專利名稱：3，5-二取代的和3，4，5-三取代2-異噁唑啉和異噁唑，其制備方法及其作為藥物的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于預(yù)防和/或治療炎癥，氣喘，風(fēng)濕性疾病和自身免疫疾病的藥物。
非留醇類抗炎藥物，例如乙酰基水楊酸和吲哚復(fù)辛的作用模式是已知的。其基礎(chǔ)是抑制環(huán)氧化酶、該酶存在于許多細(xì)胞內(nèi)，它產(chǎn)生促進(jìn)炎癥的前列腺素。
還已知此類環(huán)氧化酶抑制劑可被用于風(fēng)濕病治療(EP245825)。
然而，同時(shí)也很清楚，除了其討厭的作用外，前列腺素也可產(chǎn)生需要的細(xì)胞保護(hù)性質(zhì)，例如在血小板中，在胃十二指腸和腎臟中。因?yàn)檫@一原因，所有環(huán)氧化酶抑制劑都帶來討厭的副作用，如延長(zhǎng)出血時(shí)間，產(chǎn)生胃潰瘍和抑制腎功能。
鑒于此，可以有利地不抑制前列腺素，而通過封鎖其形成來抑制特別有力的炎癥介質(zhì)，白細(xì)胞胞三烯和細(xì)胞因子，如白細(xì)胞介素1α和白細(xì)胞介素1β，氧基和蛋白酶的物質(zhì)類別。
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，式I化合物基本上不抑制環(huán)氧化酶，而抑制來自白血細(xì)胞的白細(xì)胞三烯，細(xì)胞因子，氧基和蛋白酶，也證明在試驗(yàn)氣喘，自身免疫疾病和風(fēng)濕性疾病模型中的正效果。
本發(fā)明涉及式I化合物 和/或式I化合物的藥理耐受鹽和/或式I化合物的立體異構(gòu)形式；在此文本中，基團(tuán)R1或R2中的一個(gè)具有式II的意義 而基團(tuán)R1或R2中的另一個(gè)具有如下意義a)吡啶基，b)噻吩基，c)噻唑基，d)式III的基團(tuán) 其中n是數(shù)字0，1，2，3，4，5或6，m是數(shù)字0，1，2，3或4，z是1)-O-，或2)-NH-，R5和R6各自獨(dú)立地為1)氫原子，2)(C1-C4)烷基，3)(C2-C4)烯基，4)(C2-C4)炔基，5)苯基，或6)OH，和R7為1)氫原子，2)氨基酸殘基，3)三氟甲磺?；?，
4)-O-P(O)(OH)2，5)用苯基或(C1-C6)烷基一-或二-酯化的-O-P(O)(OH)2，或6)式IV的基團(tuán) 其中O是數(shù)字0或1，且其中R9和R10各自獨(dú)立地有如下意義1)氫原子，或2)(C1-C4)烷基，和R11為1)OH，2)-O-(C1-C4)烷基，3)(C1-C20)烷基，4)(C1-C20)烷基，各自獨(dú)立地被4.1-COOH，4.2-OH，4.3 O-乙?；?.4＝O一次或多次取代，5)-COOH，6)-COO-(C1-C4)烷基-，7)N-甘氨?；?，8)N-甘氨?；?(C1-C4)烷基酯，9)N-(C1-C4)-烷基羥基氨基，10)N-(1H-四唑-5-基)氨基，11)5-甲基異噁唑-4-基，12)1-氰基-2-羥基-1-丙烯基，
13)苯基，14)苯基，被下式基團(tuán)一次或多次取代14.1(C1-C4)烷基-NR12R13其中R12和R13各自獨(dú)立地具有如下意義1)氫原子，2)(C1-C4)烷基，3)苯基-(C1-C2)-烷基，4)R12和R13與連接它們的氮原子一起形成五-至七-員雜環(huán)，該雜環(huán)是未取代的或被(C1-C4)烷基取代一至三次，該取代基的一個(gè)碳原子可被硫，氧或氮原子代替，或5)氨基酸殘基，或R6和R7互相鍵連，并一起為1至3個(gè)CH2基團(tuán)，e)式V的基團(tuán)-Q1-CO-R8(V)其中Q1是1)-(CH2)m-，其中m是數(shù)字0，1，2，3或4，或2)-CH＝CH-，和R8是1)氫原子，2)(C1-C4)烷基，3)OH，4)-O-(C1-C4)烷基-5)NH2，6)N-(1H-四唑-5-基)氨基，或7)N-(3，5-二甲基-4-羥基芐基)氨基，或f)式VI的基團(tuán)
其中Q2是1)-(CH2)m-其中m是數(shù)字0，1，2，3或4，或2)-CH＝CH-，和X和Y各自獨(dú)立地為1)(C1-C4)烷基，2)-O-(C1-C4)烷基，或3)OH，…A…是存在或不存在的雙鍵，其限制是雙鍵和基團(tuán)R4不同時(shí)存在，R4是1)氫原子，或2)(C1-C6)-烷基，或R2和R4與連接它們的碳原子一起形成由3，4或5個(gè)碳原子組成的脂族環(huán)，而R3是1)氫原子2)羥基-(C1-C4)烷基，或3)羥基-(C1-C4)烷基。
式I化合物可以光學(xué)異構(gòu)體，非對(duì)映異構(gòu)體或外消旋體，或其混合物存在于藥物中。設(shè)計(jì)的烷基或烷?；梢灾辨溁蛑ф湹男问酱嬖?。
對(duì)本發(fā)明來說，五-至七-原雜環(huán)是，例如，吡咯，吡啶，氮雜，噻唑、異噻唑、噁唑、異噁唑、吡唑、咪唑、噻嗪、1，2-噁嗪，1，3-噁唪，嗎啉，噠嗪，嘧啶，吡唪，1，2-硫氮雜，1，3-硫氮雜，1，4-硫氮雜，1，2-氧氮雜，1，3-氧氮雜，1，4-氧氮雜，1，2-二氮雜，1，3-二氮雜，1，4-二氮雜或其部分或完全飽和的變體。特別應(yīng)提到吡咯烷，哌啶，嗎啉，哌嗪，N-甲基哌嗪或吡啶。
術(shù)語(yǔ)“氨基酸”被理解為立體異構(gòu)形式，例如如下化合物的D和L形式天冬酰胺，頡氨酸，精氨酸，天冬氨酸，谷氨酰胺，谷氨酸，色氨酸，β丙氨酸，賴氨酸，脯氨酸，甘氨酸，γ-氨基丁酸，Nε-乙?；嚢彼幔琋δ-鳥氨酸，Nγ-乙酰基二氨基丁酸，Nα-乙?；被∷?，組氨酸，異亮氨酸，亮氨酸，苯丙氨酸，絲氨酸，半胱氨酸，蘇氨酸，丙氨酸和酪氨酸。L-氨基酸是優(yōu)選的。氨基酸殘基從相應(yīng)的氨基酸衍生。氨基酸的名稱以習(xí)慣方式縮寫。氨基酸殘基通過酰胺鍵連接到-NH-上或通過酯鍵連接到-O-上。
下列氨基酸殘基是優(yōu)選的Gly，Ala，Phe，Ser，Thr，Val，β-Ala，γ-氨基丁酸，Asp，Glu，Gln，Nε-乙?；嚢彼幔琋δ-乙?；B氨酸，Nα-乙?；被∷?，Lys或tyr。
優(yōu)選的式I化合物和/或式I化合物的藥理耐受鹽和/或式I化合物的立體異構(gòu)形式，其中R1或R2中的一個(gè)具有式II的意義，而R1或R2中的另一個(gè)具有如下意義a)2-吡啶基，b)4-吡啶基，c)噻吩-3-基，d)2-噻唑基，e)式III的基團(tuán)，其中n是數(shù)字0，1，2，3或4，而m是數(shù)字0或1，z是1)-O-，或2)-N-，或R5和R6各自獨(dú)立地為1)氫原子，2)(C1-C2)烷基，3)苯基，或4)OH，或R6和R7互相連接一起形成亞甲基，或R7為1)氫原子，2)三氟甲磺?；?，3)氨基酸基Gly，Phe，Ala，Lys，Tyr，或Ser，或4)式IV的基團(tuán)其中O為數(shù)字0或1，R9和R10各自獨(dú)立地為
1)氫原子，或2)甲基，R11是1)OH，2)-O-(C1-C4)-烷基，3)(C1-C18)烷基，4)互相獨(dú)立地被下列基團(tuán)取代一次或多次，4.1-COOH，4.2 OH，或4.3 O-乙?；?，5)-COOH，6)-COO-(C1-C4)-烷基，7)N-甘氨?；?)N-甘氨?；?(C1-C4)烷基酯，9)N-甲基羥基氨基，10)N-(1H-四唑-5-基)氨基，11)5-甲基異噁唑-4-基，12)1-氰基-2-羥基-1-丙烯基，13)被13.1 4-(4-嗎啉代)甲基取代一次的苯基，f)式V的基團(tuán)，其中Q1是1)-(CH2)m-，其中m是數(shù)字0，1，或2，或2)-CH＝CH-，而R8是1)氫原子，2)甲基，3)OH4)-O-(C1-C2)-烷基，5)氨基，6)N-(1H-四唑-5-基)氨基，或7)N-3，5-二甲基-4-羥基芐基，或g)式VI的基團(tuán)，其中Q2是1)-(CH2)m-，其中m是數(shù)字0，1，或2，或2)-CH＝CH-，X和Y互相獨(dú)立地為1)甲基，2)-O-(C1-C2)-烷基，或3)OH，…A…是存在或不存在的雙鍵，其限制是雙鍵和R4基團(tuán)不能同時(shí)存在，R4為1)氫原子，或2)(C1-C2)-烷基，或R2和R4與它們所連接的碳原子一起形成具有3，4或5個(gè)碳原子的脂環(huán)，R3為1)氫原子，2)甲基，或3)羥甲基。
特別優(yōu)選的是式I化合物和/或式I化合物的生理耐受鹽和/或式I化合物的立體異構(gòu)形式，其中基團(tuán)R1或R2之一具有式II的意義，而R1或R2中的另一個(gè)具有如下意義a)2-吡啶基，b)4-吡啶基，c)噻吩-3-基，d)2-噻唑基，e)式III的基團(tuán)，其中n是數(shù)字0，1，2，3或4，而m是數(shù)字0或1，z是1)-O-，或2)-NH-，或R5和R6各自獨(dú)立地為1)氫原子，2)(C1-C2)烷基，3)苯基，或R6和R7互相連接一起形成亞甲基，或R7為1)氫原子，2)三氟甲磺?；?)氨基酸基Gly，Lys，或Phe，或4)式IV的基團(tuán)其中O為數(shù)字0或1，R9和R10各自獨(dú)立地為1)氫原子，或2)甲基，R11是1)OH，2)-O-甲基或O-乙基，3)(C1-C18)烷基，4)互相獨(dú)立地被下列基團(tuán)取代一次或多次的(C1-C6)烷基，4.1-COOH，4.2 OH，或4.3 O-乙?；?)-COOH，6)-COO-(C1-C2)-烷基，7)N-甘氨?；?，8)N-甘氨酰基-(C1-C2)烷基酯，9)N-甲基羥基氨基，10)N-(1H-四唑-5-基)氨基，11)5-甲基異惡唑-4-基，或12)1-氰基-2-羥基-1-丙烯基，f)式V的基團(tuán)，其中Q1是1)-(CH2)m-，其中m是數(shù)字0，1，或2，或2)-CH＝CH-，而R8是1)氫原子，2)甲基，3)OH4)-O-甲基，5)氨基，6)N-(1H-四唑-5-基)氨基，或7)N-3，5-二甲基-4-羥基芐基，或g)式VI的基團(tuán)，其中Q2是1)-(CH2)m-，其中m是數(shù)字0，或2，或2)-CH＝CH-X和Y互相獨(dú)立地為1)甲基2)-O-(C1-C2)-烷基，或3)OH，…A…是存在或不存在的雙鍵，其限制是雙鍵和R4基團(tuán)不能同時(shí)存在，R4為1)氫原子，或2)甲基，或R2和R4與它們所連接的碳原子一起形成具有3，4，或5個(gè)碳原子的脂環(huán)，R3是1)氫原子，或2)羥甲基。
以結(jié)構(gòu)式列于表1的化合物是非常優(yōu)選的。
