3的三次浸膏；在三次浸膏中加入4倍重量的注射用水和0. 5倍重量的活性炭，攪拌均勻后靜置6小時，過濾，濾液上大孔吸附樹脂柱，注射用水洗脫；將收集的一次洗脫液上聚酰胺柱，注射用水洗脫，收集二次洗脫液并濃縮至相對密度為1. 2的四次浸膏，用0. lmol/L 的鹽酸溶液調(diào)節(jié)四次浸膏的PH值達(dá)4. 0 4. 5，制得丹參提取物，備用；
2)藥液配制取鹽酸川芎嗪溶于2.5倍重量的注射用水中，加入丹參提取物，攪拌均勻得A液；取填充劑溶于同等重量的注射用水中得B液；將A液、B液緩慢混合均勻得混合液， 加熱至60°C，加入重量為該混合液0. 05%的針用活性炭，再加熱20分鐘，冷卻，過濾脫碳； 向經(jīng)過脫碳處理的混合液中加入0. 35倍混合液重量的注射用水，分別用0. 45um和0. 22um 的微孔濾膜過濾除菌，制成每Iml溶液中含丹參素0. 4^0. 5mg、含鹽酸川芎嗪4mg的丹參川芎嗪溶液；
3)冷凍干燥將丹參川芎嗪溶液分裝于西林瓶中，每瓶5ml，藥液樣品放入凍干機(jī)預(yù)凍至-45°C，保溫5小時；緩慢升溫至_20°C，需要24小時；緩慢升溫至0°C，需要24小時；緩慢升溫至25°C，需要16小時；在25°C保溫4小時，至真空度無明顯變化，即得注射用丹參川芎嗪凍干粉針劑。上述技術(shù)方案中，所述填充劑為山梨醇、甘露醇、聚乙烯吡咯烷酮中的一種、或兩種、或兩種以上組合；所述離心機(jī)轉(zhuǎn)速為4000 6000轉(zhuǎn)/分。丹參又名赤參，紫丹參，紅根等；為雙子葉植物唇形科，干燥根及根莖。主產(chǎn)于安徽、河南、山東、陜西等地。根主含脂溶性的二萜類成分，如丹參酮I、II A、II B,隱丹參酮， 異隱丹參酮，羥基丹參酮，降丹參酮，異丹參酮等外，還含有水溶性的酚酸成分，如丹參素， 丹參酸甲、乙、丙，原兒茶酸，原兒茶醛等。其功效為活血調(diào)經(jīng)，祛瘀止痛，涼血消癰，清心除煩，養(yǎng)血安神。鹽酸川芎嗪，化學(xué)原料藥，其結(jié)構(gòu)為2. 3. 5. 6-四甲基吡嗪結(jié)構(gòu)的化合物，系中藥川芎中提取的生物堿；因其鹽類有較好的穩(wěn)定性，故常用鹽酸川芎嗪代替川芎嗪使用?，F(xiàn)代藥理研究表明川芎嗪具有擴(kuò)冠、降壓、提高心肌耐缺氧能力，抑制血小板聚集，興奮呼吸中樞，松弛支氣管平滑肌，提出高通氣功能，阻止免疫復(fù)合物形成，抑制病菌生長，促進(jìn)炎癥吸收，增強(qiáng)毛細(xì)血管致密性，降低血液粘度，改善循環(huán)，增加內(nèi)臟重要器官血液的供應(yīng)等作用。 此外尚有擴(kuò)張小動脈，改善微循環(huán)和增加腦血流量，從而產(chǎn)生抗血栓形成和溶血栓和作用。丹參素的化學(xué)名稱為β -3,4- 二羥基苯基乳酸。與現(xiàn)有技術(shù)比較，本發(fā)明由于采用了上述技術(shù)方案，在丹參提取物制備過程中采用了水煮、離心、濃縮、醇沉、吸附、洗脫等工序，不僅能夠比較徹底的去除無用雜質(zhì)，從而能夠確保制得的丹參提取物有效成分單一；而且由于嚴(yán)格控制了丹參素和鹽酸川芎嗪的含量，因此用本發(fā)明方法制備的干粉針制劑為復(fù)方制劑，該制劑質(zhì)量穩(wěn)定可控，療效確切，安全性高，能抗血小板聚集，對已聚集和血小板有解聚作用。以下是用本發(fā)明方法制備得到的丹參川芎嗪對新生大鼠缺氧缺血性腦損傷組織中的一氧化氮(No)、一氧化氮合酶(NOS)變化所作的影響試驗，以驗證用本發(fā)明方法提取得到的丹參川芎嗪的藥理作用。1)材料和方法
a.儀器和試劑儀器采用752C型紫外分光光度計，試劑采用本發(fā)明方法制備的用丹參川芎嗪配制而成的注射液(使用時用無菌生理鹽水溶解配制成lg/L注射液)，測定NO、NOS 的試劑盒(南京建成生物工程研究所生產(chǎn))。b.分組7天齡SD大鼠，性別不限，體質(zhì)量10 15g，隨機(jī)分成3組，每組10只； 分別為空白對照組，缺氧缺血模型組，丹參川芎嗪治療組。c. NO、NOS測定動物分別在缺氧缺血后6、24、48h斷頭處死，取結(jié)扎側(cè)腦組織稱重，用無菌生理鹽水作為勻漿介質(zhì)，按lg:10mL的比例在冰浴中充分勻漿制成10%組織勻漿，離心機(jī)分離后取上清液，測定N0、N0S ；NO采用硝酸還原酶法測定，NOS應(yīng)用比色法測定。d.統(tǒng)計學(xué)方法應(yīng)用SAS 8. 0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，經(jīng)方差齊性檢驗后，多組均數(shù)比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用q檢驗。2.結(jié)果見表1、表2