本發(fā)明也涉及制備式I的2-異噁唑啉或異噁唑和/或式I化合物的立體異構(gòu)形式和/或式I化合物的生理耐受鹽的方法，其中a)用異氰酸酯和催化量的三乙胺將伯硝基化合物轉(zhuǎn)化為對(duì)應(yīng)的腈氧化物，或用有機(jī)或無機(jī)堿將通過氯化對(duì)應(yīng)的醛肟得到的異羥肟酰氯轉(zhuǎn)化為對(duì)應(yīng)的腈氧化物，作為中間體得到的此腈氧化物不經(jīng)純化與適當(dāng)取代的烯或炔反應(yīng)，進(jìn)行1，3-二極環(huán)加成，形成式I的2-異惡唑啉或異噁唑，如果需要，產(chǎn)生的產(chǎn)物通過結(jié)晶或色譜純化，或b)根據(jù)a)或o)制備的式I的羧酸酯，或通過方法h)或k)額外引入的酯基，被水解為羧酸，或c)根據(jù)方法a)或o)制備的式I的羧酸烷基酯用適當(dāng)取代的伯胺或仲胺轉(zhuǎn)化為對(duì)應(yīng)的酰胺，或d)根據(jù)a)或o)制備的式I的次膦酸一烷基酯或膦酸二烷基酯被水解為膦酸半酯，膦酸或次膦酸，或e)根據(jù)b)得到的羧酸首先被轉(zhuǎn)化為活化的酸衍生物，此衍生物隨后用醇酯化，或用伯胺或仲胺轉(zhuǎn)化為對(duì)應(yīng)的酰胺，或用N-烷基化的羥胺轉(zhuǎn)化為對(duì)應(yīng)的羥基酰胺，或f)在方法a)，b)，h)，e)，o)或g)中中間得到的或攜帶的N-保護(hù)基或O-保護(hù)基被消除，或被引入的羧酸，次膦酸，膦酸或膦酸酯被相應(yīng)水解，得到式I化合物，或g)根據(jù)方法f)或o)得到的，并具有游離氨基的化合物通過與異氰酸酯反應(yīng)轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的脲衍生物，或通過與活化的羧酸衍生物或N-保護(hù)的氨基酸反應(yīng)轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的酰胺，或通過與磺酰氯反應(yīng)轉(zhuǎn)化為對(duì)應(yīng)的磺酰胺，或h)根據(jù)方法a)，o)或f)得到的，具有游離醇基的化合物通過與異氰酸酯反應(yīng)轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的脲烷，或通過與在羧基上被活化并可進(jìn)一步帶有官能團(tuán)的羧酸衍生物或相應(yīng)的N-保護(hù)的氨基酸衍生物反應(yīng)轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的酯，或用二烯酮轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的3-氧代丁酸酯，或通過與鹵代化合物如α-鹵代羧酸反應(yīng)轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的醚，或i)根據(jù)方法a)，o)或f)得到的，具有伯或仲醇基的化合物被氧化為相應(yīng)的醛或酮，或k)根據(jù)方法i)制備的羰基化合物通過與堿和二烷基膦?；宜狨シ磻?yīng)轉(zhuǎn)化為巴豆酸衍生物，或通過與四烷基亞甲基二膦酸酯反應(yīng)轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的反式-2-(二烷氧基膦?；?乙烯基衍生物，或1)在環(huán)加成期間引入的環(huán)氧基被轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的1，2-二醇，或m)根據(jù)方法g)制備的，含有3H-異噁唑環(huán)的酰胺通過用堿處理進(jìn)行開環(huán)，轉(zhuǎn)化為2-氰基-3-羥基巴豆酰胺，或n)根據(jù)方法a)-m)制備的，由于其化學(xué)結(jié)構(gòu)而以對(duì)映體形式存在的式I化合物通過與對(duì)映體純的酸或堿成鹽，在手性固定相上層析，或用手性對(duì)映體純的化合物如氨基酸衍生，分開這樣得到的非對(duì)映體，消除手性輔助基，被拆分為純對(duì)映體，或o)通過與手性或外消旋烯環(huán)加成得到的式I的2-異惡唑啉非對(duì)映異構(gòu)的混合物通過硅膠柱色譜被拆分為純的非對(duì)映異構(gòu)體，或p)根據(jù)方法a)-o)制備的式I化合物可以以游離形式被分離，或如果需要，當(dāng)有酸或堿基存在時(shí)，被轉(zhuǎn)化為生理耐受鹽，或q)根據(jù)方法h)制備的，帶有其它官能團(tuán)如鹵代甲基的化合物被用伯或仲氨基烷基化，或用醇酯化。
從式I化合物，包括其可以形成鹽的立體異構(gòu)形成制備生理耐受鹽以本身已知的方式進(jìn)行。羧酸，膦酸和次膦酸，以及膦酸半酯，與堿性試劑如氫氧化物，碳酸鹽，碳酸氫鹽或醇鹽，以及氨或有機(jī)，堿例如三甲胺，三乙胺或乙醇胺，以及堿性氨基酸，例如賴氨酸，鳥氨酸或精氨酸形成穩(wěn)定的堿金屬鹽，堿土金屬鹽或非強(qiáng)制性取代的銨鹽。至于在R1或R2基團(tuán)中有堿性基團(tuán)的式I化合物，也可用強(qiáng)酸制備穩(wěn)定的酸加成鹽。無論無機(jī)酸或有機(jī)酸，如鹽酸，氫溴酸，硫酸，膦酸，甲磺酸，苯磺酸，對(duì)甲基磺酸，4-溴苯磺酸，環(huán)己基酰氨基磺酸，三氟甲磺酸，乙酸，草酸，酒石酸或三氟乙酸都適于此目的。
用作1，3-二極環(huán)加成原料化合物的腈氧化物的制備和轉(zhuǎn)化描述于最近的專題文章(K.P.G.TorsellNitrile Oxides，Nitrones and Nitronates in Organic Synthesis，VCH Vertags-gesellschaft，Weinheim，1988)中。用作前體的異羥肟酰鹵可根據(jù)文獻(xiàn)的已知方法，通過鹵化相應(yīng)的醛肟，或在氯氧亞氨基乙酸酯的情況下，經(jīng)重氮化反應(yīng)從甘氨酸烷基酯得到(G.S.Skinner，J.Am.Chem.Soc.64(1924)，731)。如果次氯酸叔丁酯被用于氯化醛肟，不需要分離相應(yīng)的異羥肟酰氯。也可被使用的硝基化合物在一些情況下是從文獻(xiàn)已知的，或由文獻(xiàn)已知其原理的方法制備，例如，4-硝基丁酸酯由氧化物催化的或堿催化的硝基甲烷與丙烯酸衍生物的加成得到(D.W.Chasar，Synthesis 1982，841-42；N.Ono，Synthesis 1984，226-227)。
從文獻(xiàn)已知的產(chǎn)量可被顯著提高，一般表現(xiàn)為難于分開的副產(chǎn)物的雙加合物的形成在很大程度上通過用1，8-二氮雜雙環(huán)〔5.4.0〕十一碳-7-烯(DBU)作為堿以特殊方式進(jìn)行反應(yīng)而防止。
作為反應(yīng)物的非強(qiáng)制性取代的烯或炔衍生物作為母體物質(zhì)，絕大部分已知并從文獻(xiàn)也可購(gòu)得。適當(dāng)?shù)闹笇?dǎo)在實(shí)施例中給出。容易低聚的腈氧化物的生產(chǎn)有利地在烯屬或炔屬反應(yīng)物存在下不經(jīng)任何中間體分離，“就地”進(jìn)行。當(dāng)它們從硝基化合物根據(jù)Mukaiyama的方法生產(chǎn)時(shí)，芳族異氰酸酯，例如異氰酸苯酯或二異氰酸根合笨，被優(yōu)選用于脫水。在此情況下，可以有利地在非質(zhì)子溶劑或?qū)Ψ磻?yīng)物惰性的分配劑，如乙酸乙酯，二甲基甲酰胺，二甲基乙酰胺，二烷基醚，四氫呋喃，鹵代烴，例如二氯甲烷，氯仿或二氯乙烷，烴，如己烷，環(huán)己烷，苯，甲苯或其它取代的芳族化合物中進(jìn)行，上述溶劑的混合物也是合適的。有機(jī)或無機(jī)，堿如叔胺，堿金屬碳酸鹽或堿金屬氫氧化物被用于從異羥肟酰鹵生產(chǎn)腈氧化物。在此情況下，當(dāng)有機(jī)堿被使用時(shí)，反應(yīng)優(yōu)選地在上述非強(qiáng)制性氯代的脂族或芳族烴或脂族，以及環(huán)狀醚中進(jìn)行，而且，當(dāng)無機(jī)堿被使用時(shí)，反應(yīng)也可在兩相溶劑混合物，例如乙酸乙酯/水或二氯甲烷/水中進(jìn)行。腈氧化物的制備和環(huán)加成一般在-20℃至+80℃的溫度，然而，優(yōu)選0°至+40℃進(jìn)行。
夾帶在環(huán)加成中，或通過進(jìn)一步反應(yīng)的方或被隨后引入的烷基酯水解越相應(yīng)羧酸通常用可以等摩爾量或過量使用的堿水溶液，在水溶液中，或者，如果原料化合物難溶于水，在水/有機(jī)溶劑混合物中實(shí)現(xiàn)，水/醇混合物已被證明具有特殊價(jià)值。
在通式I中的取代基R1或R2中帶入的胺，醇或羧酸保護(hù)基的裂解通常根據(jù)在肽化學(xué)上已知的方法進(jìn)行，在優(yōu)選使用的叔丁氧羰基的情況下，酸性消除，例如用醇溶解的鹽酸或三氟乙酸是優(yōu)選的，而低級(jí)烷基酯優(yōu)選地在堿性條件下裂解。
膦酸酯和次膦酸酯向相應(yīng)的游離酸的轉(zhuǎn)化在酸性條件下，優(yōu)選在無水介質(zhì)中實(shí)現(xiàn)，例如在有機(jī)酸如乙酸中用氫溴酸，或在非質(zhì)子溶劑中用三甲基溴代甲硅烷或三甲基碘代甲硅烷實(shí)現(xiàn)，鹵代烴優(yōu)選地被應(yīng)用。在此情況下，0°至50℃被選作反應(yīng)溫度以確除裂解在溫和條件下進(jìn)行。膦酸半酯通常通過將膦酸二酯進(jìn)行堿性水解而制備。
在R1或R2中具有游離羧酸官能團(tuán)的式I化合物在羧基適當(dāng)活化后，可以用本身已知的方法用伯或仲胺，也可用N-烷基化的羥胺或5-氨基四唑轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的酰胺。
在R1或R2中具有游離醇或胺官能團(tuán)的式I化合物可用活化的羧酸衍生物如酰鹵或酸酐轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的酯或酰胺。相應(yīng)的酯或酰胺也可從N-保護(hù)的氨基酸得到。在此情況下，由肽化學(xué)已知的方法有利地用于活化氨基酸成分，例如，羥基苯并三唑/二環(huán)己基碳二亞胺法(W.Kning，R.Geiger，Chem.Ber，103(1970)，2034-2040)或用丙基膦酸酐(PPA)活化，也可以用氯代烴，如二甲基甲酰胺，作為溶劑(除脂族和環(huán)狀醚之外)。叔胺，如三乙胺，N-乙基嗎啉或吡啶優(yōu)選作為輔助的堿。反應(yīng)在-10℃至+50℃，優(yōu)選在0℃至+20℃的溫度范圍進(jìn)行。
至于以被保護(hù)的形式存在的?；苌镄枰獮橛坞x的氨基官能團(tuán)或羧酸官能團(tuán)形式，相應(yīng)的保護(hù)基可以通過已在上面敘述的方法單個(gè)或一起除去。
除此之外，在R1或R2中具有游離醇或胺官能團(tuán)的式I化合物可通過加入適當(dāng)取代的異氰酸酯轉(zhuǎn)化為脲烷衍生物或脲衍生物。與異氰酸酯加入有關(guān)，或作為附加官能團(tuán)被引入的酯基可如上所述被轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的羧酸。
具有游離伯或仲醇官能團(tuán)的化合物可以簡(jiǎn)單地通過稱為“Swern氧化”的方法，用二甲基砜和草酰氯氧化為相應(yīng)的醛或酮。在此情況下，副反應(yīng)如苯酚環(huán)的氧化或2-異噁唑啉環(huán)的氧化降解可通過在低溫適當(dāng)?shù)剡M(jìn)行反應(yīng)而避免。這樣得到的羰基化合物可用堿和CH-酸性化合物，如二烷基膦?；宜嵬榛セ蛩耐榛鶃喖谆⑺狨ィM(jìn)行縮合而轉(zhuǎn)化為相應(yīng)取代的反應(yīng)烯烴。
至于以非對(duì)映異構(gòu)或?qū)τ钞悩?gòu)形式存在的式I化合物，和它們?cè)谶x擇合成中的混合物，它們拆分為純立體異構(gòu)體既可通過在手性或非手性載體上層析的手段，對(duì)于式I的外消旋化合物也可以通過將光學(xué)活性的堿或酸作為輔助物質(zhì)形成的非對(duì)映異構(gòu)鹽分級(jí)結(jié)晶實(shí)現(xiàn)。通過薄層色譜或柱色譜拆分一般以外消旋形式存在的，在5-位具有不對(duì)稱(原子的)-異噁唑啉的對(duì)映異構(gòu)體的合適手性固定相的例子有修飾的硅膠載體(所謂Piclkle相)以及高分子碳水化物，例如三乙酰基纖維素。適當(dāng)衍生后，如本專業(yè)技術(shù)人員已知的，在手性固定相上的氣相色譜法也可用于分析的目的。為了拆分外消旋羧酸，膦酸和次膦酸的對(duì)映異構(gòu)體，不同溶解性的非對(duì)映異構(gòu)體鹽用一般可購(gòu)得的光學(xué)活性的堿，例如，(-)-煙堿，(+)-和(-)-苯基乙胺，奎林堿，L-賴氨酸或L-和D-精氨酸形成，較難的成分作為固體被分離，較易溶的非對(duì)映異構(gòu)體被從母液分出，純的對(duì)映異構(gòu)體被從以這種方式得到的非對(duì)映異構(gòu)體鹽中分離。
含有堿基如氨基的式I的外消旋化合物可以用原理相同的方式，用光學(xué)活性的酸如(+)-樟腦-10-磺酸，D-和L-酒石酸，D-和L-乳酸或(+)和(-)扁桃酸轉(zhuǎn)化為純對(duì)映異構(gòu)體。含有醇或胺官能團(tuán)的手性化合物也可用適當(dāng)活化或非強(qiáng)制性N-保護(hù)的對(duì)映異構(gòu)純的氨基酸轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的酯或酰胺，或相反地，手性羧酸可用羧基保護(hù)的對(duì)映異構(gòu)純的氨基酸轉(zhuǎn)化為酰胺，或用對(duì)映異構(gòu)純的羥基羧酸如乳酸轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的手性酯。引入對(duì)映異構(gòu)純形式中的氨基酸殘基或醇基然后可用于析分異構(gòu)體，通過結(jié)晶或在合適固定相上層析拆分現(xiàn)在為非對(duì)映異構(gòu)體的異構(gòu)體，然后用合適的方法再次消除帶有的手性分子部分。
本發(fā)明也涉及藥物，其特征在于至少一種式I化合物和/或式I化合物的立體異構(gòu)形式和/或式I化合物的生理耐受鹽的有效成份，加上藥用和生理耐受的賦形劑，佐劑和/或活性化合物和輔助物質(zhì)。根據(jù)本發(fā)明的藥物可靜脈內(nèi)，腸胃外，局部，直腸或口服給藥。
根據(jù)本發(fā)明的藥物優(yōu)選地適于預(yù)防和/或治療氣喘病，炎癥和自身免疫疾病。
這些包括，例如，肌肉，關(guān)節(jié)或胃腸道的急性和慢性炎癥，變應(yīng)性呼吸道疾病，牛皮癬或自身免疫病，例如周身紅斑狼瘡(SLE)，II型糖尿病，重癥肌無力，Sjgren’s綜合癥、皮膚肌炎，硬皮病或多發(fā)性硬化(MS)。
本發(fā)明也涉及制備本發(fā)明藥物的方法，其中至少一種式I化合物與藥用和生理耐受的賦形劑，和如果合適，進(jìn)一步有合適的活性化合物，佐劑或輔助物質(zhì)一起被制成給藥的合適形式。
制劑合適的固體或液體藥物形式的例子有粒劑，粉劑，包衣片劑，片劑，(微)膠囊，栓劑，糖漿，液汁，懸浮液，乳劑，滴劑或注射液以及緩釋活性化合物的制劑，在形成的制劑中，常用佐劑，如載體物質(zhì)，崩解劑，粘接劑，包衣劑，膨脹劑，滑動(dòng)劑，潤(rùn)滑劑，調(diào)味劑，甜味劑和增溶劑被使用?？杀惶岬降某Ｓ幂o助物質(zhì)的例子有碳酸鎂，二氧化鈦，乳糖，甘露糖醇和其它糖，滑石，牛奶蛋白，明膠，淀粉，纖維素及其衍生物，動(dòng)物和植物油，如鱈魚肝油，葵花籽油，花生油或芝麻油，聚乙二醇和溶劑，例如，滅菌水和一元或多元醇，例如甘油。
藥物制劑被優(yōu)選地以劑量單位制備并給藥，每單位含有規(guī)定劑量的本發(fā)明式I化合物作為活性成份。在固體劑量單位的情況中，如片劑，膠囊劑，包衣片劑或栓劑，該劑量可高達(dá)約1000mg，然而優(yōu)選地，約50至300mg，而在以安瓿形式的溶液的情況中，高達(dá)約300mg，然而，優(yōu)選地約10至100mg。
依據(jù)式I化合物在人和動(dòng)物中的活性，約50至3000mg活性化合物，在口服給藥的情況下，日劑量?jī)?yōu)選地約150至1000mg，在靜脈內(nèi)給藥的情況下，約50至1000mg，優(yōu)選約100至300mg，日劑量被定為治療體重約70kg的成年害者。然而，有時(shí)也適于更高或更低日劑量給藥。日劑量既可以單劑量單位形式也可以幾個(gè)較小劑量單位，或在固定的間隔給予再分的劑量。最后，式I化合物和/或(如果合適)其生理耐受鹽也可被配制，當(dāng)制備上述藥物給藥形式時(shí)，與其它合適活性化合物，例如血流促進(jìn)物質(zhì)，血小板凝聚抑制劑，血小板聚集抑制劑，鈣拮抗劑，抗血小板劑，抗高血脂劑，神經(jīng)保護(hù)劑，止痛劑，鎮(zhèn)靜劑，抗抑郁劑，抗炎劑，抗咽痛劑，強(qiáng)心劑，抗心律失常劑，利尿劑，抗高血壓劑，包括β-受體阻斷劑和鈣阻斷劑，血漿膨脹劑和其它血管治療劑一起配制。
下述制備實(shí)施例的結(jié)構(gòu)式，與熔點(diǎn)和1H-NMR數(shù)據(jù)一起列于表1中。如果立體異構(gòu)形式存在，相對(duì)構(gòu)型以結(jié)構(gòu)式給出。下列NMR譜的δ值以ppm給出。
實(shí)施例13-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)-5-羥甲基-2-異噁唑啉a)3-(4-羥基-3，5-二叔丁基)苯甲醛肟該肟用文獻(xiàn)(Houben-WeylMeth.d.Org.Chem.(Methods ofOrganic Chemistry)，Vel.X/4，pp.55ff)，已知的方法，從3-(4羥基-3，5-二叔丁基)苯甲醛制備。b)與腈氧化物的1，3-二極性環(huán)加成將24.9g(0.1mol)在a)中制備的醛肟溶于250ml二氨甲烷中，在冷卻下滴加12.0g(0.11mol)次氨酸叔丁酯，一旦滴加完成，混合物在室溫下攪拌45分鐘。加入11.6g(0.2mol)烯丙醇之后，慢慢滴加(6小時(shí)內(nèi))溶于150ml二氯甲烷中的16.7ml(0.12mol)三乙胺。將混合物攪拌過夜，用水，稀檸檬酸，和NaCl溶液洗滌，硫酸鈉干燥并減壓濃縮。通過從甲基叔丁基醚/石油醚結(jié)晶以晶體形式得到產(chǎn)物。產(chǎn)量13.1g在后面表1中所述的實(shí)施例2，5，8，9，10，11，12，13，14，15，16，17，18，19，20，21，22，23，24，25，26，27，28，29，30，31，32，35，44，48，66，67，68，69，78，79和80類似于實(shí)施例1通過就地制備的腈氧化物與相應(yīng)的烯或炔環(huán)加成制備。
在粗產(chǎn)物的情況下，它最初表現(xiàn)為油狀物，硅膠層析，用甲基叔丁基醚/石油醚或乙酸乙酯/石油醚混合物洗脫，并隨后結(jié)晶，也已被證明有價(jià)值。
關(guān)于列于表1中實(shí)施例合成的特色關(guān)于實(shí)施例2)烯結(jié)構(gòu)成份的合成在EP0220573中敘述。
關(guān)于實(shí)施例8)3-乙烯基噻吩CAS No.13679-64-6關(guān)于實(shí)施例11)對(duì)丙烯酸甲酯環(huán)加成。用過量的飽和氨甲醇溶液在室溫下轉(zhuǎn)化為酰胺。
關(guān)于實(shí)施例14)對(duì)N-(3，5-二甲基-4-羥基芐基)異丁烯酰胺(合成描述于DE3820699中)。
關(guān)于實(shí)施例15)屬于非立體選擇性環(huán)加成，產(chǎn)物表現(xiàn)為非對(duì)映異構(gòu)體混合物。
關(guān)于實(shí)施例16和17)與對(duì)丁二烯-氧化物環(huán)加成關(guān)聯(lián)的外消旋赤或/蘇式非對(duì)映體混合物通過硅膠色譜的手段拆分為非對(duì)映異構(gòu)體，用石油醚/乙酸乙酯9∶1洗脫，并隨后結(jié)晶(實(shí)施例16外消旋赤式異構(gòu)體，實(shí)施例17外消旋蘇式異構(gòu)體)。
關(guān)于實(shí)施例18-20)通過對(duì)1-丁烯-3-醇環(huán)加成的外消旋赤式/蘇式非對(duì)映異構(gòu)混合物(實(shí)施例18)通過硅膠色譜拆分為非對(duì)映異構(gòu)體，用石油醚/甲基叔丁基醚5∶1洗脫(實(shí)施例19外消旋赤式異構(gòu)體，實(shí)施例20外消旋蘇式異構(gòu)體)。
關(guān)于實(shí)施例21-22)通過對(duì)1-丁烯-3-醇乙酸酯環(huán)加成的外消旋赤式/蘇式非對(duì)映異構(gòu)體混合物通過硅膠色譜拆分為非對(duì)映異構(gòu)體，用石油醚/乙酸乙酯19∶1洗脫(實(shí)施例21外消旋赤式異構(gòu)體，實(shí)施例22外消旋蘇式異構(gòu)體)。
關(guān)于實(shí)施例23)用丙烯酸叔丁酯進(jìn)行環(huán)加成。叔丁基酯基用三氟乙酸在二氯甲烷中室溫下消去。濃縮后，可以從甲基叔丁基醚/石油醚中結(jié)晶產(chǎn)物。
關(guān)于實(shí)施例35)烯結(jié)構(gòu)成份的合成描述于EP0220573中。
關(guān)于實(shí)施例48)用N-叔丁氧羰基炔丙基胺進(jìn)行環(huán)加成。N-保護(hù)基團(tuán)隨后用三氟乙酸消除?？梢匀宜猁}的晶體形式從甲醇/甲基叔丁基醚得到產(chǎn)物。游離的堿通過用二氯甲烷從稀NaOH水溶液中萃取，并干燥和濃縮有機(jī)層得到。
關(guān)于實(shí)施例78)用6-庚烯-2，4-二醇進(jìn)行環(huán)加成。由NMR譜確定為異構(gòu)純的產(chǎn)物通過用甲基叔丁基醚/石油醚硅膠層析，隨后從上述溶劑重復(fù)結(jié)晶得到。
關(guān)于實(shí)施例79和80)類似于實(shí)施例1)用過量1，6-庚二烯-4-醇進(jìn)行環(huán)加成。通過用石油醚/乙酸乙酯混合物(梯度6∶1-2∶1)硅膠層析的手段拆分為非對(duì)映異構(gòu)體。用NMR譜不可解分辨蘇式/赤式異構(gòu)體。
實(shí)施例32-(3-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)-2-異噁唑啉-5-基甲氧基)甲基丙酸將4.0g(0.095mol)實(shí)施例2的產(chǎn)物溶于80ml甲醇中，加入25ml1N NaOH水溶液；-旦水解完成(用TLC監(jiān)測(cè))，混合物用25ml 1N Hcl酸化。沉淀的產(chǎn)物被過濾，水洗并干燥。產(chǎn)量3.0g實(shí)施例4N-(3-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)-2-異噁唑-5-基甲氧基羰基)甘氨酸a)與異氰酸酯反應(yīng)將5.5g(0.018mol)實(shí)施例1的產(chǎn)物溶于5ml二氨甲烷中，加入3.2g(0.025mol)異氰酸根合乙酸乙酯和約4滴三乙胺，混合物在攪拌下于50-60℃加熱。-旦反應(yīng)完成(用TLC監(jiān)測(cè))，混合物被濃縮并用甲基叔丁基醚/石油醚硅膠層析。產(chǎn)量7.2g油狀產(chǎn)物b)乙基脂的水解7.2ga)的產(chǎn)物，如實(shí)施例3)中所述，用過量的1N NaOH水解，酸化后，以晶體形式分離。產(chǎn)量4.56g實(shí)施例63-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)-2-異噁唑淋-5-基膦酸5.0g(0.013mol)實(shí)施例5的產(chǎn)物在室溫用約100ml HBr在冰乙酸中的33％溶液處理，直到反應(yīng)完全(用TLC監(jiān)測(cè))。濃縮后殘留物與甲基叔丁基醚充分?jǐn)嚢?。產(chǎn)量3.15g。
實(shí)施例73-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)-2-異噁唑啉-5-基膦酸甲基酯5.0g(0.013mol)實(shí)施例5的產(chǎn)物在室溫下被溶于100ml甲醇中。加入30ml 1N NaOH，混合物被攪拌15小時(shí)(用TLC監(jiān)測(cè))。酸化(1NHCl)后，用二氯甲烷萃取，接著用水和飽和氯化鈉溶液洗滌，干燥并濃縮。殘余物從甲基叔丁基醚/石油醚中結(jié)晶。產(chǎn)量3.4g。