表1 丹參川芎嗪對新生大鼠腦組織NO的影響
權(quán)利要求
1.一種注射用丹參川芎嗪凍干粉針制劑的制備方法，其特征在于由丹參提取物、鹽酸川芎嗪、填充劑按1:10:0. 5的重量比按以下方法制成1)丹參提取物制備取丹參藥材用米醋浸潤24小時，取出后炒制成丹參炭；加入12倍丹參藥材重量的水煎煮2小時，濾過；再加入10倍丹參藥材重量的水煎煮1. 5小時，濾過； 合并兩次濾液，靜置12小時，取上清液離心機(jī)分離，收集離心液并減壓濃縮至相對密度為 1. 25的一次浸膏；該一次浸膏冷卻后加入95%乙醇至溶液含醇量達(dá)55%，靜置24小時，取上清液過濾，濾液回收乙醇并濃縮至相對密度為1. 25的二次浸膏；該二次浸膏冷卻后加入 95%乙醇至溶液含醇量達(dá)75%，靜置24小時取上清液濾過，濾液回收乙醇并濃縮至相對密度為1. 3的三次浸膏；在三次浸膏中加入4倍重量的注射用水和0. 5倍重量的活性炭，攪拌均勻后靜置6小時，過濾，濾液上大孔吸附樹脂柱，注射用水洗脫；將收集的一次洗脫液上聚酰胺柱，注射用水洗脫，收集二次洗脫液并濃縮至相對密度為1. 2的四次浸膏，用0. lmol/L 的鹽酸溶液調(diào)節(jié)四次浸膏的PH值達(dá)4. 0 4. 5，制得丹參提取物，備用；2)藥液配制取鹽酸川芎嗪溶于2.5倍重量的注射用水中，加入丹參提取物，攪拌均勻得A液；取填充劑溶于同等重量的注射用水中制得B液；將A液、B液緩慢混合均勻得混合液，加熱至60°C，加入重量為該混合液0. 05%的針用活性炭，再加熱20分鐘，冷卻，過濾脫碳；向經(jīng)過脫碳處理的混合液中加入0. 35倍混合液重量的注射用水，分別用0. 45um和 0. 22um的微孔濾膜過濾除菌，制成每Iml溶液中含丹參素0. 4^0. 5mg、含鹽酸川芎嗪4mg的丹參川芎嗪溶液；3)冷凍干燥將丹參川芎嗪溶液分裝于西林瓶中，每瓶5ml，藥液樣品放入凍干機(jī)預(yù)凍至-45°C，保溫5小時；緩慢升溫至_20°C，需要24小時；緩慢升溫至0°C，需要24小時；緩慢升溫至25°C，需要16小時；在25°C保溫4小時，至真空度無明顯變化，即得注射用丹參川芎嗪凍干粉針劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的注射用丹參川芎嗪凍干粉針制劑的制備方法，其特征在于 所述填充劑為山梨醇、甘露醇、聚乙烯吡咯烷酮中的一種、或兩種、或兩種以上的組合。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的注射用丹參川芎嗪凍干粉針制劑的制備方法，其特征在于所述離心機(jī)轉(zhuǎn)速為4000 6000轉(zhuǎn)/分。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種注射用丹參川芎嗪凍干粉針制劑的制備方法，屬于醫(yī)藥領(lǐng)域。其技術(shù)方案是將丹參進(jìn)行浸潤、水煮、離心分離、濃縮、醇沉、吸附、洗脫等工序處理，制得有效成分較單一的丹參提取物，然后將丹參提取物、鹽酸川芎嗪、填充劑按1:10:0.5的重量比例溶于水中，經(jīng)過濾、脫碳、微孔濾膜除菌、冷凍干燥等處理即得丹參川芎嗪凍干粉針制劑；在本發(fā)明方法制成的丹參川芎嗪凍干粉針制劑中，每1ml組合藥物含丹參素0.4~0.5mg、含鹽酸川芎嗪不低于4mg。本發(fā)明生產(chǎn)的制劑質(zhì)量穩(wěn)定可控，療效確切，安全性高，能抗血小板聚集，對已聚集和血小板有解聚作用，是一種主要用于閉塞性腦血管疾病、缺血性心血管疾病的藥物。
文檔編號A61K36/537GK102357083SQ20111035023
公開日2012年2月22日 申請日期2011年11月8日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月8日
發(fā)明者伍朝平, 周牧, 朱麟, 薛捷 申請人:貴州拜特制藥有限公司