實(shí)施例21和22(另一合成)1-(3-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)-2-異噁唑啉-5-基)乙基乙酸酯(分別為赤式或蘇式異構(gòu)物)將2.5g(0.008mol)實(shí)施例19或20的產(chǎn)物溶于100ml二氯甲烷和6ml吡啶中。加入125mg 4-二甲基氨基吡啶后，在冰冷卻下滴加溶于10ml二氯甲烷中的1.35ml(0.024mol)乙酰氯；一旦反應(yīng)完成(用TLC監(jiān)測(cè))，將混合物用水，硫酸氫鉀水溶液和水洗滌，干燥并濃縮。殘留的油狀物從甲基叔丁基醚/石油醚結(jié)晶。
實(shí)施例33(1-(3-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)異噁唑-5-基)-1-甲基乙氧基)乙酸乙酯在保護(hù)性氣體中，冰冷卻下，溶于40ml無水二甲基甲酰胺中的10.0g(0.03mol)實(shí)施例29的產(chǎn)物被滴加到1.06g(0.044mol)氫化鈉在30ml無水二甲基甲酰胺中的懸浮液中。在沒有冷卻下經(jīng)另30分鐘后，溶于30ml無水二甲基甲酰胺中的10.8g(0.044mol)溴代乙酸乙酯被滴加到混合物中，混合物然后被再攪拌4小時(shí)。反應(yīng)混合物然后被倒入冰中，用乙酸乙酯萃取。水洗，干燥并濃縮。油狀殘余物從石油醚結(jié)晶。產(chǎn)率6.8g。
實(shí)施例34(1-(3-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)異噁唑-5-基)1-甲基乙氧基)乙酸3.7g(0.009mol)實(shí)施例33的產(chǎn)物類似實(shí)施例3水解。產(chǎn)量2.9g。
實(shí)施例362-(3-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)異噁唑-5-基甲氧基)2-甲基丙酸9.5g(0.023mol)實(shí)施例35的產(chǎn)物類似于實(shí)施例3水解。產(chǎn)量6.6g。
實(shí)施例37N-甲基異羥肟?；?2-((3-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)異噁唑-5-基甲氧基)2-甲基丙酸酯4.0g(0.01mol)實(shí)施例36的產(chǎn)物類似于文獻(xiàn)(EP0199151)的方法，用草酰氯和N-甲基羥胺衍生。產(chǎn)物從甲基叔丁基醚結(jié)晶。產(chǎn)量2.7g。
實(shí)施例382-(3-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)異噁唑-5-基甲氧基)N-(1H-四唑-5-基)異丁酰胺6.0g(0.015mol)實(shí)施例36的產(chǎn)物類似于文獻(xiàn)(J.Org.Chem.，34(1969)、2766-2767)的方法用1.7ml(0.015mol)四氯化硅和無水吡啶中的1.25g(0.015mol)5-氨基四唑衍生。產(chǎn)物從甲基叔丁基醚/石油醚結(jié)晶。產(chǎn)量3.9g。
實(shí)施例39N-(3-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)異噁唑-5-基甲氧碳基)甘氨酸乙酯14.0g(0.046mol)實(shí)施例24的產(chǎn)物類似于實(shí)施例4a)反應(yīng)。殘留的油狀物用甲基叔丁基醚/石油醚1∶4硅膠層析純化。產(chǎn)量16.4g。
實(shí)施例40N-(3-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)異噁唑-5-基甲氧羰基)甘氨酸7.1g(0.06mol)實(shí)施例39的產(chǎn)物類似于實(shí)施例3水解。產(chǎn)率4.1g。
實(shí)施例41N-(3-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)異噁唑-5-基丙氧羰基)甘氨酸乙酯8.0g(0.024mol)實(shí)施例26的產(chǎn)物類似于實(shí)施例4a)反應(yīng)。殘留油狀物從甲基叔丁基醚/石油醚結(jié)晶純化。產(chǎn)量6.1g。
實(shí)施例42N-(3-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)異噁唑-5-基丙氧羰基)甘氨酸4.0g(0.0089mol)實(shí)施例41的產(chǎn)物類似實(shí)施例3水解。產(chǎn)量2.8g。
實(shí)施例43N-(2-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)異噁唑-5-基乙氧羰基)甘氨酸6.25g實(shí)施例25的產(chǎn)物類似于實(shí)施例4a)反應(yīng)。殘留的產(chǎn)物類似于實(shí)施例3水解，并用甲基叔丁基醚硅膠層析，并最終從甲基叔丁基醚/石油醚結(jié)晶純化。產(chǎn)量3.8g。
實(shí)施例453-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)異噁唑-5-基丙酸4.3g(0.011mol)實(shí)施例44的產(chǎn)物被類似于實(shí)施例3水解。產(chǎn)重3.0g。
實(shí)施例463-(3-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)異噁唑-5-基)N-(1H-四唑-5-基)丙酰胺7.0g(0.02mol)實(shí)施例45的產(chǎn)物用四氯化硅和無水吡啶中的5-氨基四唑類似于實(shí)施例38衍生。產(chǎn)物從甲基叔丁基醚/石油醚結(jié)晶。產(chǎn)率6.5g。
實(shí)施例473-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)異噁唑-5-基丙烯酸a)Swern氧化形成醛在-60℃和保護(hù)性氣體中，將25.4g(0.2mol)草酰氯首先引入250ml無水二氯甲烷中，然后滴加溶于20ml無水二氯甲烷中的31.2ml(0.044mol)二甲亞砜。30分鐘后，在-50℃和45分鐘內(nèi)，滴加溶于200ml無水二氯甲烷/20ml二甲基甲酰胺中的30.3g(0.1mol)實(shí)施例2 4的產(chǎn)物，混合物隨后攪拌20分鐘。加入5 5.6ml(0.4mol)三乙胺之后，移走冷浴，混合物隨后在室溫?cái)嚢?小時(shí)，用水，稀檸檬酸水溶液和NaCl溶液洗滌，干燥并濃縮。殘留的油狀物用甲基叔丁基醚/石油醚1∶9硅膠層析，并從石油醚結(jié)晶。產(chǎn)量16.4g。b)烯化在0℃和保護(hù)性氣體下，將0.77g(0.032mol)氫化鈉首先引入40ml無水四氫呋喃中，然后8滴加溶于50ml無水四氫呋喃中的5.05g(0.024mol)二乙基膦基乙酸甲酯，產(chǎn)生的懸浮液隨后在0℃攪拌1小時(shí)；然后滴加溶于50ml無水四氫呋喃中的4.8g(0.016mol)實(shí)施例47a)的產(chǎn)物，混合物隨后再攪拌2小時(shí)，倒入冰水中，用二氯甲烷萃取幾次，水洗，干燥并濃縮。產(chǎn)物從甲基叔丁基醚/石油醚結(jié)晶。產(chǎn)量4.2g。c)水解3.7g(0.01mol)實(shí)施例47b)的產(chǎn)物類似于實(shí)施例3水解。產(chǎn)量3.3g。
實(shí)施例49N-(3-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)異惡唑-5-基甲基)三氟甲磺酰胺在冰冷卻下，溶于50ml無水二氯甲烷中的3.6g(0.012mol)實(shí)施例48產(chǎn)物的堿形式被首先引入，隨后加入3.95g(0.014mol)三氟甲磺酸酐，和2.2ml(0.017mol)N-乙基嗎啉；混合物隨后攪拌過夜，用水，稀檸檬酸水溶液和NaCl溶液洗滌，干燥并濃縮。殘留的油狀物用甲基叔丁基醚/石油醚3∶1硅膠層析，并從甲基叔丁基醚/石油醚結(jié)晶純化。產(chǎn)量2.1g。
實(shí)施例50N-(3-(4-羥基-3，5二叔丁基苯基)異惡唑-5-基甲基)氨基草酸乙酯在冰冷卻下，9.1g(0.03mol)實(shí)施例48的產(chǎn)物的堿形式，在無水四氫呋喃中，與3.9ml(0.035mol)(氯代甲酰基)甲酸乙酯和9.7ml(0.07mol)三乙胺以類似于文獻(xiàn)(J.Med.Chem.，34(1991)，600)的方法?；＜尤氡?，用乙酸乙酯萃取，用水，稀檸檬酸水溶液和NaCl溶液洗滌，接著干燥并濃縮。殘留的油狀物從甲基叔丁基醚/石油醚結(jié)晶。產(chǎn)量9.1g。
實(shí)施例51N-(3-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)異惡唑-5-基甲基)氨基草酸5.0g(0.012mol)實(shí)施例50的產(chǎn)物類似于實(shí)施例4b)水解。表現(xiàn)為油狀物的產(chǎn)物通過用二氯甲烷萃取，用水和NaCl溶液洗滌，干燥并濃縮分離。殘留的非晶狀產(chǎn)物從甲基叔丁基醚/石油醚結(jié)晶。產(chǎn)量3.4g。
實(shí)施例525-甲基異惡唑-4-甲酸(3-4-羥基-3，4-二叔丁基苯基)異惡唑-5-基甲基)酰胺在冰冷卻下，5.0g(0.0165mol)實(shí)施例48產(chǎn)物的堿形式與2.2ml(0.017mol)N-乙基嗎啉首先引入80ml無水四氫呋喃中，然后滴加溶于10ml四氫呋喃中的2.5g(0.017mol)5-甲基異噻唑-3-基甲酰氯；混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)。加入冰水并用二氯甲烷萃取后，用水，稀檸檬酸水溶液和NaCl溶液洗滌，接著干燥并濃縮。得到的油狀物用甲基叔丁基醚/石油醚1∶1硅膠層析純化并從石油醚結(jié)晶。產(chǎn)量4.9g。
實(shí)施例532-氰基3-羥基丁-2-烯甲酸(3-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)異噁唑-5-基甲基)酰胺將4.0g(0.01mol)實(shí)施例52的產(chǎn)物溶于50ml無水四氫呋喃中，在冰冷卻下加入20ml 1N NaOH；一旦反應(yīng)完成(由TLC監(jiān)測(cè))，混合物用22ml 1N Hcl酸化，用二氯甲烷萃?。唤又礈?，干燥并濃縮。殘留物從甲基叔丁基醚/石油醚結(jié)晶。產(chǎn)量3.3g。
實(shí)施例54(3-(3-(4-羥基3，5-二叔丁基苯基)異噁唑-5-基甲基)脲基)乙酸乙酯在50-60℃，攪拌下，14.2g(0.047mol)實(shí)施例48產(chǎn)物的堿形式與6.5g(0.05mol)異氰酸根合乙酸乙酯一起加熱。一旦反應(yīng)完成(用TLC監(jiān)測(cè))，混合物被濃縮，并從甲基叔丁基醚/石油醚結(jié)晶。產(chǎn)量11.3g。
實(shí)施例55L-苯丙氨酰基-N-(3-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)異噁唑-5-基甲基)酰胺鹽酸鹽a)用N-叔丁氧羰基苯丙氨酸酰化將5.3g(0.02mol)N-叔丁氧羰基苯丙氨酸溶于100ml無水四氫呋喃中，加入4.5g(0.022mol)二環(huán)己基碳二亞胺和3.1g(0.02mol)1-羥基苯并三唑水合物，混合物被攪拌約45分鐘。將沉淀出的脲濾出。加入2.3ml(0.018mmol)N-乙基嗎啉后，滴加溶于50ml四氫呋喃中的6.25g(0.015mol)實(shí)施例48的產(chǎn)物。4小時(shí)后，加入乙酸乙酯，用0.1N HCl和飽和NaCl溶液洗滌，干燥并濃縮。粗產(chǎn)物通過硅膠色譜(甲基叔丁基醚)進(jìn)一步純化。產(chǎn)量8.9g N-叔丁氧羰基保護(hù)的產(chǎn)物油狀物。b)消除保護(hù)基通過用二氯甲烷(150ml)中的三氟乙酸(25ml)處理，濃縮并蒸發(fā)幾次，加入乙醚中的鹽酸后，接著與石油醚充分?jǐn)嚢瑁Ｗo(hù)基，并轉(zhuǎn)化為鹽酸鹽。產(chǎn)量6.3g非晶狀鹽酸鹽。
實(shí)施例56(3-(3-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)異噁唑-5-基甲基)脲基)乙酸6.5g(0.015mol)實(shí)施例54的產(chǎn)物類似于實(shí)施例3水解。產(chǎn)量5.7g實(shí)施例572-(3-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)異噁唑-5-基)乙烯基膦酸二乙酯反應(yīng)在無水四氫呋喃中，以文獻(xiàn)(J.Med.Chem.，32(1989)，2171)的方法，從6.4g(0.021mol)實(shí)施例47a)的產(chǎn)物，6.25ml(0.025mol)四乙基亞甲基二膦酸酯和9.6ml(0.024mol).5M丁基鋰溶液進(jìn)行。反應(yīng)完成后，反應(yīng)混合物被倒入冰水中，用二氯甲烷萃取幾次；水洗，干燥并濃縮。產(chǎn)物從甲基叔丁基醚/石油醚結(jié)晶。產(chǎn)量7.9g。
實(shí)施例582-(3-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)異噁唑-5-基)乙烯基膦酸在保護(hù)性氣體和室溫下，將4.0g(0.009mol)實(shí)施例57的產(chǎn)物在300ml無水二氯甲烷中與3.9ml(0.03mol)三甲基溴代甲硅烷一起攪拌，直至反應(yīng)完成(由TLC監(jiān)測(cè))。加入0.5ml水之后，混合物被濃縮；剩余物在甲醇中處理幾次并減壓濃縮。油狀物與甲基叔丁基醚攪拌直至保留晶狀殘?jiān)?。產(chǎn)量3.0g。
實(shí)施例593-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)-5-乙?；悋f唑5.0g(0.016mol)實(shí)施例28的產(chǎn)物類似于實(shí)施例47a)進(jìn)行Swern氧化。產(chǎn)量3.88g。
實(shí)施例603-(4-吡啶基)-5-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)-2-異噁唑啉a)2，6-二叔丁基-4-乙烯基苯酚烯的合成是已知的(P.Grosso，O.VoglJ.Macromol.Sci.Chem.，A23(1986)，1041-1056)。b)作為腈氧化物前體的異羥肟酰氯4-吡啶基異羥肟酰氯以類似于文獻(xiàn)的方法(Bull.Soc.Chim.France(1962)，2215)通過將吡啶-4-甲醛肟氯化制備。c)環(huán)加成11.6g(0.05mol)a)的產(chǎn)物和9.7g(0.05mol)實(shí)施例60b)的產(chǎn)物被首先引入500ml二氯甲烷中，然后在6小時(shí)內(nèi)滴加溶于200ml二氯甲烷中的20.9ml(0.15mol)三乙胺。如實(shí)施例1處理。產(chǎn)量13.1g。
實(shí)施例613-(2-噻唑基)-5-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)2-異噁唑啉5g(0.039mol)2-噻唑基甲醛肟(制備A.Dondoni，Synthesis(1987)，998-1001)如實(shí)施例1所述，用次氯酸叔丁酯在二氯甲烷/二甲基甲酰胺(1∶1)中氯化，然后加入16.3g(0.07mol)實(shí)施例60a)的烯，并根據(jù)實(shí)施例1進(jìn)行環(huán)加成。殘留的油用甲基叔丁基醚/石油醚1∶2硅膠層析并從甲醇/少量水結(jié)晶純化。產(chǎn)量6.4g。
實(shí)施例623-羧基-5-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)-2-異惡唑啉a)作為腈氧化物前體的異羥肟酰氯氯氧亞氨基乙酸乙酯通過文獻(xiàn)(G.S.Skinner，J.Am.Chem.Soc.，46(1924)，731)的方法從甘氨酸乙酯制備。b)用乙氧羰基腈氧化物環(huán)加成將溶于80ml二氯甲烷中的4.55g(0.03mol)實(shí)施例62a)的產(chǎn)物在6小時(shí)內(nèi)滴加到4.65g(0.02mol)實(shí)施例60a)的烯和5.6ml(0.04mol)三乙胺在100ml二氯甲烷中的溶液中。根據(jù)實(shí)施例1處理。產(chǎn)量4.8g。c)乙酯的水解類似于實(shí)施例3進(jìn)行水解和處理。從實(shí)施例62b)的6.0g(0.017mol)產(chǎn)物得到3.55g晶狀羧酸。
對(duì)于下面實(shí)施例63和65的環(huán)加成步驟，硝基丁酸結(jié)構(gòu)成份以Mukaiyama方法的變種(J.Am.Chem.Soc.，82(1960)，5339-5342)用異氰酸酯脫水。從丙烯酸衍生物和硝基甲烷進(jìn)行的合成途徑對(duì)不能以商品得到的衍生物和下面硝基丁酸叔丁酯所述的衍生物是代表性的。當(dāng)相應(yīng)的取代的乙烯基膦酸酯和乙烯基膦酸被使用時(shí)，此方法也可用于4-硝基丙基次膦酸和4-硝基丙基膦酸的衍生物。
實(shí)施例635-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)-2-異噁唑啉-3-基丙酸a)硝基丁酸叔丁酯在浴溫70℃下，將537ml(3.7mol)丙烯酸叔丁酯被滴加到首先引入的2.0l硝基甲烷和7ml1.8-二氮雜雙環(huán)〔5.4.0〕十一碳-7-烯(DBU)的溶液中，由于痕量丙烯酸而可能下降的pH通過加入適量DBU保持不變。放熱反應(yīng)被停止后(上升到90℃)，混合物被冷卻60分鐘，然后用稀鹽酸和水洗滌幾次，干燥并減壓濃縮，殘留的660g淺紅棕色油狀物通過蒸餾(bp590℃)進(jìn)一步純化。
下列硝基化合物用相同途徑制備3-硝基丙基膦酸的二甲基和二乙基酯(從乙烯基膦酸酯進(jìn)行)，3-硝基丙基-P-甲基次膦酸乙酯(乙烯基-P-甲基次膦酸乙酯進(jìn)行)。b)環(huán)加成在50℃下，7.0g(0.03mol)實(shí)施例60a)的烯首先引入帶有0.5ml三乙胺和6.4g(0.04mol)二異氰酸亞苯基酯的80ml甲笨中。7.6g(0.04mol)在a)中所述的4-硝基丁酸叔丁酯，和0.2ml三乙胺被溶于80ml甲苯中，并在5小時(shí)內(nèi)滴加?；旌衔镌谑覝?cái)嚢柽^夜；沉淀出的脲然后抽濾出來，并用二氯甲烷洗滌。濃縮后，保留的油狀粗產(chǎn)物通過硅膠色譜(洗脫劑石油醚/甲基叔丁基醚混合物)純化。c)消除羧基保護(hù)基5g(0.012mol)b)的產(chǎn)物在室溫下在80ml二氯甲烷中用20ml三氟乙酸處理，直至反應(yīng)完全(約3小時(shí))。濃縮后，剩余物與甲基叔丁基醚充分?jǐn)嚢?，得?.6g晶狀產(chǎn)物。
實(shí)施例645-(4-羥基-3，5二叔丁基)苯基-2-異噁唑啉-3-丙酸N-(1H-四唑-5基)酰胺5.0g(0.15mol)實(shí)施例63的產(chǎn)物根據(jù)實(shí)施例38，用四氯化硅和5-氨基四唑在無水吡啶中衍生。產(chǎn)物從甲基叔丁基醚/石油醚結(jié)晶。產(chǎn)量3.5g。
實(shí)施例65(2-(5-(4羥基3，5-二叔丁基苯基)-2-異噁唑啉-3-基)乙基)甲基次膦酸環(huán)化根據(jù)實(shí)施例63，從3-硝基丙基-P-甲基次膦酸乙酯進(jìn)行。次膦酸酯基根據(jù)實(shí)施例7在堿性條件下裂解。
實(shí)施例70L-苯丙氨酸-1-(3-(4羥基-3，5-二叔丁基苯基)異噁唑-5-基)乙基酯鹽酸鹽a)用N-叔丁氧羰基苯丙氨酸?；瘜?.65g(0.01mol)N-叔丁氧羰基苯丙氨酸溶于50ml無水四氫呋喃中，然后加入1.53g(0.01mol)1-羥基苯并三唑水合物和2.27g(0.011mol)二環(huán)己基碳二亞胺，混合物被攪拌約45分鐘。加入0.12g 4-二甲基氨基吡啶之后，溶于25ml四氫呋喃中的3.17g(0.01mol)實(shí)施例2g的產(chǎn)物被滴加。再過2小時(shí)后，如下處理加入乙酸乙酯，用0.1N NaOH，0.1N HCl和飽和NaCl溶液洗滌，干燥并濃縮。粗產(chǎn)物通過硅膠色譜(石油醚/甲基叔丁基醚5∶1)進(jìn)一步純化。產(chǎn)量3.15g N-叔丁氧羰基保護(hù)的產(chǎn)物。b)消除保護(hù)基通過用三乙酸(10ml)在二氯甲烷(50ml)中消除保護(hù)基，并轉(zhuǎn)化為鹽酸鹽，濃縮，蒸發(fā)幾次，加入乙醚中的Hcl后，接著與甲基叔丁基醚/石油醚充分?jǐn)嚢?。產(chǎn)量2.2g。
實(shí)施例71和72L-苯丙氨酸-1-(3-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)異噁唑-5-基)乙基酯鹽酸鹽a)消除保護(hù)基3.0g實(shí)施例70a)的產(chǎn)物用三氟乙酸(類似于實(shí)施例70b)處理。產(chǎn)量2.8g粗產(chǎn)物。b)拆分異構(gòu)體粗產(chǎn)物通過在1％三乙胺存在下用二氯甲烷/甲基叔丁基醚1∶10硅膠層析幾次拆分為非對(duì)映異構(gòu)體。產(chǎn)量在各種情況下0.70.8g油狀產(chǎn)物，下面指定為異構(gòu)體A(較高Rf值)和B(較低Rf值)。由HPLC測(cè)定的純度在各種情況下大于95％。兩種異構(gòu)體都如實(shí)施例70b)所述轉(zhuǎn)化為鹽酸鹽?？梢詮亩燃淄?甲基叔丁基醚結(jié)晶各種異構(gòu)體。實(shí)施例71(異構(gòu)體A)〔α〕D20＝+56.1°(C＝1，乙醇溶液)實(shí)施例72(異構(gòu)體B)〔α〕D20＝-30.8°(C＝1，乙醇溶液)實(shí)施例73L-苯丙氨酸-1-(3-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)2-異惡唑啉-5-基)乙基酯鹽酸鹽a)用N-叔丁氧羰基苯丙氨酸?；铣筛鶕?jù)實(shí)施例70a)從3.2g(0.01mol)實(shí)施例19的產(chǎn)物(外消旋赤或異構(gòu)體)進(jìn)行。產(chǎn)量3.5g N-叔丁氧羰基苯丙氨酸保護(hù)的產(chǎn)物。b)消除保護(hù)基保護(hù)基類似于實(shí)施例70b)裂解。產(chǎn)量2.6g異構(gòu)體混合物(歸結(jié)為外消旋異惡唑啉的使用)。
實(shí)施例74和75L-苯丙氨酸-1-(3-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)異惡唑啉-5-基)乙基酯鹽酸鹽a)拆分異構(gòu)體2.5g實(shí)施例73a)的產(chǎn)物通過用石油醚/甲基叔丁基醚5∶1重復(fù)大干膠層析拆分為非對(duì)映異構(gòu)體。產(chǎn)量在各種情況下，0.6-0.7g油狀產(chǎn)物，下面指定為異構(gòu)體A(較高Rf值)和B(較低Rf值)。由HPLC測(cè)定的純度在各種情況大于95％。b)消除保護(hù)基兩種異構(gòu)體如實(shí)施例70b)所述消除保護(hù)基并轉(zhuǎn)化為鹽酸鹽。實(shí)施例74(異構(gòu)體A)〔α〕D20＝+31.6°(C＝1，乙醇溶液)實(shí)施例75(異構(gòu)體B)〔α〕D20＝-59.7°(C＝1，乙醇溶液)實(shí)施例76甘氨酸-1-(3-(4羥基-3，5-二叔丁基苯基)異惡唑-5-基)乙基酯鹽酸鹽合成根據(jù)實(shí)施例70，從2.1g(0.012mol)N-BOC-甘氨酸和3.2g(0.01mol)實(shí)施例28的產(chǎn)物進(jìn)行。消除保護(hù)基并轉(zhuǎn)化為鹽酸鹽之后，從甲基叔丁基醚/石油醚得到無定形固體產(chǎn)物。產(chǎn)量2.6g實(shí)施例77甘氨酸-1-(3-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)-2-異惡唑啉-5-基)乙基酯鹽酸鹽合成根據(jù)實(shí)施例70，從2.1g(0.012mol)N-BOC-甘氨酸和3.2g(0.01mol)實(shí)施例19的產(chǎn)物(外消旋赤或異構(gòu)體)進(jìn)行。消除保護(hù)基并轉(zhuǎn)化為鹽酸鹽后，從甲基叔下基醚/石油醚得到無定形固體產(chǎn)物。產(chǎn)量2.3g。
實(shí)施例811-(3-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)-2-異惡唑啉-5-基)乙基十六烷酸酯(赤或異構(gòu)體)將3.2g(0.01mol)實(shí)施例19的產(chǎn)物溶于60ml四氫呋喃。加入125mg 4-二甲基氨基吡啶和3.05ml(0.024mol)N-乙基嗎啉后，在冰冷卻下滴加溶于30ml四氫呋喃中的5.5g(0.02mol)十六烷酰氯；反應(yīng)完成后(用TLC監(jiān)測(cè))，將混合物用水，硫酸氫鉀水溶液和水洗滌，干燥并濃縮。殘留的油狀物用石油醚/甲基叔丁基醚硅膠色譜純化。產(chǎn)量1.9g實(shí)施例82二-O-乙?；?L-酒石酸-N-(3-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)異惡唑-5-基)甲基酰胺4.2g(0.01mol)實(shí)施例48的產(chǎn)物與0.12g 4-二甲基氨基吡啶和4.5ml(0.035mol)N-乙基嗎啉一起首先引入250ml四氫呋喃中，在室溫和攪拌下，0.5小時(shí)內(nèi)滴加溶于60ml四氫呋喃中的3.3g(0.015mol)(+)-二-O-乙?；?L-酒石酸酐。室溫下再過4小時(shí)后，加入50ml 1N Hcl，500ml水和500ml乙酸乙酯；相分離后，用水和飽和NaCl溶液洗滌后，接著干燥并濃縮。剩余物用甲基叔丁基醚硅膠層析，隨后從甲基叔丁基醚/石油醚結(jié)晶。產(chǎn)量4.9g〔α〕D20＝-1.4°(C＝1，乙醇溶液)實(shí)施例83N-〔(3-(4-羥基-3，5二叔丁基苯基)異惡唑-5-基)甲基〕-L酒石酸酰胺將1.56g(0.03mol)實(shí)施例82的產(chǎn)物溶于200ml甲醇中，加入0.84g(0.06mol)磨細(xì)的碳酸鉀?；旌衔锉粩嚢柽^夜，用檸檬酸水溶液酸化，用乙酸乙酯萃取幾次。干燥并蒸發(fā)濃縮后保留的油狀物被結(jié)晶。產(chǎn)量1.25g〔α〕D20＝+21.5°(C＝1，乙醇溶液)實(shí)施例841-(3-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)-2-異惡唑啉-5-基)乙基3-氧代丁酸酯在冰冷卻下，1.6g實(shí)施例19的產(chǎn)物與約15mg 4-二甲基氨基吡啶一起溶于80ml無水四氫呋喃中，并滴加溶于15ml四氫呋喃中的0.46ml(0.006mol)雙烯酮。1小時(shí)后，將冰浴拿走，混合物在室溫下攪拌過夜。混合物濃縮后，剩余物在水/乙酸乙酯中處理，有機(jī)相被干燥并濃縮。之后，從甲基叔丁基醚/石油醚結(jié)晶。產(chǎn)量1.05g淺黃色晶體。
實(shí)施例851-(3-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)-2-異惡唑啉-5-基)磷酸二苯基酯3.2g(0.01mol)實(shí)施例19的產(chǎn)物與0.12g 4-二甲基氨基吡啶和1.4ml(11mmol)N-乙基嗎啉一起溶于60ml無水四氫呋喃中，在室溫滴加溶于10ml四氫呋喃中的2.95g(11mmol)氯化磷酸二苯基酯。4小時(shí)后，加入檸檬酸水溶液和乙酸乙酯，有機(jī)相被干燥并濃縮，剩余物被結(jié)晶。產(chǎn)量4.7g晶狀產(chǎn)物。
實(shí)施例86和871-(3-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)-2-異惡唑啉-5-基)乙基4-(4-嗎啉代)甲基苯甲酸酯鹽酸鹽，86赤式和87蘇式異構(gòu)體a)4-氯甲基苯甲?；?3-烯-2-基酯7.2 g(0.1mol)外消旋1-丁烯-3-醇與20.5g(0.108mol)4-氯甲基苯甲酰氯，14g(0.11mol)N-乙基嗎啉和1.2g 4-二甲基氨基吡啶一起在200ml無水四氫呋喃中攪拌24小時(shí)。加入二氯甲烷和檸檬酸水溶液后，相分離，有機(jī)相用水洗，干燥并濃縮。用石油醚浸提，小星沉淀的固體通過過濾除去。濃縮后，產(chǎn)物被分離為油狀物。b)反應(yīng)類似于實(shí)施例1)，從7.5g(0.03mol)醛肟和7.6g(0.034mol)實(shí)施例86a)的產(chǎn)物進(jìn)行。開始為油狀物的粗產(chǎn)物通過硅膠色譜(石油醚/乙酸乙酯9∶1)進(jìn)一步純化。產(chǎn)量3.7g外消旋赤式/蘇式異構(gòu)體混合物。c)與嗎啉反應(yīng)將3.6g(7.6mmol)b)的產(chǎn)物溶于丙酮，加入1.3ml(0.015mol)嗎啉和0.27g(1.6mmol)碘化鉀，混合物在室溫?cái)嚢?天。濃縮后，殘余物溶于水/乙酸乙酯中，有機(jī)相用水洗，干燥并濃縮。4g產(chǎn)物保持為非對(duì)映異構(gòu)體混合物(異構(gòu)體比約為60∶40)。d)異構(gòu)體拆分將c)的粗產(chǎn)物溶于約200ml甲基叔丁基醚中，并加入8ml 5摩爾乙醇性鹽酸和約30ml二氯甲烷。沉淀的鹽酸鹽被分離并從異丙醇結(jié)晶，赤式非對(duì)映異構(gòu)體首先結(jié)晶出來；此非對(duì)映異構(gòu)體然后通過從異丙醇再結(jié)晶富集為非對(duì)映異構(gòu)體比＞95∶5。產(chǎn)量0.75g。
也可以通過重復(fù)結(jié)晶從聚集的母液分離為蘇式非對(duì)映異構(gòu)體。
實(shí)施例88L-酪氨酸基1-(3-(3，5-二叔丁基-4-羥基苯基)-2-異噁唑啉-5-基)乙基酯，外消旋5，5’-赤式異構(gòu)體混合物a)用N，O-二叔丁氧羰基-L-酪氨酸?；瘜?.6g(0.02mol)N，O-二叔丁氧羰基-L-酪氨酸溶于100ml無水四氫呋喃，加入2.7g(0.02mol)1-羥基苯并三唑和4.5g(0.022mol)二環(huán)己基碳二亞胺；混合物然后攪拌約45分鐘，沉淀的脲過濾除去。加入2.3ml(0.018mol)N-乙基嗎啉和0.24g(0.002mol)二甲基氨基吡啶后，滴加溶于80ml四氫呋喃中的4.8g(0.015mol)實(shí)施例19的產(chǎn)物?；旌衔锸覝?cái)嚢?4小時(shí)后，通過加入乙酸乙酯處理，用0.1N NaOH和0.1N HCl和飽和NaCl溶液洗滌，干燥并濃縮。粗產(chǎn)物用硅膠色譜(甲基叔丁基醚/石油醚)進(jìn)一步純化。產(chǎn)量10.5N-叔丁氧羰基保護(hù)的產(chǎn)物油狀物。b)消除保護(hù)基類似于實(shí)施例70b)消除保護(hù)基。堿被釋放后，通過硅膠色譜(甲基叔丁基醚/二氯甲烷/甲醇，10∶9∶1)進(jìn)一步純化。產(chǎn)量1.6g無定形固體。
實(shí)施例893-(3，5-二叔丁基-4-羥基苯基)-5-(1，2-二羥基乙基)-2-并噁唑啉，外消旋赤式異構(gòu)體將2.9g實(shí)施例16的產(chǎn)物溶于50ml二惡烷和10ml水中，然后加入0.75ml 70％高氯酸水溶液，混合物在室溫?cái)嚢?8小時(shí)。加入20ml 5％碳酸鈉水溶液和150ml水后，混合物用乙酸乙酯重復(fù)萃取，有機(jī)相被洗滌，干燥并濃縮。通過從甲基叔丁基醚/石油醚結(jié)晶以純的形式得到產(chǎn)物。產(chǎn)量1.3g。
實(shí)施例903-(3，5-二叔丁基-4-羥基苯基)-5-(1，2-二羥基乙基)-2-異噁唑啉，外消旋蘇式異構(gòu)體類似于實(shí)施例89，從2.4g實(shí)施例17的產(chǎn)物完成。產(chǎn)量1.25g晶狀產(chǎn)物。
實(shí)施例911-(3-(4-羥基-3，5-二叔丁基苯基)-2-異惡唑啉-5-基)乙基4-(4-甲基哌嗪-1-基甲基苯甲酸酯二氫溴酸鹽，赤式異構(gòu)體)類似于實(shí)施例86完成。非對(duì)映異構(gòu)體在步驟b)通過分級(jí)結(jié)晶富集。在步驟c)，N-甲基哌嗪被用于代替嗎啉。氫溴酸鹽沉淀后，在步驟d)的異構(gòu)體富集＞95％。產(chǎn)量1.9g赤式產(chǎn)物，從4.7g步驟b)產(chǎn)物得到。表1 藥理試驗(yàn)為了表征其有價(jià)值的抗炎，抗氣喘和免疫調(diào)節(jié)性質(zhì)，和高耐量程度，式I化合物在下列實(shí)驗(yàn)性試驗(yàn)中被檢驗(yàn)，這些試驗(yàn)被認(rèn)為特別適于評(píng)估這類具有抗風(fēng)溫活性的化合物作用的質(zhì)量。
從人的外周血分離多晶核白細(xì)胞(PMNL)以進(jìn)行試驗(yàn)1和2，10ml人血用10ml HBSS(Serva)稀釋，并用15mlLymphoprep(Dr，Molter GmbH，Heidelburg)鋪墊。樣品然后在400×g(每分鐘1600轉(zhuǎn)，Minifuge 2，Heraeus，Osterode)離心分離25分鐘。這導(dǎo)致了形成三相最上層由血漿和血小板組成，中間相是Lymphoprep。由單核細(xì)胞組成的白色環(huán)存在于兩相之間。最下層相由紅細(xì)胞組成，它被一PMNL白色層覆蓋。最上層相，以及Lymphoprep和白色環(huán)用注射器小心地除去。保留的沉積物被小心地再分散于15ml在PM16(mw485000，Sigma，Deisenhofen)中的3％葡聚糖中。懸浮液然后在室溫放置1小時(shí)。在此期間，紅細(xì)胞沉積下來而PMNL保留在上層清液中。除去上層清液，用約等體積的PM16稀釋，在400×g離心分離15分鐘。如果PMNL沉積物被細(xì)胞嚴(yán)重沾污，則需要進(jìn)行低滲溶解。為此，沉積物再懸浮于750μl水中。恰好15秒之后，懸浮液用約7ml PM16稀釋，在400×g離心分離10分鐘。如果需要，這一溶解再重復(fù)一次。按另一方法，將PMNL沉積物再懸浮于合適介質(zhì)中。試驗(yàn)1，釋放解蛋白活性250μl PMNL(5·106個(gè)細(xì)胞/ml含7.5mM葡萄糖的PBS)在37℃與1μl試驗(yàn)物質(zhì)培養(yǎng)20分鐘。然后加入1μl細(xì)胞松馳素B(5μg/ml試驗(yàn)混合物)、混合物在37℃再培養(yǎng)5分鐘。加入1μl組織壞死因子α(TNF，30ng/ml試驗(yàn)混合物)之后，繼續(xù)培養(yǎng)5分鐘。釋放用1μl fMLP(10nmol/l試驗(yàn)混合物)開始。在37℃60分鐘之后，反應(yīng)通過將樣品冷卻至低于0℃而終止。然后將樣品離心分離，上層清液被除去并冷凍。細(xì)胞松弛素B和fMLP被溶于DMSO，而TNF用緩沖液稀釋。50μl上層清液與175μl緩沖溶液(100nM HEPES，pH7.5；500mM NaCl)在96-孔微量滴定板中混合。加入25μl底物(甲氧基丁二?；?L-Ala-L-Ala-L-Pro-L-Val-對(duì)硝基苯胺)，在0，5，10，15，30和60分鐘后，在405nm測(cè)量各孔的消光。試驗(yàn)2，氧基的釋放PMNL被再懸浮(5·106個(gè)細(xì)胞/ml)于Dulbecco’s PBS中，補(bǔ)充7.5mM葡糖。應(yīng)小心地確保PMNL不含紅細(xì)胞。100μlPMNL，700μl PBS＋葡糖和100μl細(xì)胞色素C(9.38mg/ml PBS＋葡糖)在半微池中混合。100μl PMNL，500μlPBS＋葡糖，100μl細(xì)胞松弛素B(1·106mol)，100μlTNF(0.05ng)和100μl細(xì)胞色素C(9.38mg/ml PBS＋葡糖)被混合用于fMLP-誘導(dǎo)的氧釋放。在雙光束光度計(jì)(Perkin-Blmer552S)中在550nm波長(zhǎng)測(cè)量。測(cè)量范圍為0-1消光單位。小池被溫度平衡至37℃。參考小池還含10μl SOD(6mg SOD/ml PBS＋葡糖)。預(yù)培養(yǎng)5分鐘后，反應(yīng)用100μl誘導(dǎo)劑開始。反應(yīng)用1·10-7molfMLP開始。試驗(yàn)3，由白血細(xì)胞形成LTB4白血細(xì)胞的分離40ml人血與8ml6％葡聚糖溶液(葡聚糖mw480000在PM16中)混合。室溫下1小時(shí)后，由白血細(xì)胞組成的上層清液被除去，用等體積PM16稀釋，在300×g(1600rpm)離心分離15分鐘。沉積物隨后再懸浮于約5-6ml PM16中，當(dāng)細(xì)胞數(shù)在CoulterCounter中測(cè)定后，調(diào)節(jié)至107個(gè)細(xì)胞/ml。
試驗(yàn)混合物包含0.24ml細(xì)胞懸浮液，0.03ml 20mM CaCl2/5m MgCl2和5μl試驗(yàn)物質(zhì)。在37℃預(yù)培養(yǎng)15分鐘后，反應(yīng)用0.03ml A23187/谷胱甘肽(100μg A23187/ml；15.4μg谷胱甘肽/ml)開始。在37℃下培養(yǎng)5分鐘之后立即將樣品冷至0℃以下而終止。在Eppendorf Centrifuge(0℃)離心分離2分鐘后，上層清液被除去并色譜檢驗(yàn)。高壓液相色譜(HPLC)HPLC儀包含Kratos泵(Spectro-flow400)，具有75μl樣品環(huán)的冷卻的自動(dòng)BT7041樣品注射器(Biotronik)，Nucleosil C18柱(100*3mm，5μm Chrompack顆粒)，UV檢測(cè)器(Kratos)Spectroflow 757(波長(zhǎng)280nm，測(cè)量范圍0.1AUFS，時(shí)間常數(shù)0.5S)和Spectra Physics積分儀(SP4270)。洗脫劑(725ml甲醇，275ml水和0.1ml乙酸)以0.7ml/分鐘的流速應(yīng)用，壓力約100bar。
注在開始實(shí)際測(cè)量之前，測(cè)量另外的對(duì)照樣品已被發(fā)現(xiàn)是有用的。操作時(shí)，已被設(shè)定的測(cè)量范圍可被檢查和改變，如果需要的話。在細(xì)胞培養(yǎng)之前在特定試驗(yàn)濃度(例如10-5M)在PM16中測(cè)量試驗(yàn)物質(zhì)是極其重要的，因?yàn)樵囼?yàn)物質(zhì)可能隱藏LTB4峰。如果這是事實(shí)，必須選擇更低的濃度。試驗(yàn)4，刺激細(xì)胞因子釋放從人血分離單核細(xì)胞用1ml3.8％檸檬酸鈉溶液穩(wěn)定化的10ml人血用10ml PM16(Seva，Heichelberg)稀釋并用15ml Lymphoprep(Dr.MolterGmbH，Heidelberg)鋪墊。樣品在室溫下在400×g(1600rpm，Minifuge 2，Heraeus，Osterode)離心分離40分鐘。單核細(xì)胞在Lymphoprep/血漿界面可見為白色環(huán)狀物。此環(huán)狀物用注射器小心地取出，用等體積的PM16稀釋，在400×g離心分離10分鐘。沉積物用約10ml RPMI1640(＋300mg/l L-谷酰胺，Gibco，Eggenstein)(Wallis，1986)洗滌。將細(xì)胞再懸浮于約1ml RPMI1640(＋300mg/l L-谷酰胺＋25mM HEPES＋100μg/ml鏈霉素＋100μg/ml青霉素)之后，細(xì)胞密度用Coulter Counter JT(Coulter Diagnostics)測(cè)定并調(diào)至5*106個(gè)/ml。典型地，細(xì)胞由90％淋巴細(xì)胞和10％單核細(xì)胞組成。
230μl單核細(xì)胞在37℃；5％CO2，用10μl試驗(yàn)物質(zhì)(10μMDMSO/水，1/10)和10μl脂多糖(LPS；在開始試驗(yàn)之前500μg溶于1ml DMSO中并用水稀釋1/10；購(gòu)自Salmonella abortus equi，Sigma，Deisonhofen)培養(yǎng)20-22小時(shí)(在IL-6的情況下5小時(shí))。樣品在冰浴中冷至0℃，在Sigma離心機(jī)(2分鐘；2000rpm)上離心分離。上層清液的等分試樣用Elisa(Biermann，Bad Nauheim)測(cè)定?？s寫IL代表白細(xì)胞介素而TNF代表腫瘤壞死因子α。試驗(yàn)5環(huán)氧化酶-依賴的血小板聚集富血小板血漿(PRP)為了抑制血凝固，人血用其體積1/10的3.8％檸檬酸鈉溶液處理。然后在105×g離心分離20分鐘，然后上層清液(PRP)被除去。200μlPRP在37℃，與30μl試驗(yàn)物質(zhì)在PAP4聚集計(jì)(BioData)中預(yù)培養(yǎng)10分鐘。試驗(yàn)物質(zhì)溶于有機(jī)溶劑并用緩沖溶液(50mM TisHCl，pH8.0；90mM NaCl)稀釋。聚集用20μl誘導(dǎo)劑引發(fā)。在聚集期間，以800rpm攪拌。二十碳四烯酸(5mg/ml)用作誘導(dǎo)劑。
試驗(yàn)1至3的結(jié)果概括在表2中。表中的值顯示單位為μm的試驗(yàn)物質(zhì)濃度，除此之外，殘留活性以基于被定為100％的對(duì)照為基礎(chǔ)的百分?jǐn)?shù)測(cè)量。白細(xì)胞介素另在試驗(yàn)4中指明。
表2
該表用實(shí)施例9)解釋64％解蛋白活性(試驗(yàn)1)在加入100μl抑制物質(zhì)實(shí)施例9)之后稀釋。沒有抑制物質(zhì)時(shí)，相應(yīng)于100％解蛋白活性可被釋放。
結(jié)果根據(jù)本發(fā)明的化合物作為炎癥抑制劑是活性的，因?yàn)樗鼈冊(cè)谌梭w白細(xì)胞體系中作為解蛋白活性(試驗(yàn)1)和活性氧(試驗(yàn)2)的釋放，以及白細(xì)胞三烯B4合成(試驗(yàn)3)的抑制劑顯示可感受到的生物活性。在人體系中各種細(xì)胞因子從單核細(xì)胞(試驗(yàn)4)的釋放也被抑制。尤其是，化合物對(duì)環(huán)氧化酶-依賴的人血小板體系(試驗(yàn)5)沒有抑制作用。因此，可預(yù)計(jì)不會(huì)產(chǎn)生可歸固于環(huán)氧化酶抑制的不希望的副作用(延長(zhǎng)出血時(shí)間，胃腸潰瘍和腎毒性)。
試驗(yàn)6在輔助劑/關(guān)節(jié)炎模型中的抗關(guān)節(jié)炎試驗(yàn)Wistar-Lewis系雄性大鼠(M0llegaard/Denmark)被用作試驗(yàn)動(dòng)物。體重在160g至200g之間。將0.1ml Freund’s輔助劑(＝每ml重白石臘油Merch，Darmstadt 6mg乳酪分支桿菌懸浮液，Difco Lab./Detroit，Mich.USA)Subplantar注射到尾巴根部，在實(shí)驗(yàn)的第10至14天，導(dǎo)致免疫病理過程和慢性炎癥，特別是關(guān)節(jié)炎和關(guān)節(jié)周炎病癥形式，在身體的其它部位(繼發(fā)性損傷)。動(dòng)物用購(gòu)自Altrogge，Lage的標(biāo)準(zhǔn)食物Altromin-R隨意喂養(yǎng)，并供給自來水。從實(shí)驗(yàn)的第14天至實(shí)驗(yàn)結(jié)束，動(dòng)物被每kg給予作為止痛劑的60mg可德因。從輔助劑給藥的那天開始，每天(共17天)將試驗(yàn)物質(zhì)以CMC懸浮液，以注射體積1ml/100g體重口服給藥。在實(shí)驗(yàn)的第一天和第18天，每只后爪的體積，和體重被測(cè)量。與未處理的對(duì)照組比較，爪體積增加方面的縮減作為活性標(biāo)準(zhǔn)，兩只爪被平均。結(jié)果被概括于表3中。
試驗(yàn)8抑制腫瘤細(xì)胞增殖腫瘤細(xì)胞系20-10-5S(雜交瘤細(xì)胞系，由ATCC(美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏)提供，它產(chǎn)生抗鼠T細(xì)胞抗體)被用于測(cè)定試驗(yàn)物質(zhì)的抗增生性質(zhì)。細(xì)胞在37℃和5％CO2，在無血清的條件下在GC介質(zhì)(細(xì)胞生長(zhǎng)介質(zhì)＝IScove－ATL(＋清蛋白＋鐵傳遞蛋白＋類脂)；購(gòu)自Vitromex，Vilshofen)中培養(yǎng)。只有對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞被用于試驗(yàn)混合物。試驗(yàn)物質(zhì)以各種濃度(從1至50μm)，與4×10320－10－5S細(xì)胞一起吸入圓底微滴板(介質(zhì)總體積200μl)。培養(yǎng)48小時(shí)應(yīng)(37℃和5％CO2)，25μl氚標(biāo)記的胸苷(＝0.25μCi/試驗(yàn)混合物，比活性，23Ci/mM)被加入板中。在隨后的16小時(shí)期間，放射活性標(biāo)記的胸苷被摻入生長(zhǎng)細(xì)胞的DNA中。樣品在玻璃纖維濾膜上吸濾濾出，且摻入的放射活性用β計(jì)數(shù)器(購(gòu)自Wallac的Beta Plate System 1205)測(cè)量。以摻入的放射活性為基礎(chǔ)，IC50值(50％抑制濃度)與正對(duì)照(沒有試驗(yàn)物質(zhì)的試驗(yàn)混合物)相比被計(jì)算，并被概括于表3中。
表3
＜意指小于
權(quán)利要求
1.一種式I化合物 和/或式I化合物的生理耐受鹽和/或式I化合物的立體異構(gòu)形式；在這里，基團(tuán)R1或R2之一具有式II的意義 而基團(tuán)R1或R2的另一個(gè)具有如下意義a)吡啶基，b)噻吩基，c)噻唑基，d)式III的基團(tuán) 其中n是數(shù)字0，1，2，3，4，5或6，m是數(shù)字0，1，2，3或4，z是1)-O-，或2)-NH-，R5和R6各自獨(dú)立地為1)氫原子，2)(C1-C4)烷基，3)(C2-C4)烯基，4)(C2-C4)炔基，5)苯基，或6)OH，和R7為1)氫原子，2)氨基酸殘基，3)三氟甲磺?；?，4)-O-P(O)(OH)2，5)用苯基或(C1-C6)烷基一-或二-酯化的-O-P(O)(OH)2，或6)式IV的基團(tuán) 其中o是數(shù)字0或1，且其中R9和R10各自獨(dú)立地具有如下意義1)氫原子，或2)(C1-C4)烷基，和R11為1)OH，2)-O-(C1-C4)烷基，3)(C1-C20)烷基，4)(C1-C20)烷基，各自獨(dú)立地被4.1-COOH，4.2-OH，4.3 O-乙?；?.4＝O一次或多次取代，5)-COOH，6)-COO-(C1-C4)烷基-，7)N-甘氨?；?，8)N-甘氨?；?(C1-C4)烷基酯，9)N-(C1-C4)-烷基羥基氨基，10)N-(1H-四唑-5-基)氨基，11)5-甲基異噁唑-4-基，12)1-氰基-2-羥基-1-丙烯基，13)苯基，14)被下式基團(tuán)一次或多次取代的苯基，14.1(C1-C4)烷基-NR12R13其中R12和R13各自獨(dú)立地具有如下意義1)氫原子，2)(C1-C4)烷基，3)苯基-(C1-C2)-烷基，4)R12和R13與連接它們的氮原子一起形成五-至七-員雜環(huán)，該雜環(huán)是未取代的或被(C1-C4)烷基取代一至三次，該取代基的一個(gè)碳原子可被硫，氧或氮原子代替，或5)氨基酸殘基，或R6和R7互相鍵連，并一起為1至3個(gè)CH2基團(tuán)，e)式V的基團(tuán)-Q1-CO-R8，(V)其中Q1是1)-(CH2)m-，其中m是數(shù)字0，1，2，3或4，或2)-CH＝CH-，和R8是1)氫原子，2)(C1-C4)烷基，3)OH，4)-O-(C1-C4)烷基-5)NH2，6)N-(1H-四唑-5-基)氨基，或7)N-(3，5-二甲基-4-羥基芐基)氨基，或f)式VI的基團(tuán) 其中Q2是1)-(CH2)m，其中m是數(shù)字0，1，2，3或4，或2)-CH＝CH-，和X和Y各自獨(dú)立地為1)(C1-C4)烷基，2)-O-(C1-C4)烷基，或3)OH，…A…是存在或不存在的雙鍵，其限制是雙鍵和基團(tuán)R4不同時(shí)存在，R4是1)氫原子，或2)(C1-C6)-烷基，或R2和R4與連接它們的碳原子一起形成由3，4或5個(gè)碳原子組成的脂族環(huán)，而R3是1)氫原子，2)(C1-C4)烷基，或3)羥基-(C1-C4)烷基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的式I化合物，其中基團(tuán)R1或R2之一具有式II的意義，而基團(tuán)R1或R2的另一個(gè)具有如下意義a)2-吡啶基，b)4-吡啶基，c)噻吩-3-基，d)2-噻唑基，e)式III的基團(tuán)，其中n是數(shù)字0，1，2，3或4，而m是數(shù)字0或1，z是1)-O-，或2)-NH-，或R5和R6各自獨(dú)立地為1)氫原子，2)(C1-C2)烷基，3)苯基，或4)OH，或R6和R7互相連接一起形成亞甲基，或R7為1)氫原子，2)三氟甲磺?；?，3)氨基酸基Gly，Phe，Ala，Lys，Tyr或Ser，或4)式IV的基團(tuán)其中O為數(shù)字0或1，R9和R10各自獨(dú)立地為1)氫原子，或2)甲基，R11是1)OH，2)-O-(C1-C4)烷基，3)(C1-C18)烷基，4)互相獨(dú)立地被下列基團(tuán)取代一次或多次的(C1-C6)烷基，4.1-COOH，4.2 OH，或4.3 O-乙?；?)-COOH，6)-COO-(C1-C4)-烷基，7)N-甘氨?；?，8)N-甘氨酰基-(C1-C4)烷基酯，9)N-甲基羥基氨基，10)N-(1H-四唑5-基)氨基，11)5-甲基異噁唑-4-基，或12)1-氰基-2-羥基-1-丙烯基，13)苯基，被13.1)4-(4-嗎啉代)甲基取代一次f)式V的基團(tuán)其中Q1是1)-(CH2)m-，其中m是數(shù)字0，1，或2，或2)-CH＝CH-，而R8是1)氫原子，2)甲基，3)OH4)-O-(C1-C2)烷基，5)氨基，6)N-(1H-四唑-5-基)氨基，或7)N-3，5二甲基-4-羥基芐基，或g)式VI的基團(tuán)，其中Q2是1)-(CH2)m-，其中m是數(shù)字0，1或2，或2)-CH＝CH-，X和Y互相獨(dú)立地為1)甲基，2)-O-(C1-C2)-烷基，或3)OH，…A…是存在或不存在的雙鍵，其限制是雙鍵和R4基團(tuán)不能同時(shí)存在，R4為1)氫原子，或2)(C1-C2)-烷基，或R2和R4與它們所連接的碳原子一起形成具有3，4，或5個(gè)碳原子的脂環(huán)，R3是1)氫原子，或2)甲基，或3)羥甲基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的式I化合物，其中基團(tuán)R1或R2之一具有式II的意義而基團(tuán)R1或R2的另一個(gè)具有如下意義a)2-吡啶基，b)4-吡啶基，c)噻吩-3-基，d)2-噻唑基，e)式III的基團(tuán)，其中n是數(shù)字0，1，2，3或4，而m是數(shù)字0或1，z是1)-O-，或2)-NH-，或R5和R6各自獨(dú)立地為1)氫原子，2)(C1-C2)烷基，3)苯基，或R6和R7互相連接，一起形成亞甲基，或R7為1)氫原子，2)三氟甲磺酰基，3)氨基酸基Gly，Lys或Phe，或4)式IV的基團(tuán)其中O為數(shù)字0或1，R9和R10各自獨(dú)立地為1)氫原子，或2)甲基，R11是1)OH，2)O-甲基或O-乙基，3)(C1-C18)烷基，4)互相獨(dú)立地被下列基團(tuán)取代一次或多次的(C1-C6)烷基，4.1-COOH，4.2 OH，或4.3 O-乙?；?，5)-COOH，6)-COO-(C1-C2)-烷基，7)N-甘氨?；?)N-甘氨?；?(C1-C2)烷基酯，9)N-甲基羥基氨基，10)N-(1H-四唑-5-基)氨基，11)5-甲基異噁唑-4-基，或12)1-氰基-2羥基-1-丙烯基，f)式V的基團(tuán)，其中Q1是1)-(CH2)m-，其中m是數(shù)字0，1，或2，或2)-CH＝CH-，而R8是1)氫原子，2)甲基，3)OH4)-O-甲基，5)氨基，6)N-(1H-四唑-5-基)氨基，或7)N-3，5-二甲基-4-羥基芐基，或g)式VI的基團(tuán)，其中Q2是1)-(CH2)m-，其中m是數(shù)字0，或2)-CH＝CH-，X和Y互相獨(dú)立地為1)甲基，2)-O-(C1-C2)-烷基，或3)OH，…A…是存在或不存在的雙鍵，其限制是雙鍵和R4基團(tuán)不能同時(shí)存在，R4為1)氫原子，或2)甲基，或R2和R4與它們所連接的碳原子一起形成具有3，4，或5個(gè)碳原子的脂環(huán)，R3是1)氫原子，或2)羥甲基。
4.一種制備式I的2-異噁唑啉和異噁唑、和/或式I化合物的立體異構(gòu)形式、和/或式I化合物的生理耐受鹽的方法，其中a)用異氰酸酯和催化量的三乙胺將伯硝基化合物轉(zhuǎn)化為對(duì)應(yīng)的腈氧化物，或用有機(jī)或無機(jī)堿將通過氯化對(duì)應(yīng)的醛肟得到的異羥肟酰氯轉(zhuǎn)化為對(duì)應(yīng)的腈氧化物，作為中間體得到的該腈氧化物不經(jīng)純化就與適當(dāng)取代的烯或炔反應(yīng)，進(jìn)行1，3二極環(huán)加成，形成式I的2-異噁唑啉或異噁唑，如果需要，生成的產(chǎn)物通過結(jié)晶或色譜純化，或b)根據(jù)a)或o)制備的式I的羧酸酯，或通過方法h)或k)額外引入的酯基，被水解為羧酸，或c)根據(jù)方法a)或o)制備的式I的羧酸烷基酯用適當(dāng)取代的伯胺或仲胺轉(zhuǎn)化為對(duì)應(yīng)的酰胺，或d)根據(jù)a)或o)制備的式I的次膦酸一烷基酯或膦酸二烷基酯被水解為膦酸半酯，膦酸或次膦酸，或e)根據(jù)b)得到的羧酸首先被轉(zhuǎn)化為活化的酸衍生物，此衍生物隨后用醇酯化，或用伯胺或仲胺轉(zhuǎn)化為對(duì)應(yīng)的酰胺，或用N-烷基化的羥胺轉(zhuǎn)化為對(duì)應(yīng)的羥基酰胺，或f)在方法a)，b)，h)，e)，o)或g)在中中間得到的或攜帶的N-保護(hù)基或O-保護(hù)基被消除，或被引入的羧酸，次膦酸，膦酸或膦酸酯被相應(yīng)水解，得到式I化合物，或g)根據(jù)方法f)或o)得到的，并具有游離氨基的化合物通過與異氰酸酯反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的脲衍生物，或通過與活化的羧酸衍生物或N-保護(hù)的氨基酸反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的酰胺，或通過與磺酰氯反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為對(duì)應(yīng)的磺酰胺，或h)根據(jù)方法a)，o)或f)得到的，具有游離醇基的化合物通過與異氰酸酯反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的脲烷，或通過與在羧基上被活化并可進(jìn)一步帶有官能團(tuán)的羧酸衍生物或相應(yīng)的N-保護(hù)的氨基酸衍生物反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的酯，或用二烯酮轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的3-氧代丁酸酯，或通過與鹵代化合物如α-鹵代羧酸反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的醚，或i)根據(jù)方法a)，o)或f)得到的，具有伯或仲醇基的化合物被氧化為相應(yīng)的醛或酮，或k)根據(jù)方法i)制備的羰基化合物通過與堿和二烷基膦?；宜狨シ磻?yīng)，轉(zhuǎn)化為巴豆酸衍生物，或通過與四烷基亞甲基二膦酸酯反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的反式-2-(二烷氧基膦?；?乙烯基衍生物，或1)在環(huán)加成期間引入的環(huán)氧基被轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的1，2-二醇，或m)根據(jù)方法g)制備的，含有3H-異噁唑環(huán)的酰胺通過用堿處理進(jìn)行開環(huán)，轉(zhuǎn)化為2-氰基-3-羥基巴豆酰胺，或n)根據(jù)方法a)-m)制備的，由于其化學(xué)結(jié)構(gòu)而以對(duì)映體形式存在的化合物通過與對(duì)映體純的酸或堿成鹽，在手性固定相上層析，或用手性對(duì)映體純的化合物如氨基酸衍生，分開這樣得到的非對(duì)映體，消除手性輔助基，被拆分為純對(duì)映體，或o)通過與手性或外消旋烯環(huán)加成得到的式I的2-異噁唑啉非對(duì)映異構(gòu)體的混合物通過硅膠柱色譜被拆分為純的非對(duì)映異構(gòu)體，或p)根據(jù)方法a)-o)制備的化合物可以以游離形式被分離，或當(dāng)有酸或堿基存在時(shí)，如果需要，被轉(zhuǎn)化為生理耐受鹽，或q)根據(jù)方法h)制備的，帶有其它官能團(tuán)如鹵代甲基的化合物被用伯或仲氨基烷基化，或用醇酯化。
5.一種藥物，含有有效量的至少一種如權(quán)利要求1，2或3的或如權(quán)利要求4得到的式I化合物，和/或式I化合物的生理耐受鹽和/或式I化合物的立體異構(gòu)形式，加上生理上可接受的輔助物質(zhì)和載體物質(zhì)，而且，如果需要，進(jìn)一步含有助劑和/或其它活性化合物。
6.至少一種如權(quán)利要求1，2或3的化合物在制備用于預(yù)防和治療氣喘病，炎癥和/或自身免疫疾病的藥物方面的用途。
7.一種制備如權(quán)利要求5的藥物的方法，其中至少一種如權(quán)利要求1，2或3的或如權(quán)利要求4得到的式I化合物，和/或式I化合物的生理耐受鹽和/或式I化合物的立體異構(gòu)形式與生理上可接受的輔助物質(zhì)和載體物質(zhì)，而且，如果需要，進(jìn)一步含有助劑和/或其它活性化合物一起制成用于給藥的合適形式。
全文摘要
一種式(I)的化合物，式(I)的化合物的生理耐受鹽和/或式(I)的化合物的立體異構(gòu)形式，其中殘基R
文檔編號(hào)A61P29/00GK1143956SQ95192004
公開日1997年2月26日 申請(qǐng)日期1995年3月3日 優(yōu)先權(quán)日1994年3月10日
發(fā)明者W·施瓦布, H·安格諾斯托普洛斯, R·R·巴特萊特, R·施萊爾巴赫, K·U·威思曼 申請(qǐng)人:赫徹斯特股份公司